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扦插时期对金银花苗生长发育的影响
目的:探索扦插时期对金银花扦插苗生长发育的影响.方法:采用单因素随机设计,结合取样测定方法进行试验研究.结果:扦插时期对金银花苗有显著影响,2个年度试验的重复性较好;3月2日扦插的成苗率、根数、根重、根冠比等反映扦插苗质量的主要指标优于其他时期扦插的.结论:3月上旬是扦插金银花的佳时期.
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RP-HPLC对金银花和连翘单煎、单煎后合并及混煎的分析
目的:利用RP-HPLC对金银花和连翘单煎、单煎后合并及混煎进行分析,寻找异同.方法:采用Alltech-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱进行分离,流动相采用乙腈-水(含0.2%醋酸)系统梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长有280 nm,柱温为室温,进样体积10 μL.结果:绿原酸和连翘酯苷A分别在下列范围内有良好的线性:0.980～9.800 μg(r=0.9999)和0.972～9.720 μg(r=0.999 9).平均回收率(n=6)分别为99.85%(RSD2.0%)和100.87%(RSD 1.6%).归属了银翘药对主要色谱峰的来源,定量了绿原酸和连翘酯苷A的含量,定性地比较了以下色谱峰所代表的成分在4个供试品中含量的多少,色谱峰k,m,n:金银花＞合并＞混煎;色谱峰g,h:连翘＞合并＞混煎;色谱峰d,e,i:混煎＞金银花,混煎＞合并.结论:金银花和连翘单煎、单煎后合并及混煎4个供试品的RP-HPLC图有异同表明银翘药对的物质基础和金银花、连翘单用的物质基础有异同,为进一步研究课题"银翘药对的药效物质基础研究"提供了方向,为临床和制药提供了一些实验依据,同时也为中药复方研究提供了参考,具有一定的理论和实践意义.
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山银花化学成分研究
目的:寻找山银花Lonicera confusa药效物质物基础,为金银花的质量评价提供更全面的证据.方法:应用各种柱色谱方法对其进行化学成分提取、分离,并利用各种色谱和光谱技术鉴定所分离得到的化学成分.结果:从山银花中分离得到7个化合物,经鉴定为:芦丁、槲皮素、木犀草素-7-O-β-D-半乳糖苷、绿原酸、忍冬苷、β-谷甾醇及三十四烷.结论:芦丁为首次从忍冬属中分离得到,其他均系从该植物中首次分离得到.
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细毡毛忍冬花蕾化学成分研究
目的：对细毡毛忍冬花蕾进行化学成分研究。方法：色谱法和光谱技术分离鉴定其化学成分。结果：分离出9个化合物，经鉴定为咖啡酸、3，5-二咖啡酰奎尼酸、绿原酸、棕榈酸、木犀草素、槲皮素、β-谷甾醇、二十九烷醇、二十九烷。结论：均系首次从该植物中分离得到。
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金银花道地与非道地产区地质背景及土壤理化状况分析
目的:研究金银花道地性与其地质背景系统(GBS)、土壤理化状况的关系.方法 :比较5个不同产区同一种质金银花的地质背景系统(GBS),分析土壤理化状况.结果: 道地金银花的分布受GBS制约,主要分布于北纬34°～36°、东经113°～118°的大陆性暖温带季风性半干旱气候区内.结论:道地金银花产区土壤受其成土母质影响;道地金银花适合的土壤类型是中性或稍偏碱性的砂质壤土,且要求土壤的交换性能较高,可作为其道地性的特征之一.
关键词： 金银花 道地性 地质背景系统(GBS) 土壤理化状况 -
微波帮助提取中药金银花中有效成分的研究
目的:用微波提取技术建立快速的中药有效成分提取方法和分析方法.方法:应用MSP-100D专用微波制样系统,通过正交实验设计考察了微波提取的条件,溶剂选择、溶剂体积对样品质量比、高的溶剂压力/温度和微波辐射时间对中药金银花中有效成分绿原酸类化合物提取产率的影响.结果:确定了35%乙醇作溶剂,溶剂倍量30,控制压力0.10 MPa,加热时间1 min, 70%微波功率(微波炉的大功率850 W)为微波佳提取条件.在微波帮助提取和超声波提取方法的佳提取条件下,微波法的提取率和重复性好于超声波.微波法提取不仅所需时间短,而且提取率比超声波法高近2成.结论:微波帮助提取方法可用于中药有效成分的快速分析并对中药工业应用微波提取技术具有指导意义.
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7种中药提取物对PXR介导的CYP3A4转录调节作用
目的:观察7种中药的粗提取物能否通过活化人孕烷X受体(PXR)诱导CYP3A4的转录表达.方法:采用浸提法和回流法制备中药的粗提取物.用PXR依赖的瞬时转染报告基因试验检测7种中药粗提取物的诱导作用.结果:菊花、枸杞子、丹参水提取物,菊花、山楂、金银花、山药、丹参醇提取物等均能通过活化PXR诱导HepG2细胞CYP3A4基因的转录表达.结论:菊花水提取物、枸杞子水提取物、丹参水提取物、菊花醇提取物、山楂醇提取物、枸杞子醇提取物、金银花醇提取物、山药醇提取物和丹参醇提取物等7种中药的提取物均能诱导CYP3A4基因的转录表达,其作用机制是通过活化PXR.菊花、山楂、枸杞子、金银花、山药和丹参的摄入可能影响其他CYP3A4底物在体内的代谢.
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应用蛋白质组学技术筛选金银花抗流感病毒血清标志物
目的:比较不同实验组的小鼠血清蛋白的差异以寻找金银花抗流感病毒候选血清标志物,为阐明金银花抗流感病毒作用的途径及机制提供依据.方法:用双向电泳(2-DE)分离不同实验组的小鼠血清蛋白并比较差异,选取血清中明显差异表达蛋白点,进行质谱鉴定和生物信息学分析.结果:经2-DE找出了不同实验组间较为典型的具明显差异的蛋白质点15个,并通过MALDI-TOF-MS进行了结构鉴定,检索得到其中的12个功能蛋白的成分归属.结论:不同实验组的小鼠血清蛋白之间存在明显差异,通过蛋白质组学方法筛选并鉴定出这些血清标志物,为阐明金银花抗流感病毒作用途径及机制提供依据.
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金银花种质资源化学指纹图谱及代谢物相似性分析
应用LC-MS联用技术对不同产地的41个金银花种质进行检测,建立了金银花种质资源化学指纹图谱并确定23个共有峰,根据对照品和参考文献信息指认了17个共有峰.采用SPSS(version 22.0)软件对获得的41个金银花种质UPLC-MS指纹图谱共有峰峰面积进行系统聚类分析,其变异范围在0.99 ～ 0.12.在此基础上,对金银花不同种质代谢物谱一致性评级,并结合遗传一致性分级进行综合评价,为金银花优良种质选育、药材道地性形成机制和评价研究提供基础.
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金银花气味与化学成分的相关性分析
该文通过测定金银花的气味及其化学成分绿原酸、木犀草苷和多酚类的含量,将气味综合指标值与化学成分指标值相联系,探索气味与化学成分之间的相关性.实验中利用数字化气味指纹分析仪(电子鼻)测量金银花的气味;采用高效液相色谱法测定金银花样品中绿原酸、木犀草苷的含量,用紫外-可见分光光度法测多酚类的含量;后采用SPSS 17.0软件分析金银花气味与化学成分之间的相关性.结果显示金银花气味综合指标值与绿原酸、多酚类含量有显著性相关关系(正相关),并且建立了回归方程;与木犀草苷之间不存在显著相关关系.进而证明金银花的气味与其内在的化学成分密切相关,能为初步判断或预测金银花中化学成分的含量提供一种新思路、新方法.
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硫磺熏蒸金银花中断马钱子酸亚硫酸衍生物产生的机制探讨
为了探讨硫磺熏蒸金银花中断马钱子酸亚硫酸衍生物的生成机制,该研究采用柱色谱技术从未硫熏金银花中目标性制备分离了断马钱子酸以进行后续模拟反应,断马钱子酸在有水条件下与二氧化硫反应生成了其亚硫酸衍生物,反应机制可能涉及了断马钱子酸的酯化反应或者是酸化开环后亚硫酸根对羰基的加成反应.该研究为支持硫磺熏蒸导致金银花中断马钱子酸转变成其亚硫酸衍生物提供了实验依据.
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复方双黄连粉针剂金银花中间体化学成分研究
目的:对复方双黄连粉针剂中配剂金银花中间体的化学成分进行系统分离和鉴定,以寻找引起不良反应的物质基础.方法:采用柱色谱以及制备型HPLC等方法进行分离、纯化,运用1H-和13C-NMR,ESI-MS等谱学方法和技术对化合物结构进行鉴定.结果:从配剂金银花中间体中分离并鉴定了20个化合物,分别为黄酮类化合物:槐属苷(1)、木犀草素-7-O-葡萄糖苷(2)、芦丁(3)、槲皮素(4);绿原酸类化合物:3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸甲酯(5)、4,5-O-双咖啡酰基奎宁酸甲酯(6)、3,4-O-双咖啡酰基奎宁酸甲酯(7)、4,5-O-双咖啡酰基奎宁酸(8)、3,4-O-双咖啡酰基奎宁酸(9)、绿原酸(10);环烯醚萜苷类化合物:表断马钱子苷半缩醛内酯(11)、獐牙菜苷(12)、断马钱子苷半缩醛内酯(13)、断氧化马钱子苷(14);皂苷类化合物:灰毡毛忍冬皂苷甲(15)、灰毡毛忍冬皂苷乙(16)、忍冬苦苷A(17)、忍冬苦苷B(18)、忍冬苦苷C(19)、续断皂苷B(20).结论:化合物1为首次从该属植物中发现,1～20均为首次从配剂金银花中间体中分离得到.
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金银花中抗补体活性酚酸类成分的研究
目的:研究金银花Lonicera japonica中的抗补体活性酚酸类成分.方法:通过溶血试验方法进行抗补体活性成分的导向分离,对所得化合物进行抗补体活性测定,采用现代波谱技术ESI-MS,1 H-NMR,13 C-NMR进行结构鉴定.结果:从金银花乙酸乙酯部位分离得到了14个化合物,其中有8个酚酸类、3个环烯醚萜类和3个黄酮类成分,包括新绿原酸(1)、绿原酸(2)、隐绿原酸(3)、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸(4)、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸(5)、3,4-O-二咖啡酰奎宁酸(6)、咖啡酸(7)、咖啡酸甲酯(8)、裂环马钱苷(9)、獐芽菜苷(10)、断氧化马钱子苷(11)、木犀草素(12)、槲皮素(13)、山柰酚(14).抗补体实验表明化合物1～9,11～14对经典的补体激活具有不同程度的抑制作用,以3,5-O-二咖啡酰奎宁酸活性强.结论:化合物14首次从金银花中分离得到,酚酸类化合物是金银花中的主要抗补体活性成分,3,5-O-二咖啡酰奎宁酸活性强,值得深入研究.
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基于偏小二乘法对金银花抗流感病毒谱-效相关性模型的探讨
以金银花药材为研究对象,收集40批有代表性的金银花药材,分别测定其色谱指纹图谱和抗流感病毒的IC50,再基于The Unscrambler软件,运用偏小二乘法对色谱指纹图谱数据和IC50进行谱-效相关性分析,建立金银花药材抗流感病毒谱-效相关性评价模型,另取10批金银花药材对该模型进行适应性验证,以探讨基于偏小二乘法建立金银花抗流感病毒谱-效相关性模型的适应性.研究结果得到,所建模型的校正集及交叉验证集的相关系数(R2)分别为0.969 489,0.959042,校正集及交叉验证集的均方根误差(RMSEC,RMSECV)分别为0.070 691,0.084 005;10批金银花药材的验证结果表明模型预测值和实测值的相对误差均在10％以内,其中80％相对误差在5％以内.结果表明,运用所建立的谱-效相关性模型可较好地通过金银花的指纹图谱数据评价其抗甲型流感病毒的生物活性.
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有机磷类禁限用农药在金银花中的残留状况及风险评估
研究有机磷类禁限用农药在金银花中的残留状况,为金银花中的风险控制与大残留限量的制定提供参考.建立了23种禁限用有机磷类农药的残留测定方法,对收集的64个样品进行筛查,并基于理论大残留限量进行风险评估.结果表明,样品检出率为58％,共检出禁限用有机磷农药6种,检出率分别为毒死蜱41％、氧乐果23％、三唑磷11％、甲基异柳磷6.3％、甲胺磷1.6％、水胺硫磷1.6％.检出样品的农药残留量中位数分别为毒死蜱0.037 mg· kg-1、氧乐果0.043 mag· kg-1、三唑磷0.030 mg·kg-1、甲基异柳磷0.18 mg·kg-1、甲胺磷0.041 mg·kg-1、水胺硫磷0.036 mg·kg-1.检出样品的残留量,甲胺磷、水胺硫磷均低于理论大残留限量,毒死蜱、甲基异柳磷、三唑磷个别样品高于理论大残留限量,而氧乐果则全部高于理论大残留限量.根据理论大残留限量评估结果,建议相关部门应加快推进大残留限量标准的制定,加强对金银花禁限用有机磷农药使用的监管力度.
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对照提取物用于金银花药材的质量控制方法研究
为解决中药材色谱分析中对照品价格较高的问题,该文以金银花药材为例,提出采用对照提取物作为参考物质,对药材进行常规分析的方法.采用对照品对对照提取物进行了标定,测定出其中6种有机酸类化合物的含量,并考察了对照提取物的长期稳定性.利用对照提取物配制不同浓度的溶液,建立了标准曲线.对11批次金银花药材进行分析,采用t检验方法对分别利用对照品和对照提取物测得的结果进行比较,结果表明二者之间不存在显著性差异.该方法可用于金银花药材的质量控制,并对解决类似问题有借鉴意义.
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金银花的化学成分研究
目的:通过正相硅胶、大孔吸附树脂、MCI树脂、Sephadex LH-20,制备薄层色谱和反相HPLC等多种色谱分离方法相结合,从金银花中分离得到18个化合物；借助波谱学分析方法鉴定它们的结构分别为:adinoside A(1),stryspinoside(2),苄醇β-D-吡喃葡萄糖苷(3),苄基-2-O-β-D-吡喃葡萄糖基-2,6-二羟基苯甲酸酯(4),2,5-二羟基苯甲酸-5-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5),丁香油酚-β-D-吡喃葡萄糖苷(6),丁香油酚-βD-吡喃木糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(7),(-)-南烛木树脂酚9-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8),(+)-南烛木树脂酚9-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(9),芹菜素7-O-α-L-鼠李糖苷(10),木犀草素3’-O-L-鼠李糖苷(11),熊果酸(12),β-谷甾醇3-O-β-D-葡萄糖苷-6'-O-棕榈酸酯(13),脱落酸(14),鸟苷(15),5-甲氧基尿嘧啶(16),反式桂皮酸(17)和对羟基苯甲醛(18).以上化合物均为首次从金银花中分离得到.
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UPLC比较金银花、忍冬藤和忍冬叶中11种活性成分的含量
建立同时检测金银花、忍冬藤和忍冬叶中新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、洋蓟素、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、芦丁、木樨草苷和马钱苷11种活性成分含量测定的UPLC分析方法,并比较金银花、忍冬藤、忍冬叶在酚酸类、黄酮类和环烯醚萜苷类成分含量上的差异.采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mmx 100 mm,1.7 μm),乙腈-0.1％磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min-1;柱温30 cc;样品室温度8℃;检测波长:新绿原酸、绿原酸、咖啡酸、隐绿原酸、洋蓟素、异绿原酸A、异绿原酸B和异绿原酸C为326 nm,芦丁和木樨草苷为352 nm,马钱苷为238 nm;进样量1μL.11种成分分离良好,各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系(r≥0.999 6),平均回收率(n=9)分别为98.96％,100.7％,97.24％,97.06％,99.53％,96.78％,98.12％,95.20％,95.12％,100.2％,98.61％;RSD分别为2.5％,1.4％,1.9％,2.1％,1.7％,1.9％,1.6％,2.0％,1.4％,2.2％,2.0％.基于含量测定结果,采用聚类分析和主成分分析等化学计量学方法对金银花、忍冬藤和忍冬叶药材进行了比较.结果 表明金银花与忍冬叶化学成分较为相似,而与忍冬藤间存在差异,所建立的多组分定量分析方法可为金银花、忍冬藤、忍冬叶的质量控制提供方法参考.
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金黄Ⅰ号对小鼠免疫功能的影响
复方合剂金黄Ⅰ号由黄芪、大枣、金银花等数味中药组成,方中的黄芪具有增强机体免疫、利尿等作用,并能使动物脾内浆细胞增生,促进抗体合成,对体液免疫功能有促进作用[1];大枣多糖对机体非特异性免疫、细胞免疫和体液免疫均有显著增强作用[2].然而复方合剂金黄Ⅰ号是否也对机体免疫功能造成影响尚未证实,本研究探讨金黄Ⅰ号对小鼠免疫功能的影响.
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金银花同源四倍体的诱导和鉴定
金银花是忍冬科忍冬属植物忍冬Lonwera japonica Thunb.的干燥花蕾或带初开的花,具有清热解毒,凉风散热之功效[1],是中医常用药.药用植物多倍体具有药效成分含量高,抗逆性强等特点[2].利用生物技术进行多倍体诱导,诱导效率高,嵌合体少[3].本研究利用生物技术,在离体组织水平上进行出金银花同源四倍体的诱导,以期为选育金银花四倍体新品种提供技术支持.
