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高密度Oligo基因芯片检测榄香烯对胶质瘤U251细胞凋亡相关基因的影响
目的 应用高密度Oligo基因芯片技术检测榄香烯对胶质瘤U251细胞凋亡相关基因的影响.方法 实验分2组,实验组用含有终浓度为0.062mg/ml榄香烯作用于U251细胞24h,对照组为未行任何处理的U251细胞.抽提2组U251细胞的总RNA并逆转录合成Cy5、Cy3标记的cDNA,混合后杂交含22000个人类基因的人类高密度Oligo基因芯片,经过洗片和扫描,获得荧光信号图像并用计算机分析.随机抽取4种差异表达基因用PCR验证.结果 按差异显著性标准,从22000条基因中筛选出差异表达基因179条,其中11个凋亡相关基因表达上调,15个凋亡相关基因表达下调.主要包括细胞周期蛋白、细胞凋亡、细胞骨架和运动蛋白等相关基因.结论 榄香烯能够影响胶质瘤细胞相关凋亡基因的改变,而基因芯片技术有效分析其基因表达谱,有助于认识胶质瘤药物治疗的机制.
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榄香烯协同吉西他滨杀伤胰腺癌细胞的实验研究
目的 研究榄香烯对胰腺癌Bxpc-3细胞株吉西他滨化疗敏感性的影响.方法 MTT法检测不同浓度榄香烯与吉西他滨联用或单处理后胰腺癌细胞Bxpc-3的增殖率;采用等效线图解法观察联合用药是否具有协同效应;Annexin V/PI双染色法分析细胞凋亡的变化.结果 与吉西他滨单独处理48h(IC50=0.31±0.04μg·mL-1)相比,榄香烯与吉西他滨联合处理可显著降低吉西他滨的IC50(IC50=0.063±0.01μg·mL-1),且联合用药具有协同效应.流式细胞技术也证实榄香烯协同吉西他滨对人胰腺癌Bxpc-3细胞的早期凋亡显示出明显的时间和剂量依赖关系.结论 榄香烯与吉西他滨联合用药对人胰腺癌Bxpc-3细胞可产生协同杀伤作用,并可增强吉西他滨诱导肿瘤细胞凋亡的作用.
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榄香烯和姜黄素诱导晶状体上皮细胞凋亡的体外研究
目的 探讨榄香烯(Ele)和姜黄素(Cur)对体外培养的牛晶状体上皮细胞(LEC)凋亡的诱导效应及其机制.方法 将培养的牛LEC分别与160 μg/mL Ele和20 μg/mL Cur在CO2培养箱中共同孵育8,16,24,48,72 h,通过透射电子显微镜观察LEC超微结构;采用流式细胞术(FCM)测定LEC的DNA含量及线粒体跨膜电位(ΔΨm).结果 LEC分别与Ele和Cur共同孵育后,电子显微镜下可观察到细胞核染色质凝集、固缩、边集、核碎裂等,均呈现典型的细胞凋亡的形态学改变.FCM分析可见典型的凋亡亚G1峰,提示细胞核内DNA含量下降,并随药物作用时间的延长而加强.FCM检测发现细胞质出现线粒体ΔΨm下降,且在药物作用早期已发生变化.结论 Ele和Cur能显著诱导LEC凋亡;细胞核内DNA含量下降、细胞质内线粒体ΔΨm降低,分别是Ele和Cur诱导LEC凋亡的细胞核和细胞质途径.线粒体ΔΨm下降是Ele和Cur诱导LEC凋亡的早期事件.
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榄香烯对HLE-B3内蛋白激酶A及其mRNA表达的影响
探讨中药单体榄香烯(Ele)对人晶状体上皮细胞系(HLE-B3)内蛋白激酶A(PKA)及mRNA表达的影响. 方法 利用碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导HLE-B3增殖,将80mg/L的Ele作用在处于增殖状态下的HLE-B3 24 h,流式细胞术检测HLE-B3内PKA的表达,RT-PCR法检测HLE-B3内PKA mRNR表达. 结果 rhbFGF组HLE-B3内PKA表达(33.250±2.242)较空白组(46.847±1.673)明显下降(P＜0.01),Ele组(64.110±2.933)较rhbFGF组明显升高(P＜0.01).rhbFGF组HLE-B3内PKA mRNA表达(0.734±0.041)较空白组(0.927±0.040)明显下降(P＜0.01),Ele组(1.196±0.066)较rhbFGF组明显升高(P＜0.01). 结论 上调HLE-B3内PKA表达、激活细胞内PKA信号转导途径可能是Ele抑制HLE-B3增殖的作用机制.
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浙产异叶回芹花序挥发油化学成分的研究
目的:研究浙产异叶回芹花序挥发油的化学成分.方法:水蒸气蒸馏法提取挥发油,利用 GC-MS-计算机联用仪定性分析 ,按峰面积归一化法 ,求出挥发油中化学成分的百分含量.结果:鉴定出38个化合物.挥发油中主要成分是主要成分为1H-Benzocycloheptene(22.8%)、Sesquiphellandrene(17.77)、beta-Chamigrene(15.94%),油中含有一定量的榄香烯(beta-Elemene)和法尼烯(β-Farnesene).结论:浙产异叶回芹花序可作为提取榄香烯和法尼烯的原料药材开发.
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术后化疗联合榄香烯与单纯手术治疗对食管癌的干预效果及其与患者外周血淋巴细胞cyclinD1、p16的表达水平变化的关联分析
目的 探讨化疗联合榄香烯与单纯手术治疗对食管癌的干预效果及其与患者外周血淋巴细胞cyclinD1、p16表达水平变化的关联.方法 本研究选取食管癌患者59例,包含单纯手术治疗患者30例(对照组)和术后化疗并且联合使用榄香烯进行治疗的观察组患者29例.比较分析化疗联合榄香烯与单纯手术治疗对食管癌的干预效果,并分析其与患者外周血淋巴细胞cyclinD1、p16的表达水平变化的关联.采用SPSS 17.0统计学软件进行分析.结果 随访比较2组患者治疗后2年的疗效情况,观察组无病生存时间为(12.58±7.12)月,中位无病生存时间为13.5个月,均略高于对照组.2组患者治疗前的cyclinD1水平及p16水平均未见差别;治疗后2组的cyclinD1水平分别为(2.43±1.42)、(4.03±1.54),p16水平分别为(6.95±2.75)、(5.02±2.55),组间均存在统计学差异(P＜0.01).结论 手术干预对于集体细胞周期蛋白组的调控会产生一定影响,cyclinD1与p16的双向下调有可能提示术后肿瘤的复发与转移.同时榄香烯干预会影响cyclinD1加速下调,p16下调则会受到相对抑制,可能对于控制术后复发转移有一定的功效.
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肺癌恶性胸腔积液患者胸腔内注射治疗的临床研究
目的 探讨分析胸腔内注射治疗肺癌恶性胸腔积液患者的临床疗效.方法 选择80例肺癌恶性胸腔积液患者,按照随机数字分为实验组和对照组,每组患者40例 所有患者均行胸腔内置管引流.实验组患者给予榄香烯加白细胞介素-2胸腔灌注治疗,对照组患者只给予白细胞介素-2胸腔灌注治疗.观察用药后两组患者治疗后的临床疗效、生活质量及其不良反应的差异.结果 经过治疗,实验组患者完全缓解15例,部分缓解20例,稳定4例,进展1例,总有效率87.5％;对照组患者完全缓解8例,部分缓解11例,稳定14例,进展7例,总有效率47.5％.实验组总有效率显著高于对照组,具有明显差异性(P＜0.05);经过治疗,实验组患者好转32例,稳定6例,恶化2例,好转率80.0％,显著高于对照组(37.5％),具有显著性差异(P＜0.05);经过治疗,实验组5例出现恶心呕吐,胸痛6例,发热4例,尿素升高2例,未见白细胞减少、血小板减少以及总胆红素升高者,与对照组出现的不良反应相比,差异性不明显(P＞0.05).结论 榄香烯加白细胞介素-2胸腔内注射治疗肺癌恶性胸腔积液效果好,生活质量高,不良反应少,是1种安全有效的治疗方法,值得在临床上广泛推广.
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中西医结合治疗脑胶质细胞瘤的疗效观察
目的 探讨中西医结合治疗脑胶质细胞瘤的临床疗效.方法 80例脑胶质细胞瘤患者随机分为两组:治疗组和对照组,每组40例.两组患者均采用榄香烯化疗、体外光子刀照射、脱水及抗癫痫等治疗,治疗组在此基础上加用中药(方剂组成:苦参10 g,钩藤30 g,僵蚕20 g,天麻20 g,当归15 g,夏枯草30 g,川芎20 g,刘寄奴30 g,丹参50 g, 15 g,防风15 g,郁金20 g,天花粉20 g,浙贝15 g,黄芪100 g,枸杞子30 g ,茯芩30 g)治疗.结果 治疗组的有效率明显高于对照组(P＜0.05).结论 中药能很好的提高患者的生活质量,并且能减缓西药化疗的副作用.
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榄香烯在抑制肿瘤血管生成中的作用
榄香烯是一种广谱的非细胞毒性抗肿瘤药物,能通过下调血管内皮生长因子(VEGF)表达、诱导血管内皮细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长等方面来抑制肿瘤血管生成.有望成为理想的抗肿瘤血管生成药物,但其具体机制尚需深入研究.
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榄香烯乳注射液维持治疗对恶性胸腔积液复发时间影响的临床观察
目的 观察榄香烯乳注射液对恶性胸腔积液维持治疗的效果.方法 收集黑龙江中医药大学附属第一医院自2014年5月至2016年4月收治的恶性胸腔积液患者90例,将其按随机数字表法分为观察组和对照组,每组各45例.两组患者通过胸腔穿刺彻底引流胸腔积液,灌注甘露聚糖肽(力尔凡)及卡铂,观察组序贯榄香烯乳注射液维持治疗.对比两组患者的治疗效果.结果 治疗后第12个月,观察组和对照组复发率差异有统计学意义(82.2％∶100％,x2=8.780,P=0.003).观察组和对照组的中位无进展生存期(95％ CI)分别为10.00(9.15～10.85)个月和6.00 (4.74～7.26)个月,差异有统计学意义(x2 =40.475,P＜0.001).观察组在灌注治疗后第1、6、12个月生命质量改善率分别为82.22％、57.78％、54.55％,对照组分别为84.44％、23.26％、0,其中第6和第12个月生命质量改善率两组比较差异具有统计学意义(x2=10.840,P=0.001;x2=32.390,P＜0.001).观察组和对照组1年生存率分别为97.78％、95.56％,差异无统计学意义(P=1.000).结论 榄香烯乳注射液对恶性胸腔积液维持治疗效果明显,能延长患者无进展生存期,并能显著提高生命质量.
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榄香烯对人宫颈癌细胞Hela的体外抑瘤效应
目的研究中药榄香烯对人宫颈癌细胞Hela的体外抑瘤效应及其作用机制.方法应用MTT比色法观察榄香烯对细胞的生长抑制作用;DNA凝胶电泳和流式细胞术等分析细胞凋亡、周期变化及Bcl-2蛋白表达情况.结果榄香烯对Hela细胞有较强的体外增殖抑制作用.榄香烯能诱导Hela细胞凋亡,同时伴随有Bcl-2蛋白表达下调.结论榄香烯对Hela细胞有较强的抗瘤效应,可能与Bcl-2蛋白下调引起的细胞凋亡有关.
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胸腔内注射榄香烯治疗恶性胸腔积液的疗效观察
肺癌侵犯胸膜或其它癌肿转移至胸膜,引起恶性胸腔积液可严重影响患者的生存质量,有效地控制恶性胸腔积液对病人的预后具有重要意义.我院于2000年1月～2001年12月采用抗癌中药榄香烯乳剂胸腔内注射治疗恶性胸腔积液22例,取得了满意的效果,现报告如下.
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榄香烯联合顺铂胸腹腔注射治疗恶性胸腹腔积液疗效观察
目的 观察榄香烯联合顺铂治疗恶性胸腹腔积液的疗效.方法 恶性胸腹腔积液患者100例,按照随机数字表法分为观察组和对照组各50例.根据患者腹水部位进行胸腹腔穿刺,放出适量胸腹腔积液;对照组胸腹腔注射给药给予顺铂100 mg,观察组给予榄香烯乳400 mg、顺铂50 mg,同时注入利多卡因200 mg和氟美松10 mg.根据患者具体情况每周注射1～2次.观察并记录两组治疗后1、2周的免疫功能指标变化情况(包括CD4+、CD8+细胞比例和CD4+/CD8+)、胸腹腔积液治疗效果及不良反应发生率.结果 对照组治疗后CD4+细胞比例有所减少,观察组治疗后CD4+细胞比例高于治疗前及对照组治疗后(P均<0.05).观察组治疗后CD4+/CD8+高于治疗前及对照组治疗后(P均<0.05).观察组治疗总有效率(80％)高于对照组(48％),两者相比,P<0.05.观察组总不良反应发生率(28％,14/50)低于对照组(54％,27/50),且观察组脱发、恶心呕吐、白细胞计数减少发生率低于对照组(P均<0.05).结论 榄香烯联合顺铂治疗恶性胸腹腔积液可增强患者的免疫功能,减少化疗相关不良反应的发生率,疗效优于单用顺铂.
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榄香烯配合全身伽玛刀治疗非小细胞型肺癌
原发性支气管肺癌是常见的恶性肿瘤之一,其中75％～80％为非小细胞型肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC).由于缺乏早期诊断方法,确诊时75％患者属于中晚期,往往丧失手术机会,临床预后较差.立体定向适形放射治疗技术,特别是全身伽玛刀技术,以其独特的剂量分布特点,可有效地提高肿瘤组织的治疗剂量,降低周围正常组织的照射剂量,缩短治疗时间,在治疗实质器官肿瘤方面获得了高疗效、低损伤的效果,当前广泛应用于NSCLC的放疗.榄香烯是近年来我国首先从活血化瘀中药中提取的一种非细胞毒性的抗肿瘤新药,因其显著的抗癌疗效越来越受到普遍关注.本研究采用榄香烯配合全身伽玛刀治疗晚期非小细胞型肺癌,并与单纯全身伽玛刀放射治疗进行对比观察,现将观察结果报告如下.
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聚乳酸复合物缓释棒填充骨肉瘤摘除灶的实验研究
为观察聚乳酸(PLA)作为骨形态发生蛋白(BMP)、榄香烯、氨甲喋呤载体的聚乳酸复合物填充骨肉瘤摘除灶的治疗效果.建立按Enneking分类Ⅰ～Ⅱ期的人成骨肉瘤兔移植模型,术前使用氨甲喋呤配合顺铂化疗1周,按广泛切除原则切除骨肉瘤后,用加温灌注丝裂霉素C生理盐水化疗.将实验组兔的骨肉瘤摘除灶用聚乳酸复合物缓释棒填充后,闭合创口;对照组直接闭合创口,并用氨甲喋呤化疗.两组均于术后10天内用抗生素预防感染.结果显示:①术后化疗至第4周时,实验组白细胞明显高于对照组.②X线和组织学检查:实验组3个月PLT降解完毕,6个月骨缺损修复完成;对照组3个月骨缺损创面骨痂生长,6个月骨缺损凹面由大量纤维结缔组织填充,两组实验组动物术后组织学检查均未发现存活的骨肉瘤细胞.③动物术后生存和死亡情况统计:实验组动物术后有2只死于转移癌,8只无瘤生存至今;对照组动物术后有1只死于转移癌,3只死于局部复发,6只无瘤生存至今.表明①榄香烯配合氨甲喋呤化疗可以保护白细胞,并且不影响骨修复.②榄香烯的活血作用有利于残余骨肉瘤细胞转移,而且局部化疗对癌转移灶无能为力.实验组治疗方法只适合单一未转移的病灶,否则应在术后辅以短期化疗.
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榄香烯单药或联合放化疗在脑恶性肿瘤中的效果分析
目的 探讨榄香烯单药或联合放化疗对脑恶性肿瘤的临床疗效.方法 通过对2011-01-2014-01在我院进行治疗的74例恶性脑肿瘤患者随机分组,其中对照组应用榄香烯治疗,实验组实施榄香烯联合放化疗治疗.比较2组患者治疗效果、1 a生存率和不良反应发生率的差异.结果 实验组治疗效果和1 a生存率同对照组比较明显提高,不良反应发生率显著增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 针对脑恶性肿瘤患者采用榄香烯联合放化疗治疗可明显提高治疗效果和生存率,提高患者生存质量,临床值得推广应用.
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榄香烯抑制角膜新生血管的实验研究
目的探索眼局部应用榄香烯对角膜碱烧伤诱发新生血管的抑制作用,以期为榄香烯抗新生血管发生的临床应用提供依据.方法采用0.5mol·L-1氢氧化钠烧伤兔眼角膜诱发新生血管模型.研究分为2组:组Ⅰ,于碱烧伤后第2天每日结膜下注射榄香烯2.5mg,连续5d,1周后重复给药,连续5d.组Ⅱ,采用5-FU结膜下注射12.5mg,给药方法与纽Ⅰ同.同时,配以非给药造模对照组.应用裂隙灯检查、角膜照相、眼计算机立体分析系统,观察并分析新生血管面积,每周1次,连续7周.比较两种药物对新生血管作用的动态变化.另外,正常兔、大鼠各10只结膜下注射榄香烯和5-FU,观察毒性作用及耐受情况,以期找到安全剂量.结果眼局部注射榄香烯的毒副作用小,重复给药动物反应耐受.有20%～30%出现眼部刺激、红肿、畏光及角膜浸润.组Ⅰ、组Ⅱ和非给药造模对照组在7周时角膜新生血管面积分别为31.88mm22、49.84mm2和65.20mm2,组间比较有显著性统计学差异(P＜0.05).结论本研究结果显示结膜下注射榄香烯和5-FU对角膜碱烧伤诱发的新生血管形成有抑制作用,榄香烯作用优于5-FU.榄香烯对已形成的角膜新生血管也有一定的消退作用.眼局部应用无明显的毒副作用,是安全有效的给药方式.
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榄香烯对人晶状体上皮细胞增生及细胞周期的影响
目的 探讨中药单体榄香烯(Ele)对人晶状体上皮细胞株(HLE-B3)增生及细胞周期的影响.方法 利用重组人碱性成纤维细胞生长因子(rhbFGF)诱导HLE-B3增生,将80 mg/L的Ele作用在处于增生状态下的HLE-B3 24h后,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测Ele对HLE-B3增生的抑制作用;苏木精-伊红染色观察Ele作用后HLE-B3细胞形态的改变;流式细胞术(FCM)检测Ele对HLE-B3细胞周期的影响.结果 MTT检测显示:rhbFGF组HLE-B3吸光度值(0.5990±0.0531)较正常组(0.4091±0.0422)显著升高,Ele组HLE-B3吸光度值(0.4500±0.0614)较rhbFGF组显著降低,抑制率达24.90%(P＜0.01).苏木精-伊红染色后光学显微镜下观察到rhbFGF组较正常组细胞数量增多,细胞形态清晰,胞浆丰富,胞核清晰,交织呈网状结构;Ele组细胞数量明显减少,胞浆减少,轮廓不清,交织的网状结构减少,甚至有的细胞变圆,细胞核凝集,见核固缩现象,胞浆嗜酸性染色.FCM检测细胞周期变化时发现:G_1期的细胞在rhbFGF组(42.062%±1.270%)较正常组(46.422%±3.765%)减少(P＜0.05),Ele组(60.665%±2.069%)较rhbFGF组明显增加(P＜0.01);S期的细胞在rhbFGF组(51.647%±1.123%)较正常组(31.842%±2.798%)明显增加(P＜0.01),Ele组(30.222%±3.429%)较rhbFGF组明显减少(P＜0.01);G_2期的细胞在rhbFGF组(6.288%±0.966%)较正常组(21.735%±3.806%)明显减少(P＜0.01),Ele组(9.112%±1.659%)较rhbFGF组明显增加(P＜0.01).结论 Ele能通过改变HLE-B3细胞形态及细胞周期的进程而有效抑制rhbFGF诱导的HLE-B3增生,有望成为防治后发性白内障的理想药物.
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榄香烯和姜黄素诱导晶状体上皮细胞凋亡的超微结构改变
目的 观察榄香烯(Ele)、姜黄素(Cur)对体外培养的牛晶状体上皮细胞(LECs)凋亡的超微结构的影响.方法 分别用160μg/ml Ele,20 μg/ml Cur与LECs共同孵育24、48、72 h,采用透射电子显微镜观察LECs超微结构的变化.结果 Ele和Cur作用不同时间的LECs均出现核染色质凝集、固缩、边集等典型的凋亡形态学改变,呈时-效依赖关系.超微结构研究显示,Cur诱导凋亡的同时,也诱导发生细胞胀亡.结论 Ele和Cur具有明显诱导LECs凋亡或胀亡的作用.
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气相色谱法测定β-榄香烯在兔眼内的分布
目的测定正常兔眼球后注射榄香烯后药物在眼内的分布.方法采用气相色谱法测定正常兔眼单次及连续1周球后注射榄香烯后房水、玻璃体、视网膜和脉络膜中β-榄香烯的浓度.结果单次球后注射榄香烯后1 h,房水、玻璃体、视网膜和脉络膜中均检测到β-榄香烯.连续1周注射后,仅视网膜和脉络膜中检测到β-榄香烯,浓度与单次注射相比无明显增加.结论正常兔眼球后注射榄香烯可通过血-视网膜屏障进入眼内,连续用药后无明显蓄积作用.
