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实时荧光定量PCR法快速检测食品中大肠埃希菌
目的 应用实时荧光定量PCR技术,结合3～5h的前增菌处理,建立食品中大肠埃希菌的快速、灵敏、定量的检测方法.方法 以大肠埃希菌(ATCC 25922)为参考菌株,对培养基和培养温度进行优化,选择佳的前增菌培养条件.将不同浓度的参考菌株和样品分别接种前增菌液中培养3～5h.采用Triton-X 100提取增菌后的DNA,实时荧光定量PCR扩增大肠埃希菌特异性片段.所得Ct与对应的原始(增菌前)参考菌株的浓度,建立标准曲线,计算样品中大肠埃希菌的数量.结果 纯培养模式下,经过3、4和5h的前增菌后,标准曲线具有很好的线性,r2分别为0.996、0.992和0.991,对应的检测限为136、14和1.4 cfu/100 ml;含杂菌培养模式下,NB和EC肉汤42.0℃增菌4h后,建立的标准曲线r2分别为0.972和0.978.在不同食品中该方法的加标回收率为74.0％～174.0％.结论 3～5h的前增菌实时荧光定量PCR方法可以快速、灵敏、定量地检测食品中活的大肠埃希菌.
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6种食源性致病菌质控考核结果分析
目的 对承担食品安全风险监测任务的全国各级疾病预防控制中心开展微生物质量控制考核,以评价其对6种食源性致病菌的检验能力.方法 6种质控考核菌株包括单核细胞增生李斯特菌、蜡样芽胞杆菌、阪崎肠杆菌、大肠埃希菌、沙门菌以及金黄色葡萄球菌.按照2011和2012年设计的组合,将新鲜培养的致病菌增菌液混合后滴加于灭菌奶粉载体中制成样品.2011年考核制备了6种样品(Ⅰ ～ Ⅵ),2012年为10种样品(A～J).运用点分数法对两年结果分别进行满意率评价,率的比较用Pearson x2检验或对数似然比x2检验.结果 2011和2012年考核总体满意率分别为86.5％(268/310)和84.3％(375/445),2011年样品满意率低的是空白样品Ⅵ(68.0％,17/25),2012年满意率低的是G样品(0.0％,0/8).2011和2012年考核结果主要漏检的是大肠埃希菌,其中2012年大肠埃希菌漏检率占漏检总数的85.7％(60/70).2011年非考核菌中漏检多的是金黄色葡萄球菌和蜡样芽胞杆菌.2012年考核结果主要多检的是金黄色葡萄球菌,占多检总数的36.8％(7/19).两年的结果均显示大肠埃希菌和阪崎肠杆菌组合样品中,大肠埃希菌的漏检率明显增高.沙门菌和大肠埃希菌的血清分型正确率较低,分别为41.5％(95/229)和45.1％(105/233).单核细胞增生李斯特菌易错误鉴别成英诺克李斯特菌,蜡样芽胞杆菌易错误鉴别成草状芽胞杆菌,阪崎肠杆菌易错误鉴别成河生肠杆菌.结论 80％以上的疾病预防控制中心对6种致病菌的定性检验能力较好,可以满足食品安全风险监测的需求.其中对沙门菌的检验能力高;金黄色葡萄球菌漏检率较低但易出现多检;大肠埃希菌的检验能力有待提高;阪崎肠杆菌的检验水平较2010年结果有明显提升.
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大肠埃希菌尿路感染的耐药性特点分析
目的:探讨大肠埃希菌尿路感染的耐药性特点.方法:收集2013年2月至2015年1月我院诊断为尿路感染患者的临床资料,共计926例.根据患者尿液标本中的大肠埃希菌是否产超广谱β内酰胺酶(ESBL),进一步分为:研究组(产ESBLs)和对照组(不产ESBLs).分析926例患者的尿路感染情况,分析研究组和对照组的药敏结果.结果:926例患者中,革兰氏阴性菌(G-)、革兰氏阳性菌(G+)及真菌的感染比例分别为62.4％、25.7％、8.9％,比较有统计学差异(P＜0.05).研究组对10种抗菌药物的药敏结果与对照组均在明显差异,比较有统计学差异(P＜0.05).结论:G-菌仍是尿路感染的主要细菌,ESBL大肠埃希菌耐药性强,亚胺培南及头孢哌酮-舒巴坦为治疗的首选药物.
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肺部感染肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌感染及耐药分析
目的:了解我院肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌肺部感染以及超广β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率、流行情况、耐药性,并探讨ESBLs产生的危险因素.方法:收集肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌肺部感染共114例,ESBLs的检测用纸片扩散表型试验确证.结果:大肠埃希菌中产ESBLs菌株为40.0%,肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株为21.6%,总检出率为28.1%,上述产ESBLs菌株得亚胺培南高度敏感(100%),派拉西林/他唑巴坦为62.5%,头孢哌酮/舒巴坦为59.3%.结论:除亚胺培南外,哌拉西林/他唑吧坦和头孢哌酮/舒巴坦也可作为治疗产ESBLs细菌感染的药物,改善营养状况,减少侵入性才,减少激素或制酸剂的应用可能减少ESBLs菌株的出现,降低患者病死率.
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产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌120例药敏分析
目的：探讨婴幼儿感染产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的分布特点及药敏情况，指导临床合理选用抗菌药物治疗。方法：2011年12月-2013年12月送检的痰、血液、脑脊液等标本进行一般细菌培养，血液注入小儿中和抗生素血培养瓶，放置BacT/ALERT3D血培养仪培养，用法国生物梅里埃系统鉴定细菌，以K-B法进行药敏分析。结果：共检出大肠埃希菌120株，其中有49株产 ESBLs(40.83%)，其中2012年检出大肠埃希菌52株，有13株产ESBLs(25.0%)；2013年检出大肠埃希菌68株，有36株产ESBLs(52.94%)。118株分离自呼吸道标本(98.33%)，2株分离自血液(1.67%)。49株产ESBLs大肠埃希菌对青霉素类、头孢菌素类100%耐药，对氨苄西林/舒巴坦和替卡西林/克拉维酸的不敏感率分别为73.6%和42.3%；对哌拉西林/他唑巴坦20.6%中度敏感，79.4%敏感，对头孢哌酮/舒巴坦高度敏感，敏感率86.32%。未出现耐亚胺培南或美洛培南菌株。结论：新生儿感染大肠埃希菌以呼吸道标本检出多， ESBLs阳性率2013年比2012年有明显升高趋势，对β-内酰胺类抗菌药物耐药严重，多重耐药现象不容乐观，临床应根据药敏试验结果合理选用抗菌药物，避免诱导型耐药菌株的产生。
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头孢他啶治疗大肠埃希菌呼吸道感染的临床研究
据报道大肠埃希菌株对头孢噻肟钠和头孢曲松钠的耐药率高,而对头孢他啶的耐药率低.为了证实这一结论,我们设计了这一临床研究,探索头孢他啶治疗大肠埃希菌呼吸道感染的可能性.
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结肠癌组织与正常结肠组织肠道菌群结构差异
目的 探查结肠癌组织及正常结肠组织中大肠埃希菌属及具核梭杆菌属的差异.方法 收集承德医学院附属医院2015～2017年在本院内镜室就诊,经结肠镜及病理确诊结肠癌患者的结肠癌组织及肠镜检查肠道正常患者乙状结肠组织,提取标本总RNA,使用细菌16SRNA V3高变区F357-GC和R518作为引物进行基因扩增,琼脂糖凝胶电泳确定16s条带,应用UNIQ-10柱式RNA胶回收试剂盒回收,对目的片段进行克隆测序,与已知Gen Bank比对获得菌群的种属名称,找到大肠埃希菌属及具核梭杆菌属的条带,应用美国的NIH ImageJ1.38软件进行光密度值测定.结果 结肠癌及正常结肠组织中大肠埃希菌条带平均OD值为1.43±0.53 vs 0.67±0.42,差异有统计学意义P＜0.05.具核梭杆菌属条带平均OD值分别为1.35±0.62 vs 0.40±0.43,差异有统计学意义P＜0.05.结论 大肠埃希菌和具核梭杆菌在结肠癌组织中含量高于正常结肠组织.
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4年间我院儿科临床大肠埃希菌耐药性变迁分析
目的:监测我院4年间儿科临床分离的大肠埃希菌的耐药情况,了解其耐药性发生和发展的规律,以指导儿科临床合理选用抗大肠埃希菌药物.方法:2001年1月～2004年12月从儿科临床标本分离的84株大肠埃希菌按照分离时间分为2001～2002年组(2001年1月～2002年12月)48株和2003～2004年组(2003年1月～2004年12月)36株,分别比较两组产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)和对22种抗菌药物敏感性试验结果.结果:ESBLs检测结果:2001～2002年组产ESBLs株检测率为37.5%(15/40),2003～2004年组产酶株捡出率为46.9%(15/32),经χ2检验,P＞0.05,无显著性差异.药物敏感性实验结果:2003～2004年组比2001～2002年组耐药率明显升高,22种抗生素中除外亚胺培南未发现耐药菌外,其他抗生素耐药率均有不同程度增高,增幅为(16.7%～88.9%),经χ2检验,均有极显著性差异(P＜0.01),其中耐药率上升快的5种抗生素分别为头孢曲松、头孢唑啉、头孢噻肟、头孢拉定、头孢呋辛.耐药率上升较慢的5种抗生素分别为阿米卡星、头孢西丁、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他定和四环素.结论:儿科临床大肠埃希菌耐药性发展迅速,以对头孢类抗生素耐药性上升为显著,且呈多重耐药趋势.治疗上不宜选用头孢类抗生素和复方磺胺甲噁唑,应选用头孢西丁、加酶抑制剂复合抗生素以及亚胺培南.
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326株大肠埃希菌临床分离株分布特征及耐药性分析
目的:对2010年分离出的326株大肠埃希菌的临床分布特征和耐药性的情况进行回顾性分析,为临床合理应用抗生素以及院内感染的监测提供参考依据.方法:采用梅里埃公司的VITEK2全自动微生物分析仪对标本进行细菌鉴定和药敏分析.对产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌确证实验,采用美国临床检验室标准化委员会(CLSI)推荐的纸片扩散法,并严格按照其制定的标准进行确证实验.结果:在326株大肠埃希菌中,来自痰液和咽拭子的占60.80%,中段尿占24.28%;在病房中,主要分布在新生儿重症监护室、呼吸科和重症监护室,分别占比率为20.55%、15.33%、14.72%.在这些科室内,来自婴幼儿和严重患者的标本所占的比例较多.在326株大肠埃希菌中,检出产ESBLs的大肠埃希氏菌共有135株,阳性菌株占41.41%.在药敏检测中,大肠埃希菌对亚胺培南(泰能)和美罗培南的敏感率分别是100%和98%,ESBLs的菌株对亚胺培南和美罗培南的敏感率均为97.7%.对其他抗生素的敏感性二者差别不明显.结论:在标本类型分布中,以痰液和咽拭子以及中段尿所占比例高.在病房分布中,以新生儿重症监护室、呼吸科和重症监护室排在前三位.大肠埃希菌以引起婴幼儿和危重患者的呼吸道,泌尿道感染为主,大肠埃希菌的检出率很高,且多重耐药严重,ESBLs阳性的菌株对亚胺培南和美罗培南显示了极高的敏感性.对检测的其他抗生素敏感性和文献报道的有所不同,存在有一定的地域差别,这可能跟不同地区用药习惯不同,造成细菌耐药情况也有所不同.
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中药灌肠加微波治疗输卵管原因性不孕症
不孕症是一种让一个家庭感觉到绝望的病症,它严重影响着女性的身心健康.据WHO统计,21世纪不孕症正成为女性仅次于肿瘤和心血管疾病的第三大疾病.我院是一个以中医治疗不孕不育为特色的专科医院,从来我院就诊的不孕症病例来看,其中因输卵管原因导致不孕的病例40%～60%,这些病例中又以慢性输卵管炎症占绝大多数.由于近年来像淋病奈瑟菌感染、沙眼衣原体、支原体感染、大肠埃希菌、病毒、厌氧菌感染等生殖道感染性疾病发病率呈逐年上升趋势,加上女性生殖系统的特殊性,各种妇科炎症极易上行感染导致输卵管炎症的发生,如果炎症严重还会导致输卵管失去柔软蠕动的生理性能,输卵管会变得僵硬、扭曲,输卵管扩张积水、积脓,管腔狭窄甚至完全堵塞,终失去生育能力.
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大肠埃希菌耐药性的回顾性分析
目的:了解大肠埃希菌对抗生素的耐药性变迁,为临床抗感染治疗提供选药依据.方法:采用双纸片扩散试验,药敏试验采用K-B法.结果:5年中大肠埃希菌产超广谱β内酰胺酶的发生率呈逐年上升趋势.从2005～2009年产ESBLs率分别为30.5%、32.9%、34.3%、38.9%、42.4%.产ESBLs菌对氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类交叉耐药,且呈逐年上升趋势.结论:临床应重视ESBLs的检测,根据药敏试验合理选用抗生素.
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2010年深圳市光明地区产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌的监测和耐药性分析
目的:探讨2010年深圳市光明地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的发生率及耐药性分析,为临床合理选择、使用抗菌药物提供可靠依据.方法:对临床分离出的G-杆菌,主要是肠杆菌科细菌在进行药敏试验的同时进行ESBLs的检测,药物敏感性试验多数采用分析仪检测,少数采用纸片扩散法敏感试验(改良K-B法),产ESBLs细菌的检测采用1999年NCCLS建议的确证试验.结果:334株检出91株产ESBLs菌,总检出率27.2%,其中,179株大肠埃希菌检出产ESBLs菌51株,检出率28.5%;104株克雷伯菌检出产ESBLS菌34株,检出率32.7%.两种主要产ESBLs菌的药敏结果,大肠埃希菌对常用10种抗生素的敏感率高低依次为:亚胺培南西司他丁＞哌拉西林/他唑巴坦＞阿米卡星＞头孢西丁＞复方新诺明＞庆大霉素＞环丙沙星＞头孢他啶＞头孢噻吩＞哌拉西林.肺炎克雷伯菌对10种常用抗生素的敏感率依次为:亚胺培南西司他丁＞哌拉西林/他唑巴坦＞复方新诺明＞头孢西丁＞阿米卡星＞头孢他啶＞庆大霉素＞环丙沙星＞头孢噻吩＞哌拉西林.结论:应加强重视对产ESBLs细菌发生率的监测和耐药性分析,对临床合理选择、使用抗生素、防止院内产ESBLs细菌的传播、流行具有重要的临床意义.
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132株肺炎克雷伯菌和204株大肠埃希菌的ESBLs酶耐药分析
2011年1～12月细菌室对各临床科室送检的各种标本,包括痰、尿、咽拭子、胸腹水、分泌物等,培养鉴定分离出204株大肠埃希菌和132株肺炎克雷伯菌后进行统计分析,研究肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶的情况,分析各类药物的敏感率,为临床科室提供用药的依据.
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105例新生儿大肠埃希菌感染性肺炎临床分析
目的 探讨新生儿大肠埃希菌感染性肺炎的临床特点及疗效.方法 观察105例痰培养大肠埃希菌阳性和50例痰培养阴性的新生儿肺炎患儿的临床特点及治疗分析.结果 大肠埃希菌肺炎组以气促、吐白沫为主,严重者颜面青紫,出现呼吸困难、抽搐、心力衰竭;非埃希菌肺炎组临床表现以缺氧为主,少部分表现为气促、咳嗽;82.9%(87/105)的大肠埃希菌为超广谱β-内酰胺酶(ESBLa)阳性菌株,对所有青霉素类、头孢菌素类及氨曲南耐药;埃希菌肺炎组患儿静脉用美洛培南注射液,10～14 d临床治愈率93.3%,对照组新生儿经静脉用青霉素或氯唑西林7～10 d,呼吸道症状消失好转出院.结论 新生儿大肠埃希菌感染性肺炎多见于早期新生儿,呼吸道症状较重;美罗培南治疗有效.
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大肠埃希菌医院感染的危险因素分析
目的 探讨大肠埃希菌医院感染的危险因素.方法 对华容县人民医院2009年1月至2010年5月的住院患者临床检出的大肠埃希菌,用双纸片法进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测,同时对患者的基本情况、感染因素及ESBLs检测前的抗生素应用情况进行调查.结果 192株大肠埃希菌中,医院感染34株,占17.71%;产ESBLs菌74株,占38.54%.内科患者医院感染比率明显高于其他病房;侵入性操作在医院感染和社会感染中的构成比也有显著性差异.结论 侵入性操作、免疲力低下以及ESBLs的产生是大肠埃希菌医院感染的危险因素.
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多重耐药大肠埃希菌耐药性分析
目的 了解本院院内不同来源大肠埃希菌耐药情况,指导临床用药.方法 回顾性分析我院经临床分离的360株大肠埃希菌菌株,观察其耐药性.结果 ①大肠埃希菌来源于脓液的多,为40.8％,痰;②头孢噻肟与头孢噻肟/克拉维酸纸片对产ESBLs菌株检出率为68.3％,远高于头孢他啶/克拉维酸纸片检出率(43.1％,P＜0.05);③产ESBLs菌株对除了头孢呋辛、阿米卡星及氯霉素外其他抗生素耐药性高于非ESBLs菌株(P＜0.05);两种菌株均对亚胺培南不产生耐药,除此药之外产ESBLs菌株还对阿米卡星敏感性较高而非ESBLs菌株对阿米卡星及氨曲南敏感性高.结论 产ESBLs的大肠埃希菌耐药性高,临床上治疗大肠埃希菌要选择碳青霉烯类抗菌药物等敏感性药物治疗.
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连续4年临床分离的大肠埃希菌耐药性分析
目的 统计分析某医院患者分离的大肠埃希菌临床分布及耐药性分析,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 收集2012—2015年从临床各种标本分离的大肠埃希菌,共1594株,菌种鉴定采用VITEK-2 Compact微生物鉴定系统,药敏试验按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的标准进行结果 解释.结果 1594株大肠埃希菌,主要分离自尿液、痰液、全血和其他标本,各占43.0%、22.6%、18.4%和16.0%;其科室分布前3位的是泌尿外科、老年科和MICU;大肠埃希菌中检出产ESBLs的大肠埃希菌927株,占58.2%;并且连续4年产ESBLs的大肠埃希菌的检出率分别为51.2%、51.8%、62.2%和66.7%,并逐年有上升趋势;产ESBLs大肠埃希菌耐药率明显高于非产ESBLs大肠埃希菌,未发现耐亚胺培南和美罗培南的大肠埃希菌.结论 产ESBLs大肠埃希菌对其药敏谱中抗菌药物的耐药率维持在较高水平,应加强大肠埃希菌耐药性监测,根据药敏结果 合理使用抗菌药物.
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71株感染性大肠埃希菌药敏分析
目的 了解大肠埃希菌感染情况及药敏现状,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法 采用珠海迪尔生物有限公司提供的肠杆菌科细菌鉴定/药敏专用板对临床分离出的71株大肠埃希菌进行鉴定及药敏试验分析.结果 71株大肠埃希菌有38株产超广谱-内酰胺酶(ESBLs),产酶率为53.5％.对头孢唑林、庆大霉素、氨苄西林、头孢噻肟、头孢呋辛、头孢曲松、哌拉西林、复方新诺明等抗菌药物的耐药率均＞50％,其中复方新诺明耐药率高,为80.3％,其次是氨苄西林、哌拉西林,分别为73.2％、71.8％.但对亚胺培南、美罗培南、头孢西丁、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦及头孢哌酮/舒巴坦有较好的抗菌活性,其中亚胺培南敏感率达100％,其余敏感率都在90％以上.结论 大肠埃希菌的耐药情况比较严重,亚胺培南是治疗大肠埃希菌的有效药物.医院应加强细菌耐药性监测,加强抗菌药物的管理.在抗感染治疗前,应先进行细菌培养、鉴定及药敏试验,根据药敏试验结果,合理选用抗菌药物,以避免或减少耐药菌株的出现和扩散.
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产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药性研究
目的 研究临床标本检出产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的耐药特性,为临床科学选药提供依据.方法 采用临床标本检测和细菌鉴定技术,对某医院临床送检标本病原学检测和细菌鉴定结果及耐药性进行调查与分析.结果 分离自感染患者痰液和尿液中的产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌对临床常用抗菌药物普遍耐药；对头孢哌酮、头孢呋辛钠和磷霉素的耐药率均为100％；仅对亚胺培南和美罗培南比较敏感.结论 分离自不同标本中的产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌对多数抗菌药耐药,仅对极少数抗菌药物比较敏感,提示临床要根据药敏试验结果选择抗菌药物.
关键词： 大肠埃希菌 产超广谱β-内酰胺酶 耐药性 -
产ESBL多重耐药大肠埃希菌对3种消毒剂抗性研究
目的 研究临床分离的产ESBL多重耐药大肠埃希菌对3种消毒剂抗性情况,分析其耐药性与消毒剂抗力的关系.方法 采用体外抗菌试验方法,对某医院临床分离出的产ESBL多重耐药大肠埃希菌抗消毒剂情况进行观察.结果 临床分离的28株产ESBL多重耐药大肠埃希菌对临床常用抗菌药物普遍耐药,不同菌株同时耐抗菌药物种类不同.28株临床分离菌株中,有27株对乙醇和戊二醛的MIC值均高于标准株,占总菌株数的96％;有17株临床分离多重耐药大肠埃希菌对碘伏消毒液的MIC值高于标准株.结论 临床分离的产ESBL多重耐药大肠埃希菌对抗生素有较高耐药性,同时亦对乙醇和戊二醛呈现出MIC和MBC升高;各种来源菌株的耐药性与消毒剂抗力大小无明显相关性.
