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阪崎肠杆菌检测方法的研究进展
阪崎肠杆菌是食品和环境中广泛存在的一种条件致病菌,该菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和菌血症.近年来,随着对该菌的日益重视,其检测方法也得到不断的发展和改善.本文对阪崎肠杆菌的非特异性与特异性传统检测方法,PCR检测、探针法和实时PCR等分子生物学检测方法以及其他相关方法进行了综述.
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一例由阪崎肠杆菌感染引起腹泻患儿的溯源分析
目的 对1例反复腹泻的4月龄婴儿进行病原学检测和溯源分析,为临床治疗和预防由此引起的食源性疾病提供依据.方法 根据流行病学调查资料,采集患儿粪便样本4次,食用奶粉、米粉及饮食相关器皿及环境样本进行肠道病原菌分离培养,对检出的病原菌进行药敏试验和脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)分子分型,根据药敏结果指导临床用药.结果 前3次采集的患儿粪便和患儿家中放置奶瓶的桌面涂抹样中均检出阪崎肠杆菌,4株分离株PFGE型别一致,患儿经敏感性治疗康复.结论 阪崎肠杆菌可通过环境污染感染致病,快速准确的诊断及敏感性治疗能及时治愈阪崎肠杆菌感染.
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阪崎肠杆菌实时荧光TaqMan PCR检测方法的研究
目的 建立阪崎肠杆菌的TaqMan PCR检测方法.方法 将阪崎肠杆菌的菌悬液连续10倍稀释后与健康人新鲜粪便混匀,制备成1.2×10(0)~1.2×10(8) cfu/ml梯度浓度的粪便模拟标本并提取DNA,用以评价阪崎肠杆菌实时荧光TaqMan PCR法对临床模拟标本检测的灵敏度、特异性和稳定性.结果 实时荧光TaqMan PCR法对阪崎肠杆菌粪便模拟标本的检测灵敏度为1.2×10(3) cfu/nd;其线性检测范围为:1.2×10(3)~1.2×10(8) cfu/ml;在稳定性评价中,对含菌量为1.2×10(8)、1.2×10(6)和1.2×10(4) cfu/ml的粪便模拟标本进行实时荧光TaqMan PCR法重复检测10次,结果显示扩增反应Ct值的变异系数(CV)为0.65%~1.47%;在特异性评价中,除了阳性对照其余样本均未见特异性扩增曲线.结论 本研究建立了阪崎肠杆菌实时荧光TaqMan PCR法.
关键词: 阪崎肠杆菌 实时荧光TaqMan PCR 外膜蛋白A -
1株与致病性大肠埃希氏菌O114∶K90(B)交叉凝集的阪崎肠杆菌
目的 对从奶粉中食源性致病菌考核样中检出的与致病性大肠埃希氏菌O114∶K90(B)发生交叉凝集的阪崎肠杆菌进行鉴定和分析.方法 依据食品安全(或食品卫生)国家标准食品微生物学检验部分相关章节,对考核样分离到的菌株采用血清学和生化反应进行检验.结果 从考核样中初步检出的血清学凝集结果疑似为致病性大肠埃希氏菌O114∶K90(B),经全面的细菌生长特性实验、全自动细菌鉴定系统,终鉴定为阪崎肠杆菌.结论 在肠道致病菌的鉴定中,即便血清学反应符合的菌株也要结合全面的生化反应结果和生长特性再做出终的判断.
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食源性致病菌快速分子学检测方法探讨
随着国内居民生活水平的整体提高,食品的质量和安全问题也成了消费者和生产企业共同关注的焦点,除了化学添加剂外,致病性微生物也是导致重大食品安全问题的风险因素. 致病性微生物(主要是食源性致病菌)检测是食品安全实验室检测中的重要环节,对相关检测技术的探讨也是食品微生物实验室工作人员关注的内容.目前比较常见的食源性致病菌主要包括肠道沙门氏菌(Salmonella enterica)、单核增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)、空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)、出血性大肠埃希氏菌0157 (Escherichia coli O157:H7)、阪崎肠杆菌(Enterobacter sakazakii)和金黄色葡萄球菌 (Staphylococcus aureus).
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佛山市三水区销售婴幼儿配方粉中阪崎肠杆菌污染状况调查
目的:通过对2012-2014年佛山市三水区CDC对区内各大超市婴幼儿配方奶粉和婴幼儿辅助食品抽样调查的情况进行汇总分析,了解阪崎肠杆菌的污染情况。方法:根据随机抽样的方法原则,2012-2014年在佛山市三水区内覆盖80%消费人口的各大超市内随机抽取婴幼儿配方奶粉和婴幼儿辅助食品,将检验结果汇总分析。结果:共检测60份样品,8份样品检出阪崎肠杆菌,检出率为13.33%,检出阳性样品均为婴幼儿辅助食品。结论:佛山市三水区销售婴幼儿配方奶粉和婴幼儿辅助食品中有阪崎肠杆菌的污染,对婴幼儿健康有潜在危害,应加大监测力度,采取有效措施,减少阪崎肠杆菌对婴幼儿健康的危害。
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营养米粉中阪崎肠杆菌检测方法研究进展综述
在我国经济发展的大趋势下,食品工业也进入了迅猛发展的黄金阶段.然而,部分食品企业在加工生产中没有树立良好的食品安全意识,致使食品在生产中发生污染,产生一些对消费者造成健康隐患的致病菌,阪崎肠杆菌就是其中之一.以营养米粉为例,本文主要探讨食品检测环节中阪崎肠杆菌检测方法的发展现状,并通过积极思考,展望营养米粉中阪崎肠杆菌检测的未来方向,以供参考.
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乳制品中阪崎肠杆菌的快速检测
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阪崎肠杆菌测试片快速准确保障乳品安全
阪崎肠杆菌是乳制品中新发现的一种病原菌,已被世界卫生组织和许多国家确定为引起婴幼儿死亡的重要条件致病菌.从2005年开始我国陆续出台了阪崎肠杆菌检测的行业标准和国家标准.
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测试片法:实现乳品阪崎肠杆菌的快速检测
阪崎肠杆菌是寄生于人和动物肠道内的条件性致病菌,可导致新生儿出现脑膜炎,败血症及坏死性结肠炎等疾病,具有发病急,致死率高等特点.该菌的自然来源比较广泛,但是从多起阪崎肠杆菌引发的中毒事件中发现,婴幼儿配方奶粉是目前阪崎肠杆菌主要感染渠道.而2002年和2003年发生的两家国际乳业巨头因产品中检出阪崎肠杆菌主动召回产品的事件则使阪崎肠杆菌成为世界瞩目的焦点.正因如此,2004年阪崎肠杆菌被列为婴幼儿配方奶粉中的A类致病菌,不得检出.
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陕西 乳业公司被移交公安机关
5月4日?从陕西省食品药品监督管理局获悉,由于陕西红旗乳业科技有限公司生产不符合食品安全国家标准婴儿配方羊奶粉的行为,已涉嫌构成刑事犯罪,陕西省食品药品监督管理局日前将该案移交公安机关处理。据了解,国家食品药品监管总局在2016年第一季度陕西省婴幼儿配方乳粉专项监督抽检中,标称陕西红旗乳业科技有限公司2015年9月27日生产的1批次爱馨多牌优智婴儿配方羊奶粉检出致病性微生物阪崎肠杆菌不符合食品安全国家标准。2016年2月2日,陕西省食药监局收到国家总局第一季度对陕西红旗乳业科技有限公司监督抽检1批次婴幼儿配方乳粉不合格报告后,立刻成立专案组启动了核查处置工作,下达了责令整改通知书,责令企业停止经营并召回不合格产品,并立案开展调查工作。陕西红旗乳业科技有限公司生产不符合食品安全国家标准婴儿配方羊奶粉的行为,已涉嫌构成刑事犯罪,陕西省食品药品监督管理局日前已将该案移交公安机关处理。
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食品安全,始于"足"下——湿式抑菌脚垫,有效降低脚底细菌污染
近年来,食品安全受到前所未有的关注,这不仅与消费者食品安全意识的提高有关,更与不少食品企业(包括知名企业)出现食品安全问题有关,如三鹿"三聚氰胺"事件、蒙牛特仑苏遭受质疑、三种味全配方奶粉进境时被检出阪崎肠杆菌超标等.
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阪崎肠杆菌脉冲场凝胶电泳分型的研究
目的 对29株阪崎肠杆菌分离株和2株阪崎肠杆菌模式株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型研究.方法 分别利用限制性内切酶XbaⅠ和SpeⅠ酶切阪崎肠杆菌染色体DNA进行PFGE分析,利用BioNumerics软件进行聚类分析.结果 31株阪崎肠杆菌使用XbaⅠ和SpeⅠ酶切分别有30种PFGE带型.除ES004和ES005外,其他29株阪崎肠杆菌经XbaⅠ或SpeⅠ酶切后的PFGE条带之间均存在不同程度的差异.来源于同品牌同批次中不同包装的产品中的ES004和ES005分离株XbaⅠ和SpeⅠ酶切图谱完全一致(相似度为100%).根据BioNumerics软件分析结果可知,除分离株ES004和ES005外,其他分离株的带型和样品来源之间无显著相关性.结论 虽然XbaⅠ酶切的PFGE带型平均条带少于SpeⅠ,但对阪崎肠杆菌具有足够的分辨率.两种PFGE分型方法都可应用于阪崎肠杆菌的分子分型和溯源.
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婴幼儿配方粉中阪崎肠杆菌分离株的药敏分析
目的 研究中国婴幼儿配方粉中阪崎肠杆菌分离株的药物敏感性和耐药性.方法 采用纸片扩散法测定了16株婴幼儿配方粉阪崎肠杆菌分离株对亚胺培南、环丙沙星、阿米卡星、头孢他啶等6大类28种抗生素的药敏结果.结果 所有阪崎肠杆菌均对万古霉素、苯唑西林和青霉素G耐药,除1株阪崎肠杆菌之外,其他菌株同时也对头孢唑林和头孢泊肟耐药;所有菌株对13种以上的抗生素敏感.结论 加强对预防用药和临床用药的重视,以减少阪崎肠杆菌多重耐药性的增加和经验用药的失误.
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阪崎肠杆菌的分类变化及新种属生物学特性
阪崎肠杆菌是影响婴幼儿配方粉安全的主要致病菌之一,1980年被定义为一个种,然而,<国际系统与进化微生物学杂志>
在2008年58卷第6部分的通知单上公布了阪崎肠杆茵重新分类后的新名称和新组合.本文综述了该菌的分类关系、新属和新种生物学特性及其研究进展,以便于国内相关人员及时了解阪崎肠杆菌的新动态,也有助于中文名称的统一与规范. -
成都市市售国产婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌污染情况调查
目的 了解成都市市售的国产婴幼儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的污染情况.方法 对2006年9月至2007年3月采集的80份市售婴幼儿配方奶粉进行菌落总数、大肠菌群及阪崎肠杆菌的检测,并对分离的阪崎肠杆菌进行药敏试验.结果 所有检测样品中,有5份样品检出阪崎肠杆菌,阳性率为6.25%,且其中4份样品的菌落总数、大肠菌群均合格.分离的阪崎肠杆菌对常用抗生素普遍敏感.结论 中国市售的国产婴幼儿配方奶粉中存在少量的阪崎肠杆菌污染.
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阪崎肠杆菌和沙门菌多重PCR检测方法的建立
目的 建立阪崎肠杆菌和沙门菌的多重PCR检测方法.方法 针对阪崎肠杆菌外膜蛋白A(ompA)基因和沙门菌属侵袭性抗原保守基因(invA)基因设计引物,建立其多重PCR检测方法,并对反应条件进行优化.结果 两对引物分别能扩增出469bp和284bp的目的 条带,结果具有高度特异性,反应条件优化后,两菌可同时检出的浓度限度为106cfu/ml.结论 该方法敏感、特异,为快速检测阪崎肠杆菌、沙门菌提供了新的有效手段.
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双流国际机场食用冰块卫生状况调查分析
目的 调查了解双流国际机场餐饮企业自制食用冰块的卫生状况,为国境口岸食源性疾病防控工作提供科学依据.方法 抽查双流国际机场19家餐饮企业的自制食用冰块37份,按GB 2759.1-2003《冷冻饮品卫生标准》进行检验和评价.结果 抽查的37份食用冰块中,合格样本16份,合格率为43.24%.不合格样本为菌落总数和大肠菌群超标.全部样本未检出沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌等致病菌.从其中3份样本中分别分离到3株细菌,经鉴定为铜绿假单胞菌、阪崎肠杆菌和肺炎克雷伯菌.结论 双流国际机场食用冰块的卫生状况不容乐观,条件致病菌是食源性疾病发生的一大隐患,今后应加强卫生监督管理.
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深圳市婴幼儿配方粉阪崎肠杆菌检测情况分析
目的 了解深圳市婴幼儿配方粉阪崎肠杆菌的污染情况,评估深圳市婴儿感染风险.方法 对抽取的144份婴幼儿配方粉进行阪崎肠杆菌荧光定量PCR检测,同时参照GB/T4789.40-2008<阪崎肠杆菌检验>进行分离培养、鉴定.结果 共5份样品经荧光定量PCR检测出阪崎肠杆菌阳性;1份进口样品分离出菌株.结论 深圳市进口婴幼儿配方粉中存在阪崎肠杆菌污染隐患.需加大抽样检测比例,并加强检验监管力度
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奶粉中阪崎肠杆菌的分离与鉴定
目的 了解某地区婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的污染情况,为我国制定婴儿配方奶粉中阪崎肠杆菌的限量标准及为政府加强对婴儿配方奶粉的管理提供科学依据.方法 常规生理生化鉴定法和实时荧光PCR法.结果 检出2株阪崎肠杆菌.结论 我国市售的婴儿配方奶粉中存在少量的阪崎肠杆菌污染.