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  • 人精子细胞染色体畸变率与2细胞胚微核的比较

    作者:马明福;蔡敏;李练兵;曾维三

    采用人精子与去透明带地鼠卵受精方法,分析诱变剂对人精子染色体与2细胞胚微核的比较,以探讨染色体畸变率与微核率间关系.结果:平阳霉素(-S9mix)10、20、40、60 μg/ml 4个剂量组染色体畸变率分别为11.5%、25.4%、33.6%、43.7%;2细胞胚微核率分别为42.6%、49.1%、59.6%、67.9%.环磷酰胺(+S9mix)10、20、40、60 μg/ml 4个剂量组染色体畸变率分别为11.7%、18.5%、31.7%、42.1%.;2细胞胚微核率分别为43.40%、54.0%、65.8%、69.3%.与空白对照组比较,有显著差异(P<0.01).表明人精子染色体畸变率与2细胞胚微核率之间存在相关性,均可检测诱变物对精子的损伤.

  • 精子DNA碎片对辅助生殖技术治疗方式的影响

    作者:费前进;金建远;倪吴花;黄学锋

    目的 探讨精子DNA碎片(SDF)对常规体外受精(IVF)和卵胞浆内单精子注射(ICSI)治疗方式的影响.方法 选择235对夫妇的154个IVF和88个ICSI治疗周期,男方在女性配偶获卵日获取精液标本行精液常规分析和SDF检测,统计IVF和ICSI的胚胎结局:受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率和临床妊娠率.结果 IVF和ICSI周期的精子DNA碎片指数(DFI)分别为(17.4±10.4)%和(25.3±15.8)%,差异有统计学意义(P<0.01).精子DFI≥24%时,ICSI周期的受精率、胚胎种植率和临床妊娠率显著高于IVF周期,差异有统计学意义(P均<0.05).单因素分析时,精子DFI≥24%时的ICSI周期和IVF周期获得临床妊娠的优势比(OR)为3.85,95%可信区间(95%CI)为1.40~10.59.纳入精液量、精子浓度、精子活动力(a+b)和女性配偶的年龄作为变量进行多因素分析时,DFI≥24%时的ICSI周期和IVF周期获得临床妊娠的OR为4.61(95% CI 1.09~19.57).结论 高SDF水平可影响辅助生殖技术(ART)的治疗方式,SDF水平较高时行IVF治疗的结局较差,此时应选择ICSI的治疗方法.

  • 精子空泡对ICSI患者胚胎发育及临床结局的影响

    作者:孟祥黔;曾泳梅;刘思瑶;黄军;周建明;钟影

    目的 利用精子放大系统观察精子空泡位置和大小,探讨不同类型精子行卵胞浆内单精子注射(ICSI)后对患者胚胎发育及临床结局的影响. 方法 选取57例行ICSI患者,于注射前利用精子放大系统对已在低倍镜下选定的精子进行放大观察,并拍照测量空泡直径,后注射入卵,注射后单独培养并观察受精结局. 结果 空泡组和无空泡组比较,除胚胎冷冻率(10.6% vs.25.0%)和临床妊娠率(22.7% vs.77.3%)有显著性差异(P<0.05)外,两组的2PN率分别为71.4%、74.1%,D3优胚率为28.3%、33.2%,可用囊胚率为11.1%、23.8%,胚胎利用率为44.6%、47.3%,胚胎着床率为22.2%、40.3%,两组间比较均无显著性差异(P>0.05);同时比较空泡组中空泡位置(顶体或顶体+核)对临床结局的影响,结果显示正常受精率分别为75.7%、44.4%,D3优胚率为34.7%、0%,可用囊胚率为7.1%、12.5%,胚胎冷冻率为13.3%、12.5%,胚胎利用率为49.0%、25.0%,空泡组空泡位置间受精结局亦均无显著性差异(P>0.05);观察精子空泡大小(直径:<1 μm、1~1.5 μm、>1.5~2 μm)对ICSI结局影响,结果显示3组正常受精率分别为71.0%、68.0%、76.9%,D3优胚率为25.0%、30.0%、54.5%,可用囊胚率为7.7%、7.1%、20.0%,胚胎冷冻率为14.3%、35.7%、20.0%,胚胎利用率为29.4%、40.0%、63.6%,3组间比较均无显著性差异(P>0.05). 结论 精子空泡有无对胚胎发育和胚胎着床并无显著影响,但因本研究样本量较少、精子空泡直径较小,故后期需扩大样本量来进一步验证.本结果仅为精子空泡的相关研究提供一定参考.

  • Meta分析精子DNA完整性对辅助生殖结局的预测价值

    作者:谭艳;范立青

    目的 系统评价精子DNA完整性对于官腔内人工授精(IUI)、体外受精-胚胎移植(IVF-ET)以及卵胞浆内单精子注射(ICSI)等不同助孕方式妊娠结局的预测价值. 方法 采用电子检索和手工检索相结合的方式进行文献初检,检索Medline(via.OvidSP)、PubMed、Embase、CNKI、VIP等数据库,检索时限为建库至2016年3月,并手工检索相关会议资料.由2名评价者依据纳入与排除标准独立筛选研究文献、提取数据资料和评价方法学质量,然后采用RevMan 5.3软件进行Meta分析. 结果 终纳入27篇队列研究,合计7 302个周期.Meta分析结果显示:DNA碎片指数(DFI)的增加会降低IUI临床妊娠率(RR=0.22,95%CI:0.12-0.41)、IVF受精率(RR=0.90,95% CI:0.86-0.95)、IVF优质胚胎率(RR=0.86,95%CI:0.82-0.91)、IVF临床妊娠率(RR=0.86,95%CI:0.76-0.98),并增加IVF流产率(RR=1.65,95%CI:1.05-2.57)和ICSI流产率(RR=1.57,95%CI:1.03-2.39)(P均<0.05);且DFI的检测方法中只有TUNEL法能预测IVF的临床妊娠率(RR=0.74,95%CI:0.55-0.99,P<0.05),DFI对ICSI受精率、优质胚胎率、临床妊娠率的影响无统计学意义(P>0.05).结论 DFI水平高低对辅助生殖治疗的结局有一定的预测价值,DFI较高时选择ICSI的治疗方式可能更优于常规的IVF.但因纳入研究数量和质量的限制,上述结论还需开展更大规模流行病学研究和临床研究进一步验证.

  • 巨噬细胞移动抑制因子在男性生殖方面的研究进展

    作者:卫冰冰;苏建堂

    巨噬细胞移动抑制因子(MIF)是一种具有广泛组织分布和多种生物学功能的小分子蛋白质.研究表明,MIF在男性生殖系统中以特异的生物学功能影响精子的发生和成熟.了解男性生殖系统中MIF对精子发生、成熟的影响及相关分子生物学机制,有助于临床男性不育分子水平的诊疗.本文就近年来MIF在男性生殖系统中的合成及影响精子发生的特异性生物学功能以及相关机制的进展做一综述.

  • 尿激酶在雄性生殖中的作用

    作者:明钰;熊承良

    尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)存在于许多动物的生殖系统, 在雄性生殖系统精子和精浆中都可以检测到.关于uPA的作用机制尚未完全阐明,目前多数学者认为uPA是通过与uPA受体结合而发挥作用.在雄性生殖系统,uPA的生理作用是多方面的, 它参与精子发生、成熟、运动、获能、顶体反应、受精以及精液液化等生殖生理过程.现就uPA在此方面的研究进展作一综述.

  • 精子DNA损伤与辅助生殖技术

    作者:谭广兴;何映

    精子DNA损伤与辅助生殖技术(ART)结局密切相关,精子DNA损伤影响到ART中的受精比率、胚细胞发育、妊娠率和子代的健康.同时,精子低温冷冻保存和诸多体外处理技术均能影响精子DNA的完整性.检测精子DNA断裂指标(DFI),采取适当措施获得DNA无损伤或损伤较小的精子,对改善ART结局十分必要.现就精子DNA损伤与ART相关性的研究做一综述.

  • 卵透明带避孕疫苗研究进展

    作者:周飞;彭景木便

    哺乳动物卵透明带(zona pellucida, ZP)是由卵母细胞及颗粒细胞分泌并覆盖于卵母细胞及着床前受精卵外的一层基质,人和许多动物包括猪、鼠、兔等在内的ZP都是由3~5种糖蛋白组成,称为ZP1、ZP2、ZP3等。ZP蛋白在精卵结合及精子穿透卵透明带中起着非常重要的作用,影响受精过程的成败。ZP蛋白具有很强的抗原性,主动免疫动物可诱发产生抗体,其相应抗ZP抗体与ZP结合能干扰卵子和卵泡细胞间信息交流,使卵子失去与同种精子结合的能力。ZP是一个不影响激素水平的特异性的抗生育阻断位点,国内外已对ZP避孕疫苗进行多层次的研究。随着研究的不断深入,无疑将为人类生殖避孕、鼠类等有害动物不孕控制提供新思路和新途径。本文就ZP疫苗近年来的研究进展进行综述。

  • 精子DNA完整性研究及其临床意义

    作者:孙静波;姜宏

    精子DNA完整性检测反应了精子DNA的损伤程度,其发生机制可能与精子细胞发生过程中的凋亡发生异常、染色质组装异常或氧化应激反应有关.目前常用的精子DNA完整性检测方法有单细胞凝胶电泳法、原位标记法、精子染色质结构分析法、吖啶橙试验、精子染色质扩散试验和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)测定法等.精子DNA完整性检测对揭示男性不育的病因、预测辅助生殖结局以及指导临床治疗具有重要意义.

  • 人类受精相关精子功能蛋白质研究进展

    作者:张蔚;李建远;谷翊群

    受精是指精子与卵母细胞发生一系列的相互协同作用,终结合成合子的过程.精子功能正常与否会直接影响受精过程并终影响生育结局.精子是通过众多精子功能相关蛋白质分子发挥作用的,了解精子功能相关蛋白质分子将有助于探索男性不育的分子机制,更准确的评价与判断男性生育力,从而对男性不育进行精准治疗.本文就近年来人类受精相关精子功能蛋白质分子的研究进展予以综述.

    关键词: 受精 精子 蛋白质 不育
  • 乙型肝炎病毒感染对辅助生殖技术的影响与探究

    作者:柳榴;文妍琪;赵萌;杨菁

    我国是乙型肝炎病毒(HBV)感染的高发区,随着辅助生殖技术(ART)的发展,越来越多携带有HBV的不孕夫妇选择ART进行助孕治疗.HBV的携带可能对男性精子功能、女性卵母细胞功能造成损伤,从而影响妊娠结局.同时,在胚胎实验室中也会由于HBV的存在造成样本样本,样本-人之间的交叉感染.因此,在ART助孕过程中探究HBV可能造成的影响,对于加强实验室的管理,有效预防该疾病,从而获得良好ART结局,有着非常重要的意义.

  • 精核蛋白与男性不育研究进展

    作者:王旭初;李海松;潘天明

    精核蛋白与男性不育关系的研究是当今生殖医学的热点之一,精核蛋白是精子生成过程中重要的核蛋白,研究证实精核蛋白与生育力关系密切.精核蛋白含量异常的精子与畸形率、活动力、密度以及不明原因的流产等相关.精核蛋白可作为临床评价精子生育力的重要指标.

  • 细胞因子对精子发生及其功能的影响

    作者:王仕琪;熊承良

    细胞因子是细胞与细胞间相互沟通的信号分子,细胞因子之间彼此诱生,相互协同或拮抗作用介导并维持细胞间的协调关系.男性精浆中白细胞介素(IL)-2、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-a等细胞因子对男性生殖有一定的影响.

  • 可溶性腺苷酸环化酶介导精子获能及其信号转导通路

    作者:徐璐;王根林

    研究证明,精子中存在一种可溶性腺苷酸环化酶(sAC),在获能中起重要作用.精子获能过程中存在着Ca2+、cAMP及sAC的调节系统.本文综述sAC的来源、结构及其作用机制,旨在探讨sAC在精子获能过程中的作用及其信号转导通路.

  • 精子染色体异常与男性不育及辅助生殖技术妊娠结局的关系

    作者:林蕾;孙丽;刘萍;全松

    精子染色体异常包括精子染色体数目异常、结构异常和DNA损伤.精子染色体异常与体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局密切相关,精子染色体异常影响辅助生殖技术(ART)的受精率、胚胎质量、妊娠率及子代的健康.精子染色体检查是评价精子质量的重要指标.本文就精子染色体非整倍体、Y染色体微缺失和精子DNA损伤与男性不育及ART相关性的研究做一综述,为临床男性因素性不育患者的诊断及遗传咨询提供理论依据.

  • 冷冻复苏对精子结构及表观遗传学影响

    作者:杨向祎;卢文红;谷翊群

    精子的冷冻保存已广泛用于男性生育力保存和辅助生殖技术.然而,精子冷冻、保存与复苏过程可能造成结构和功能的损伤,包括精子活力、存活率、形态学及受精能力等方面的损伤;存在较大争议的是,精子冷冻复苏是否引起DNA完整性改变及表观遗传损伤.至今,有很多文章报道辅助生殖技术可能导致早期胚胎发育异常,甚至子代表观遗传缺陷,但是有关冷冻是否导致表观遗传缺陷的文章很少.本文系统介绍冷冻复苏对精子细胞膜、线粒体膜、DNA完整性的影响,重点介绍其对表观遗传学中DNA甲基化、组蛋白乙酰化和非编码RNA调控的影响,简要介绍了引起争论的原因和修复机制,并探索佳冷冻方法及建立实验室规范与标准.

  • 尿激酶受体在尿激酶诱导小鼠精子趋化运动中的作用

    作者:丁晓芳;熊承良

    目的研究尿激酶受体(uPAR)在尿激酶(uPA)诱导精子趋化运动中的作用. 方法采用精子聚集毛细管内法检测精子趋化性.实验分为对照组和处理组,处理组又根据uPAR抗体浓度的不同分为10、50、100 μg/ml 3组.各组毛细管内的液体都是浓度相同的uPA;对照组精子培养皿内的液体为精子悬液与Ham's F-10的混合液,处理组精子培养皿内液体是在对照组的基础上加有不同浓度的抗-uPAR抗体.分别在实验的第 20、30 min检测每组毛细管内聚集的精子数量. 结果随着uPAR抗体浓度的增加,uPA趋化精子的数目逐渐减少,与对照组之间差异有显著性(P<0.05). 抗-uPAR抗体与精子作用20 min时对精子趋化运动的抑制明显,其中50、100 μg/ml组与对照组比较,P<0.01. 结论阻断精子uPAR可以抑制由uPA诱导的精子趋化运动,推测uPAR可能在精卵识别中起一定的作用.

  • 冻存后大鼠精子活力变化与其结构的关系

    作者:陈荪红;秦石晓;李建国;王如瑶;陆欣;吴明章

    目的观察冷冻对大鼠精子活动能力的影响,并探讨其活动能力的变化与细胞膜完整性、DNA结构、线粒体鞘和顶体的关系. 方法使用计算机辅助精子活动分析仪(CASA)检测冻存前后大鼠精子活动力的变化;荧光素乙酰乙酸盐(FDA)染色法检测大鼠精子细胞膜的完整性;双氢鲁丹明荧光反应观察精子线粒体鞘的变化;金霉素(CTC)荧光检测法观察冻存对大鼠精子顶体的影响. 结果复苏后精子的活动力下降,为冻存前的39.7%;FDA检测显示冻存后的大鼠精子细胞膜完整,未受到破坏;冻存后的大鼠精子线粒体鞘荧光强度下降,且荧光不连续、甚至消失;CTC荧光反应显示冻存后精子顶体反应(AR)的类型发生改变,AR型精子比例明显下降,由冻存前的68.6%降至冻存后的13.4%. 结论冻存后大鼠精子细胞膜的完整性未受到破坏;精子的线粒体鞘和顶体受到较明显的破坏.大鼠精子冻存复苏后活力下降与线粒体鞘和AR存在相关性.

  • LonP1表达与线粒体稳态以及精子活力的关联性研究

    作者:张家燕;王晓娜;李金晶;黄小圆;朱春芳;费前进;葛红山

    目的 探究线粒体lon蛋白水解酶(LonP1)对精子线粒体稳态的维持调节作用及其可能存在的调节机制.方法 收集2016年6月至2017年6月于温州医科大学附属第一医院生殖中心进行精液常规检查的120名男性精液标本,根据精子活力分为正常活力精子(NS)和弱精子症精子(AS)两组,采用计算机辅助精液分析系统(CASA)检测各组精子运动参数,通过免疫荧光法和免疫蛋白印迹法检测精子中LonP1的蛋白表达水平,流式细胞术检测各组精子的线粒体膜电位强度(MMP,以绿色荧光强度/红色荧光强度比值表示,比值越小代表膜电位越高)和线粒体内活性氧(mROS)水平,比较两组各指标参数差异,并分析LonP1表达水平和精子活力及精子线粒体功能相关指标(MMP,mROS)的关联性.另外,NS组精液经密度梯度离心法处理后,沉淀精子加入培养液重悬,以LonP1功能抑制剂CDDO-ME 2.5μmoL/L和5μmol/L为终浓度进行体外培养,同时设置空白对照组(0μmol/L),比较各组精子运动参数、LonP1表达水平以及精子线粒体功能相关指标.结果 ①人类成熟精子中存在LonP1的表达,且稳定表达于精子中段的线粒体鞘部;②NS组和AS组精子LonP1表达水平(0.52 vs.0.22)与精子活力(69.89% vs.26.10%)、MMP(4.72% vs.12.73%)呈正相关(P<0.05),与mROS含量呈负相关(418.85 vs.460.52)(P<0.05);③经LonP1功能抑制剂CDDO-ME处理后,与空白对照组比较,CDDO-ME药物处理组的LonP1蛋白表达水平随CDDO-ME作用浓度增加而显著降低(P<0.05),5μmol/L浓度组的MMP水平显著下降(78.81% vs.7.34%)、mROS含量增加(640.68 vs.462.26),差异均有统计学意义(P<0.05);④CDDO-ME处理后,除精子活率(PR+NP)外,精子运动参数平均路径(VAP)和曲线速率(VSL)均随CDDO-ME作用浓度增加而下降(P<0.05),与空白对照组相比,5μmol/L浓度组的精子活力(PR) (52.08% vs.65.15%)、曲线速率(VCL)(48.28μm/s vs.78.78μm/s)、侧摆幅度(ALH)(1.28μm vs.1.93μm)、直线性(LIN) (38.83% vs.56.05%)和前向性(STR)(45.53% vs.81.25%)均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 精子线粒体鞘部存在LonP1的稳定表达,LonP1能够通过精子线粒体稳态维持改善精子活力.

  • Mahoganoid基因在小鼠精子发生中的动态表达及对雄鼠生殖力影响

    作者:李洁;熊承良;沈士亮

    目的 探讨Mahoganoid(Md)基因在小鼠精子第一发生波中的动态表达以及其基因缺失对雄性小鼠生殖力的影响. 方法 采用荧光实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)相对定量法检测Mahoganoid mRNA 在7、14、21、28、35、60 d龄C3H /HeJ雄鼠睾丸中的表达;对Md基因缺失纯合子(Mdnc)及 C3H /HeJ雄鼠精子密度,精子活力,异常精子形态百分率分析,并通过交配实验观察其使正常雌鼠受孕分娩情况. 结果 Mahoganoid mRNA在7d龄C3H /HeJ雄鼠睾丸有低表达,14 d表达开始上调,21 d上升趋势明显,35 d时表达水平为60 d 91%;Mdnc可以与雌鼠交配,但无幼鼠出生;Mdnc雄鼠精子快速前向运动百分比明显低于C3H /HeJ雄鼠精子(P< 0.01). 结论 Mahoganoid基因与精子发生相关,Mahoganoid基因缺失会导致雄性小鼠精子活力下降,影响其生殖能力.

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