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盐酸青藤碱对抗精子抗体免疫不育大鼠精子质量的影响
目的:考察盐酸青藤碱对抗精子抗体(AsAb)免疫不育大鼠精子质量的影响,为治疗男性AsAb免疫性不育提供新思路.方法:以同种SD大鼠精子制备抗原,采用人工主动免疫方法建立AsAb免疫不育动物模型,观察给药后各组大鼠精子密度、活动率、存活率、活力、精子顶体酶活性及大鼠血清AsAb浓度,并进行组间比较.结果:与模型对照组相比,各给药组大鼠血清AsAb的浓度显著降低(P＜0.05,P＜0.01),大鼠精子密度显著升高(P＜0.01),精子活动率、存活率明显增大(P＜0.05,P＜0.01)结论:盐酸青藤碱具有改善AsAb免疫不育大鼠精子质量的作用.
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高功率微波辐射对雄性大鼠生殖系统的影响及补肾生精中药复方的干预作用研究
目的:观察高功率微波辐射对雄性大鼠生殖系统的影响及补肾生精中药复方的干预作用.方法:成年雄性Wistar大鼠随机分为空白组、辐射组、中药组.辐射组用微波辐照大鼠15min,连续7d,中药组大鼠在辐射期间每天灌服中药.辐射后第1、2、7、14天取材检测精子常规、大鼠睾丸切片,HE染色观察.结果:①第2、14天中药组精子总数高于辐射组(P＜0.05),第14天中药组明显高于空白组(P＜0.05);②第2、14天中药组精子总密度显著高于辐射组(P＜0.05),第14天时中药组显著高于空白组(P＜0.05);③第1、2、14天中药组a+b级精子率显著高于辐射组(P＜0.05).④与空白组比较,辐射组大鼠睾丸形态学表现为生精功能障碍,中药组大鼠睾丸形态明显好转.结论:补肾生精中药复方对微波辐射后大鼠生殖器官损害有一定的改善作用.
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针灸治疗精索静脉曲张致男性不育症32例
精索静脉曲张(VC)是引起男性不育症的常见病因,有资料[1]显示约占不育症20%～42%.西医对VC不育症的治疗以精索静脉高位结扎术和精索静脉转流术等手术治疗为主,但疗效不甚理想,怀孕率约为20%～55%.近10年来,中医也对VC不育症临床进行大量的研究治疗,其疗效亦不尽如人意.笔者从临床上治愈单纯性精子质量下降引起的不育症得到启发,近年来用针灸方法治疗VC不育症,现报告如下.
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免不1号对雌性小鼠免疫性不孕症的实验研究
目的:为了研究中药免不1号治疗免疫性不孕症作用机理.方法:用精子抗原免疫昆明种雌小鼠,建立免疫不孕症动物模型,饲喂中药复方免不1号,观察抗精子抗体指标、组织学指标、免疫细胞化学指标和妊娠指标.结果:免不1号能降低卵巢免疫复合物沉积;免不1号能明显降低小白鼠血清抗精子抗体,且停药后抗体反跳幅度小;免不1号明显提高动物的妊娠,每胎仔数明显高于模型组(P<0.05)及西药组(P<0.05或P<0.01).结论:免不1号可能通过清除卵巢免疫复合物沉积,降低免疫复合物对组织的损伤,并降低血清,宫颈黏液AsAb,有利于提高小鼠的妊娠.
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免不1号对雄鼠免疫性不育症的作用
目的:研究中药免不1号对抗精子抗体引起的免疫性不育症作用方式.方法:用精子抗原免疫昆明种雄性小鼠,建立免疫性不育动物模型,同时分别饲喂免不1号和强的松并观察血清精囊液抗精子抗体,精囊液果糖、睾丸附睾病理学、免疫组织化学和妊娠等指标.结果:免不1号能明显降低血清抗精子抗体(AsAb)(与模型组比较P＜0.05),且停药后血清、精囊液AsAb反跳幅度小(与西药对照组比较P＜0.01).免不1号能较明显地清除睾丸、附睾免疫复合物的沉积(与模型组、西药组比较),免不1号每曲细精管精子细胞数(±s)(128.1±23.7)显著高于西药组(99.6±18.8)模型组(110.25±21.56)(P＜0.01,P＜0.05),明显提高动物的妊娠,每胎仔数(12.2±2.6)明显高于模型组(9.2±3.3)及西药组(7.8±5.2)(P＜0.05).结论:免不1号通过调节全身免疫系统,吸收、清除循环和局部AsAb、免疫复合物,提高精子细胞数,从而提高小鼠的妊娠.
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探讨中药对生精干细胞的可能作用--附2例睾丸癌病例治疗
通过2例精原细胞瘤病例经过大剂量放疗后致无精子不育后,经中药治疗由无精、偶见精子到具有接近正常的精液质量表现,其中1例致女方怀孕生出健康女婴、随访18个月表明婴儿发育正常的过程,提出中药在明确的生精作用中可能具有尚未引起重视的对生精干细胞的直接作用.首次提出中药对生精干细胞可能具有诱导或促分化的作用有重要意义,应引起重视.
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金匮肾气丸对肾阳虚大鼠睾丸转化生长因子-β1和细胞色素P-19表达的影响
目的：观察金匮肾气丸对肾阳虚及转化生长因子-β1(TGF-β1)受体阻滞后大鼠转化 TGF-β1、细胞色素P-19(CYP19)、性激素水平和精子质量的影响，并探讨其治疗男性不育的作用机制。方法将40只成年雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、阻滞剂组、金匮组，每组10只。除正常组外，腺嘌呤混悬液灌胃制备肾阳虚不育模型。正常组给予生理盐水灌胃，阻滞剂组注入大鼠睾丸间质TGF-β1受体阻滞剂，金匮组给予金匮肾气丸水煎剂灌胃。经尾静脉采血并摘取睾丸，采用免疫组化法、放射免疫法和电镜观察，检测睾丸 TGF-β1和CYP19的表达、性激素水平、精子密度和活率及睾丸形态学改变。结果与正常组比较，模型组TGF-β1表达水平升高、CYP19表达水平降低(P＜0.05)；与模型组比较，金匮组和阻滞剂组TGF-β1表达水平降低、CYP19表达水平升高(P＜0.05)。与正常组比较，模型组大鼠精子数量较少且形态异常(P＜0.05)；与模型组比较，金匮组和阻滞剂组睾酮(T)、雌二醇(E2)、精子密度和活率升高(P＜0.05)；金匮组和阻滞剂组各项指标比较差异无统计学意义(P＞0.05)。结论金匮肾气丸可改善肾阳虚模型大鼠精子质量和性激素水平，其机制可能是通过抑制睾丸TGF-β1受体表达、促进CYP19表达进而影响精子发育与增殖。
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精子免疫性不孕症辨治探讨
免疫性不孕症是妇产科的疑难病症,以免疫异常导致不孕为特征.免疫异常包括精子免疫和透明带免疫等,本文仅讨论精子免疫性不孕症辨治.中医虽无此病名,但在古医籍中有"不子"、"无子"、"绝产"、"断绪"等名.笔者通过临床实践认为该病以肾虚为本,瘀血、热毒为标,治疗以益肾、活血、清热解毒为大法.
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菟丝子水提物对人精子顶体和超微结构的保护作用
目的:观察菟丝子水提物对活性氧(ROS)所致人精子顶体和超微结构的氧化损伤的保护作用,探讨菟丝子治疗男性不育弱精子症的作用机制.方法:采用Percoll梯度离心法优选具有正常生理功能的精子作为正常精子模型,将精子悬液分为正常组,模型组,阳性药对照组(维生素C组)和菟丝子小、中、大剂量组.应用次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶(HX-XO)体系产生活性氧,在有氧环境下,ROS、不同含量(0.125,0.25,0.5 g·mL-1)的菟丝子水提物与精子悬液共同孵育后,计算精子顶体完整率,透射电镜观察精子顶体和超微结构,并与已知的抗氧化剂维生素C对照.结果:终含量0.125,0.5 g·mL-1的菟丝子水提物对精子顶体和超微结构的保护作用与维生素C(0.25mg·mL-1)无明显差别(P均＞0.05),0.25g·mL-1的菟丝子水提物的作用明显优于维生素C(P＜0.001).结论:适宜含量的菟丝子水提物对ROS造成的精子膜、顶体结构和精子线粒体功能损伤具有明显的保护作用.
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巴戟天水提物对人精子膜功能氧化损伤的保护作用
目的:观察巴戟天水提物对人精子膜结构和功能氧化损伤的干预作用,探讨巴戟天治疗弱精子症男性不育的作用机制.方法:采用Percoll梯度离心法优选具有正常功能的精子悬液分为正常组,模型组,阳性药对照组(维生素C组)和巴戟天水提物小、中、大剂量组,应用次黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶(HX-XO)体系产生活性氧(ROS),在有氧环境下,ROS、不同剂量(0.125,0.25,0.5 g·mL-1)的巴戟天水提物与精子悬液共同孵育后,检测精子膜脂质过氧化损伤程度,通过精子低渗膨胀试验评估精子膜功能,并与已知的抗氧化剂维生素C对照.结果:巴戟天水提物小、中、大剂量组(0.125,0.25,0.5 g·mL-1)在相同的条件下均可提高精子悬液SOD活力,降低MDA含量,对ROS所致精子膜的氧化损伤均具有不同程度的干预作用,对精子膜功能具有一定的保护作用.其中0.125 g·mL-1的巴戟天水提物组与维生素C组(0.25 mg·mL-1)无明显差别,0.25,0.5 g·mL-1的巴戟天水提物组明显优于维生素C组(P＜0.01,P＜0.001).且巴戟天水提物的作用呈剂量依赖性,大剂量(0.5 g·mL-1)时对精子膜功能的保护作用显著.结论:巴戟天水提物对人精子膜的脂质过氧化损伤具有明显的干预作用,对精子膜结构和功能具有明显的保护作用.
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清热毓麟汤治疗男性附性腺炎不育的临床观察
目的 用随机对照试验的方法研究中药复方清热毓麟汤对男性附性腺炎不育的作用.方法 60例附性腺炎不育患者随机分为治疗组与对照组(各30例),治疗组采用复方清热毓麟汤随症加减治疗,对照组采用抗生素联合维生素E治疗,疗程3个月,随访6个月,观察6个月妊娠率、精液常规、前列腺按出液常规等指标.结果 治疗组治愈8例(26.7%),显效13例(43.3%),有效5例(16.7%),总有效率86.7%.对照组治愈2例(6.7%),显效9例(30.0%),有效12例(40.0%),总有效率76.7%.治疗组治愈率与总有效率均明显高于对照组.合并附性腺炎的不育患者精液质量明显下降,其精子密度、活率及活动力均降低,在治疗后,两组均有改善.但治疗组各项指标改善程度明显均优于西药组.结论 合并附性腺炎的不育患者主要表现为少精、弱精,但并非所有附性腺炎均可能引起精液质量下降.清热毓麟汤能全面改善附性腺炎不育患者精液质量,对精子活力的改善尤其明显,可以显著提高患者配偶妊娠率.
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知柏地黄汤对解脲脲原体感染模型大鼠精子线粒体能量代谢的影响
目的 探讨知柏地黄汤治疗解脲脲原体感染所致男性不育症的可能机制.方法 采用经大鼠膀胱注射解脲脲原体标准株菌液2ml/只建立解脲脲原体感染大鼠模型,将造模成功的64只大鼠随机分为中药组、西药组、中西组、模型组,每组16只,另设假手术组15只.造模成功后第2天假手术组、模型组用0.9％氯化钠注射液2 ml/d灌胃,中药组给予知柏地黄汤1.88g生药/d,西药组给予强力霉素4 mg/d,中西组给予等量的知柏地黄汤与强力霉素,各组均连续灌胃21天.检测大鼠精子线粒体膜通道孔(mPTP)开放程度及精子线粒体二磷酸腺苷(ADP)、三磷酸腺苷(ATP)、一磷酸腺苷(AMP)含量,计算能荷(EC)值.结果 与假手术组比较,模型组大鼠精子mPTP开放吸光度值下降,精子ATP、ADP及EC降低,AMP值上升(P＜0.01).与模型组比较,各治疗组大鼠精子mPTP开放吸光度值均有上升,西药组、中西组大鼠精子ATP、ADP及EC值上升,AMP值下降(P＜0.05或P＜0.01).与中药组比较,中西组大鼠精子mPTP开放吸光度值上升(P＜0.05);中西组大鼠精子ATP高于中药组和西药组,中西组ADP及EC值高于中药组(P＜0.05或P＜0.01).结论 知柏地黄汤能够降低解脲脲原体感染大鼠精子mPTP开放程度,维护线粒体能量代谢,进而提高精子质量,这可能是其治疗解脲脲原体感染所致不育症的机制之一.
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两种不同方法学检测精子DNA完整性分析的结果评价
近年来,不孕不育问题已经成为世界性医学和社会问题,约有10％ ～ 15％的育龄夫妇受到不孕不育的困扰.其中男方因素约占50％(约20％为男方单方因素,30％～40％为男女双方因素),全世界不孕不育发病率有逐渐上升趋势[1].目前国内评价男性生育功能的指标主要还是精液常规参数分析.然而,传统的精液常规检测项目尚不能准确、完全地反映精子质量情况.有学者研究认为,男性不育者中仍有15％的精液常规分析是正常的,并且30％以上的男性不育患者因病因不清而被诊断为特发性不育[2].
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弱精症患者低活力精子中HES1的表达及调控
目的 分析HES1在弱精症患者低活力精子中的表达及调控.方法 收集30份弱精症患者精液标本和20份成年健康有生育能力男性的精液标本,提取精子RNA,制备生物素标记的cDNA探针,与含有30 968个探针的Phalanx OneArray~(TM)芯片杂交,分析男性精子中HES1基因的表达情况;再用RT-PCR,分析hsa-miR-487a和hsa-miR-193b在精子中的表达,从精子mRNA表达谱中搜索hsa-miR-487a和hsa-miR-193b靶基因的表达.结果 HES1在低活力精子中的表达上调,高于在高活力精子中的表达.hsa-miR-487a和hsa-miR-193b在低活力精子中的表达量分别是高活力精子的0.43倍和2.19倍.结论 HES1在低活力精子中的表达上调,可能通过hsa-miR-487a和hsa-miR193b的调节来影响精子的活力.
关键词： 弱精症 精子 HES1 hsa-miR-487a hsa-miR-193b -
SMAD3敲除对雄性小鼠生殖功能的影响
目的 探讨SMAD3缺失对雄性小鼠生殖功能的影响.方法 野生型雌性小鼠分别与基因敲除(实验组)及野生型(对照组)雄性小鼠配对;睾丸常规石蜡包埋、切片并进行HE、TUNEL染色;对附睾精子进行形态、动力学分析等.结果 实验组受孕率为92%,对照组受孕率100%;实验组每窝仔鼠数目为(5.45±0.78)只,存活率(87±19)%;对照组每窝仔鼠(6.01±1.03)只,存活率(97±15)%.不同发育阶段(7、18及90d)基因敲除小鼠的睾丸与同龄野生型相比,组织学结构未见明显异常,生精细胞凋亡未见明显增加.其精子形态正常,数量及活力与野生型相比无显著下降.结论 SMAD3敲除对雄性小鼠生殖功能无明显影响,提示SMAD3在睾丸中的功能是可以被替代的.
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精子顶体酶含量、精子畸形率和麦芽凝集素受体含量的临床意义
目的 研究常规检查精液的精子膜麦芽凝集素受体(WGA)、精子畸形率和精子顶体酶的临床意义.方法 收集单纯因输卵管梗阻行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)并于促排卵周期获取成熟卵8个以上患者258例,在患者丈夫精液常规检查均正常后,进行精子WGA受体含量、精子畸形率和精子顶体酶含量的检测,并统计患者受精率.结果 体外受精率＜65%组64例,受精率≥65%组为194例,两组比较,WGA受体含量有显著性差异,顶体酶活性和精子畸形率差异不显著.结论 精子膜麦芽凝集素受体的含量、精子畸形率与精子顶体酶均能影响体外受精,但WGA受体含量更能预见体外受精率.
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精子蛋白质组学研究进展
迄今蛋白质组学技术已被广泛应用于生理与病理状态下差异蛋白表达的研究,在人类精子蛋白质组学研究方面,许多研究应用该技术对生理与病理状态下精子差异蛋白表达进行了探索,从蛋白质组水平揭示了精子不同生理与病理条件下的蛋白质表达谱的变化规律,为全面理解精子生理与病理的分子机制提供了可靠的理论依据.
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牛精子头后部质膜分区的研究
目的检测牛精子头后部存在的不同质膜区域. 方法先用钙离子载体A23187诱导精子发生顶体反应,然后用水浴超声波和低速离心法分离得到纯牛精子头.直接用顶体反应后精子和低渗处理的顶体反应后精子头免疫Balb/c母鼠和新西兰公兔,制备抗牛精子抗体,并结合以前制备的抗牛精子sp18单克隆抗体进行间接免疫组织化学分析. 结果牛精子头后部质膜表面存在两个位置互补的荧光区域,即紧邻赤道板和紧邻尾段的荧光区域:前一区域表面稳定存在的主要是sp18族膜蛋白,后者的膜蛋白在顶体反应和洗涤时易解离. 结论依据膜蛋白成分的差异,牛精子头后部质膜可以划分为紧邻赤道板的sp18质膜区域(sp18-rich region)和紧邻尾段的无sp18质膜区域(sp18-free region).
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人精子甘露糖受体表达与顶体反应的关系
目的研究人精子的甘露糖受体(MR)表达与顶体反应的关系,以探讨体外获能培养精子的MR表达是否为人精子获能的标志.方法将上游法收获的活精子在获能培养基BWW中进行体外获能培养后,加入小鼠透明带溶解液(mZPS)诱导人精子顶体反应,精子悬液用异硫氰酸荧光素标记的甘露糖基化牛血清白蛋白(FITC-DMA)为探针标记MR,用豌豆凝集素(PSA)法检测顶体反应.结果体外获能培养人精子的MR表达率与mZPS诱导的顶体反应率无相关性.结论体外获能培养精子的MR表达可能不是人精子获能的标志.
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氧化呼吸链在精子运动中的作用研究
目的探讨精子运动的能量供应机制.方法采用计算机辅助精子分析(CASA)和组织化学、生物化学方法,检测人精子用氧化呼吸链阻断剂KCN孵育前后,运动状态和细胞色素氧化酶活性.结果用KCN孵育后精子细胞色素氧化酶活性被完全阻断.然而,精子运动速度参数和运动状态参数无显著改变.结论在氧化呼吸链阻断后,精子仍能维持基本正常地运动,表明精子运动的供能尚有其他来源.
