首页 > 文献资料
-
一次性标本袋在手术室的应用
标本的管理在手术室是非常重要的,以往手术切下的标本,通常放在废弃的塑料袋或空瓶中,在袋上做好标记,集中送到病理科做病理检查.由于标签不清,包装不规范经常造成标本的遗失和差错,且由于袋口密封不牢,运送过程中不慎造成标本固定液倾翻,而导致标本变性,污染周边环境等,从而造成手术室与病理科之间的很多矛盾,鉴此,我科特制了一次性标本袋,用于存放标本,经临床使用,效果良好.现介绍如下.
-
尸检组织的固定、脱水及制片
目的探讨改进尸检切片质量的方法.方法调整组织固定液的配方、固定时间、浸蜡的时间及脱水透明程序.结果组织固定效果好,脱水彻底无变形,染色后切片效果好,便于观察.结论只有不断优化尸检切片制作过程中的每一环节,才能制作出比较满意的切片.
-
介绍一种精液涂片染色新方法
建立精液固定、快速染色新方法.经试验配制5mmol/L戊二醛磷酸缓冲液固定液固定精液涂片,经快速血球染液染色与巴氏、H-E、瑞-吉氏染色法对31例(其中不液化7例、液化不良8例)精液涂片固定后,脱膜率分别为:6%(2/31)、29%(19/31)、39%(12/31)、49%(15/31).与巴氏染色法对精子形态分析结果比较,异常精子百分率分别为:21%、23%,经统计学处理配对t检验无显著性差异(P>0.05).该法操作简便,固定良好,染色迅速,精子着色清晰易辨,精细胞、不成熟精细胞和白细胞易区分,适合精液常规中精子形态的检测.
-
高压锅和微波抗原修复法的对比分析
免疫组织化学技术是用已知抗体或抗原检测组织细胞中的未知抗原或抗体的技术,具有操作简单、敏感性和特异性强等优点,已广泛用于病理诊断.但在甲醛固定、石蜡包埋后的组织有部分抗原决定簇与核酸或其他蛋白发生交联,形成网络,固定液中的醛基在使蛋白质变性的同时,自身也会交联形成网络结构,使组织抗原决定簇封闭.
-
如何选择合适的病理标本固定液容器
活体组织病理诊断是外科疾病诊断的金标准[1],如果组织自溶、结构破坏、细胞变形就可能导致无法诊断[2]。病理标本固定液一般为甲醛溶液,市售的甲醛溶液为含40%甲醛的溶液,其佳固定效果为含4%甲醛的溶液,又叫做福尔马林溶液,因此在固定病理标本前应将其稀释10倍,即1份的市售甲醛溶液加9份的水。如果是一些怀疑恶性肿瘤或者恶性肿瘤需做免疫组织化学的,则应选择中性甲醛溶液固定,固定组织时应尽可能新鲜,固定液用量应不少于组织总体积的10倍,至少要完全浸没整个组织[3]。由于甲醛为极易挥发性物质又具有相当大的刺激性、致癌性,因此固定液的配制、储存是否得当、使用是否安全在一定程度上影响着组织的固定能否及时、有效、充分。现对普遍的固定液容器做一个对比,具体报告如下。
-
优化人胃癌细胞SGC-7901细胞骨架图像的激光共聚焦显微技术
目的 利用激光共聚焦技术,对比三种固定液不同固定时间对胃癌细胞系SGC-7901的细胞骨架荧光染色的影响.方法 选择三种常用固定液:2.5%戊二醛,4%多聚甲醛及95%乙醇,对接种24h后的SGC-7901细胞分别进行10min,20min及30min等不同时间点固定,5% BSA(含0.2% Triton X-100)封闭透膜1h,荧光抗体FITC标记的鬼笔环肽37℃避光孵育2h,DAPI室温染核15min,激光共聚焦扫描显微镜扫描,对比观察其染色结果.结果 三种固定液及不同固定时间对SGC-7901细胞骨架染色效果不尽相同.95%乙醇固定后微丝之间区分不明,排列混乱,无网状结构,染色效果与固定时长无关.2.5%戊二醛固定后微丝结构完整,但层次不清晰.4%多聚甲醛固定后微丝结构完整,层次清晰,固定20min及30min微丝荧光染色清晰.结论 4%多聚甲醛固定20min对细胞骨架固定效果好,荧光染色标记结果为后续细胞骨架功能研究优化实验方法并提供理论依据.
-
电镜样品制备过程中四氧化锇的改进保存法
在医学、生物学电镜研究工作中,四氧化锇是一种几乎必不可少而又很昂贵的固定剂.四氧化锇是一种强氧化剂,容易被热和光促进氧化,须于冷暗处保存,并有强烈的挥发性,其蒸气有剧毒作用,极易挥发.因此平时不易保存,一般电镜技术著作,都介绍用密合的暗色磨口瓶冰箱内保存四氧化锇固定液.但有时瓶口稍有不严或关闭时疏忽,即有蒸气逸出,使固定液内四氧化锇含量下降,又易与冰箱内其它物品发生化学作用,还可将冰箱内壁熏黑后溶液没用完就变色失效,造成浪费,尤其规模较小的实验室,工作量很少,但又必须用此固定液,配制后又不能立即用完,所以溶液的保存问题,尤为重要.
-
人类外周血染色体G显带的改良方法
背景:染色体G显带常规方法操作繁琐、费时、效果较差,不利于临床染色体病的检查和教学科研等.目的:寻找提高染色体G显带效果的方法.设计:观察性实验.单位:新乡医学院.材料:实验于2001-01/2005-01在新乡医学院形态实验室完成.取新乡医学院第三附属医院妇产科2001-2004年门诊不孕不育和不良生育史患者外周血共376份.RPMl1640培养液(GIBCO公司),20%小牛血清,秋水仙素,0.075 mol/L KCl,甲醇,冰醋酸,胰蛋白酶(SIGMA公司),Giemsa染液.方法:改良的人类外周血染色体制备技术及G显带方法:操作步骤同常规方法,只是将部分影响因素做了调整,如秋水仙素作用时间调整到终止培养前2 h,加入1 mL固定液(甲醇:冰醋酸=2∶1)进行预固定,混匀后以1 500 r/min离心10 min.再离心后视细胞多少加新鲜固定液,制成细胞悬液,滴片.将上述玻片标本置500℃烤箱中一两小时,自然冷至37℃后,浸入胰蛋白酶液中消化3~5 min左右,立即移入Giemsa染液(用1份Giemsa原液加9份pH为6.8的磷酸缓冲液配制)中染色10 min,镜检计数,共观察3 000分裂相数,计算标本的400~600条分裂相的百分率和分散良好百分率.染色体分散良好指染色体分散后没有重叠,数目完整,随体和着丝点明显,着色鲜明,形状清晰,且各色染色体处于同一平面上.分裂相百分率=400~600分裂相细胞数/观察细胞数×100%.主要观察指标:标本的400~600条分裂相百分率和分散良好百分率.结果:常规方法400~600条分裂相占52%,分散良好率68%;改良方法400~600条分裂相占75%,分散良好率86%,两组比较差异有显著性意义(P<0.05).结论:改良方法获得的染色体分裂相多,分散良好,长短适中,Giemsa染色显示带纹清晰.
-
气囊导尿管常规注入固定液量的探讨
气囊导尿管以固定牢固、方便、清洁的优点,而广泛应用于临床.但是关于导尿管气囊固定液量教科书中尚无统一规定,临床工作中多见因注液量不一而引起意外或拔管困难、尿管脱出的现象[1,2].为了了解合适的气囊注入固定液量,我科对同期妇科手术患者注入固定液量做进一步临床观察,现报道如下.
-
简易标本固定液容器的制作与应用
福尔马林至今仍然是组织固定的首选药液,它是一种还原剂.极易挥发且具有强烈刺激性气味,对人的眼睛和呼吸道黏膜以及部分内脏、局部皮肤都有较强烈的刺激性,直接危害操作人员的身体健康.为此,我院手术室制作相对密闭的容器盛装福尔马林,以减少对人体的危害,现报道如下.
-
手术标本袋封口的改进
在手术室,有各种手术切下组织需送病理科检验,过去我科采用胶布或丝线结扎袋口,常因结扎不扎实而发生固定液外漏现象.为解决这一问题,我科现采用空碘伏瓶对手术标本袋进行封口,效果满意,现介绍如下.
-
注射甘油并浸渍肺的标本的制作
应用在教学中肺的标本都是浸泡在福尔马林(10%甲醛)固定液内.肺泡内充满福尔马林液体,实质坚硬失去弹性,不能给学生展示肺泡的扩张、回缩状态,且福尔马林刺激气味太浓,影响对标本的观察.试用甘油注射并浸渍后的肺能保持一定的弹性,充气时可使肺扩张,反之肺可自动回缩,所以,用此方法制作的肺标本可显示肺泡的扩张与回缩过程,并减少了甲醛的刺激气味,可更好的应用于解剖、临床X光的教学当中.
-
不同固定液对胃癌细胞骨架及连接蛋白荧光染色标记效果的比较
目的 通过激光共聚焦技术,观察SGC-7901胃癌细胞系在不同固定液作用下的细胞骨架及连接蛋白荧光染色.方法 接种SGC-7901细胞24 h后,分别用4%多聚甲醛、2.5%戊二醛及95%乙醇室温固定20 min,5% BSA(含0.2% Triton X-100)封闭透膜1h,直标荧光一抗避光37℃孵育1h,DAPI室温染核15 min,激光共聚焦扫描显微镜扫描.结果 4%多聚甲醛对细胞骨架微丝结构及连接蛋白Zo-1细胞膜定位均有较好的固定作用,2.5%戊二醛对微丝结构基本起到固定作用,而95%乙醇对于微丝的固定效果略差.后两种固定液固定细胞均出现连接蛋白胞质表达的非特异染色现象.结论 4%多聚甲醛对细胞骨架及细胞间连接蛋白的固定效果较优,荧光染色标记结果为后续研究提供依据.
-
3种小鼠晶状体组织石蜡切片固定液的比较
目的:比较3种固定液对小鼠晶状体组织石蜡切片的影响,优化小鼠晶状体组织石蜡切片固定方法。方法选取3种常用固定液(改良Davison’s固定液、传统Davison’s固定液和10%中性甲醛固定液),固定小鼠晶状体组织,并制成石蜡切片,经HE染色后在显微镜下观察。结果传统Davison’s固定液固定的晶状体组织切片无碎裂,改良Davison’s固定液固定的晶状体组织中央区碎裂。改良Davison’s固定液和传统Davison’s固定液固定的小鼠眼球外形均无明显变形和收缩,未见明显的视网膜脱离,镜下视网膜组织结构完整清晰,各层细胞排列紧密,无明显裂隙,染色鲜艳。采用10%中性甲醛固定液固定的小鼠眼球壁组织发生严重皱缩,晶状体组织皱缩,空隙和空泡形成。结论传统Davison’s固定液固定的小鼠眼球晶状体组织石蜡切片质量效果优于改良Davison’s固定液和10%中性甲醛固定液。
-
不同温度和固定液对冰冻切片质量的影响
临床病理检查中冰冻切片质量受多种因素的影响,其中固定液的选择和冰冻温度至关重要.本文作者以不同温度冰冻切片,并选用比较常用和容易配置的10%甲醛、甲醇和Bouin 3种固定液,比较不同温度及不同固定液处理的冰冻切片的质量.
-
非福尔马林醇性固定液在组织标本固定中的应用
中性福尔马林是常规病理制片中常用的组织固定液,因其具有较强刺激性、毒性、腐蚀性且易挥发,危害着病理工作者的人体健康,并造成环境污染,这是长期困扰病理工作者的一大难题[1].
-
灌注固定大鼠的技术操作及常见问题
在组织学取材和科研活动中常常要用到大鼠,取材时组织材料一要尽量保持活体时的状态,二要尽量避免使动物长时间处于痛苦和濒死状态,引起病理假象,干扰科研结果.灌注固定是使动物在麻醉状态下,先灌入生理盐水,再灌入固定液,即组织材料还是活体的时候即被初步固定,这样能够大限度地保持组织细胞活体时的状态,避免抗原的丢失.动物在被处死时没有痛苦,组织器官的结构更加清晰.现将多年来进行灌注固定大鼠的技术操作和常见问题分析如下.
-
不同固定液对组织穿透力的比较
将组织浸入某些化学试剂,使细胞内的物质尽量接近其生活状态时的形态结构和位置,这一过程称为"固定".固定的时间与使用固定液的种类、组织块的大小、温度等有关.不同的固定液有不同的固定时间.良好组织学切片的要求非常严格,其基础取决于适当而完全的固定.那么,在一定的温度下,缩短固定时间,而又不影响固定效果,选择这样的固定液是比较理想的.我们就几种单纯固定液对组织的穿透深度进行了比较,观察所用固定液中哪一种固定时间比较短,用以指导我们配置较为合理的固定液.
-
气囊导尿管常规注入固定液量的探讨
气囊导尿管以固定牢固、方便、清洁的优点,而广泛应用于临床.但是关于导尿管气囊固定液量教科书中尚无统一规定,临床工作中多见因注液量不一而引起意外或拔管困难、尿管脱出的现象[1-2].为了了解合适的气囊注入固定液量,笔者所在科对同期外科手术患者注入固定液量做进一步临床观察,现报告如下.
-
制作小肠组织石蜡切片的改进方法
小肠是消化和吸收的主要部位,腔面为环形皱襞,黏膜表面有许多细小的肠绒毛.由于传统方法在制作小肠组织教学切片时,常出现组织易碎裂,细胞收缩,切片厚薄不均,染色太深或太浅使染色质结构在显微镜下观察不清晰.为了解决这些问题,笔者在实际工作中摸索实践,在制片方法上进行了一些分析和改进,采用福尔马林-醋酸-乙醇(FAA)固定液无需水洗直接投入乙醇中脱水,利用震荡法缩短制片时间,使小肠组织石蜡切片的质量有所提高.