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肿瘤特异性成像中固相萃取对Gd-DOTA-OCT小分子探针构建的影响
目的 探讨"一步法"构建Gd-DOTA-OCT小分子MR探针,并用固相萃取(Solid Phase Extraction,SPE)对其进行分离.方法 采用商品化DOTA-OCT直接用GdCl3螯合,并用SPE进行分离和提纯,对分子探针进行紫外分光光度检测、质谱检测和MR信号检测.结果 "一步法"可以成功合成Gd-DOTA-OCT,并用SPE进行成功分离,经质谱检测与理论分子量相同,紫外分光光度法检测探针和MR信号检测证明分子探针完整.结论 Gd-DOTA-OCT小分子探针可以用一步法成功构建,并可用SPE方便地进行分离和纯化,为肿瘤特异性成像奠定基础.
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运用内标校准法提高表面增强激光解吸电离飞行时间质谱检测中的重复性
表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)具有高灵敏度、高通量、高效率等优点,是近年来疾病蛋白组学研究的先进技术 [1],但该技术检测结果 的重复性较差.因此,建立SELDI-TOF-MS检测流程的标准化至关重要 [2].我们将色谱分析常用的内标法 [3-4]引入SELDI-TOF-MS技术,采用合成多肽分子作为内标物,建立内标校准法以校准SELDI-TOF-MS质谱图的横坐标和纵坐标,以提高该方法 检测蛋白质分子和丰度的重复性.现报告如下.
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液相色谱-质谱检测中药及相关制品中非法添加化学药物的应用进展
中医药的传承和发展经历了数千年的历史,尽管化学药物的作用效果明显,治疗过程较短,但不良反应也比较突出,而中药及相关制品一直被认为纯天然的,很少甚至没有毒副作用.一些不法商家为了能使其产品达到宣传的疗效,利用患者对中药的信任, 在中药及相关制品中非法添加化学药物,以期达到显效快、疗效好的效果,其危害是不言而喻的.
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下一代测序联合质谱检测诊断普城沙雷菌感染
目的 普城沙雷菌是一种革兰阴性肠杆菌,广泛存在于自然界,主要生长在植物、动物和昆虫中,其感染人体非常少见,并表现出多种抗生素耐药的特点.目前临床工作中尚无普城沙雷菌特异性的检测方法而对该病难以诊断.本文通过下一代测序联合质谱检测诊断普城沙雷感染一例,探讨该方法应用于临床诊断的价值.方法 通过下一代测序联合质谱检测,诊断一例包括血培养在内的多项检查均为阴性,临床表现为发热、肌痛、肌肉肿胀的IgA肾病患者为普城沙雷菌感染.结果 质谱检测结果发现,患者体温升高时大量与炎症、免疫及包括普城沙雷菌在内的多种细菌相关的蛋白质升高,多种与DNA复制、生长因子及细胞凋亡相关的信号通路被激活.下一代测序结果表明,患者体温升高时多种细菌(包括沙雷菌属、耶尔森菌属、埃希菌属、果胶杆菌属、沙门菌属、伯克菌属、克雷白杆菌属、泛生菌属、微杆菌属等)相关的基因片段升高,其中普城沙雷菌相关的基因片段明显高于其他沙雷菌,测得序列条数为72 726条(占63.5%).在多种抗生素治疗无效的基础上,予以复方磺胺甲嗯唑治疗后,患者的体温逐渐降至正常,肌痛、肌肉肿胀以及一般情况逐渐好转,C反应蛋白、白细胞介素6、降钙素原、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶等多项指标逐步恢复正常.结论 下一代测序联合质谱检测可以应用于临床中复杂疾病的诊断,尤其对感染性疾病的诊断具有一定提示意义.
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4528例儿童血串联质谱检测遗传代谢性疾病结果分析
随着医疗技术的发展,越来越多的遗传代谢病被发现、认识,而且逐渐被治疗、控制。我市处于相对较落后的西部地区,串联质谱检查尚未广泛开展,为提高对该类疾病认识,现将2013年我省送检的3905例新生儿筛查标本、临床可疑患儿623例血串联质谱检测结果分析如下。
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枯草芽孢杆菌抗菌肽的分离纯化及质谱检测
目的:研究枯草芽孢杆菌拮抗幽门螺杆菌的能力及分离纯化其抑菌活性物质.方法:以幽门螺杆菌国际标准株NCTC11637为指示菌,采用打孔法检测枯草芽孢杆菌抑制幽门螺旋杆菌能力;挑选拮抗能力强菌株,对其活性物质进行分离纯化;质谱检测活性物质分子量.结果:枯草芽孢杆菌发酵上清液具有显著抑制幽门螺旋杆菌的能力,其中枯草芽孢杆菌KM抑制幽门螺旋杆菌的能力强;活性物质经分离纯化后,质谱检测分子量为3402.524D,推测为Subtilosin A结构类似物;10株枯草芽孢杆菌Subtilosin A的前体基因的表达水平与抗幽门螺旋杆菌的能力呈正相关.结论:枯草芽孢杆菌具有不同程度体外拮抗幽门螺旋杆菌能力,其抑菌机制与分泌抗菌肽Subtilosin A结构类似物相关,该类物质可作为治疗幽门螺杆菌感染的候选药物.