ABCE1特异性siRNA慢病毒载体的构建与鉴定
摘要： 目的 构建并鉴定ABCE1基因短发夹状干扰RNA(shRNA)慢病毒载体,以便进一步研究ABCE1的功能.方法 针对已经筛选确定的ABCE1基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经BamH Ⅰ和Hind Ⅲ酶切后的pRNAT-U6.1/GFP载体连接、转化,产生pLV-sh-ABCE1慢病毒表达载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.用pLV-sh-ABCE1、pHelper 1.0和pHelper 2.0 3种质粒共转染包装细胞人胚肾293T细胞,包装产生重组慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度.结果 PCR和测序证实,成功构建ABCE1 shRNA的慢病毒载体pLV-sh-ABCE1.包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为2×108TU/ML.结论 成功构建ABCE1基因shRNA慢病毒载体,为应用RNAi研究ABCE1功能奠定基础.
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锁骨上臂丛神经体表投影交叉定位阻滞法临床应用体会
我们采用臂丛神经体表投影交叉定位穿刺法,行臂丛神经阻滞,取得良好的效果,现报告如下.1资料和方法
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280例前置胎盘临床分析
近年来,前置胎盘发病率有增高趋势.有报道其发生主要与引产、流产、剖宫产、孕龄增高、多产及吸烟有关[1],是妊娠晚期出血的主要原因,严重威胁母婴的生命安全.本文收集我院及大连市妇产医院1994年1月至1999年10月前置胎盘患者280例进行临床回顾性分析,并结合有关问题进行探讨,以提高对前置胎盘的认识和处理水平.
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糖尿病微血管病变同型半胱氨酸检测的临床意义
本文通过分别测定糖尿病及合并微血管病变症患者血清Hcy水平,探讨血清Hcy与糖尿病及合并微血管病变的相关关系.1资料与方法1.1一般资料 本院同期体检健康正常人40例.男24例,女16例.平均(50.4±9.1)岁.无心、脑、肝、肾等重要户器疾病,无内分泌与其他慢性疾的设为正常对照组.2009～2010年来本院就诊,依据1999年世界卫生组织糖尿病诊断标准确诊为糖尿病的患者65例.男37例,女28例.年龄41～67岁,平均(54.4±6.9)岁.设为糖尿病组.
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产道血肿9例临床分析
q 为预防和早期发现产道血肿,减少阴道分娩并发症,现就产道血肿的有关问题报告如下. 1 资料与方法
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肾小球疾病尿液足细胞排泄的特征
目的 探讨在各种肾小球疾病中尿液足细胞排泄的特征.方法 将96例因肾小球疾病行肾穿刺病理活检的患者作为病例组,根据肾脏病理改变,分为肾小球活动性病变组和肾小球非细胞增生性病变组,40例健康志愿者作为对照组,采用免疫酶细胞化学方法,应用小鼠抗人podocalyxin(PCX)单克隆抗体进行标记,计数足细胞,比较分析各组尿液足细胞阳性率及尿液足细胞的平均排泄水平.结果 1)96例肾脏疾病患者中,65例尿液足细胞阳性,占67.71%;而40例健康志愿者中尿液足细胞均为阴性,差异均具有非常显著性意义(P <0.01).2)96例肾脏疾病患者中,肾小球活动性病变组,尿液足细胞检测的阳性率为75.81%,足细胞平均排泄水平为(6.48±8.03)个/20HP;而肾小球非细胞增生性病变组,尿液足细胞检测的阳性率为52.94%,足细胞平均排泄水平为(2.65±3.92)个/20HP,两组比较差异具有显著性意义(P <0.05).结论 在多种类型的原发性或继发性肾小球疾病中均有足细胞的损伤脱落,尿液足细胞的排泄水平与肾小球疾病肾脏病理活动性密切相关.
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以腹部创伤为主的严重多发伤的急诊临床救治分析
目的 分析和研究以腹部创伤为主的严重多发伤的急诊临床救治情况.方法 回顾性地分析我院自2013年1月至2015年1月期间经急诊抢救收治的200例腹部创伤为主要表现的多发伤患者,创伤评分超过十六分.根据患者病史及相应的影像学检查方法,确定患者的受伤部位和受伤严重程度.以上患者有174例进行手术,26例保守治疗.结果 经过系统诊治后,治愈患者人数169例(84.5％),好转患者人数24例(12％),死亡患者3例(1.5％),其他情况患者4例(2％).结论 针对腹部创伤为主的多发性损伤的治疗,要对整个救治步骤进行合理安排,有效提高医院内救治水平,做到抢救、诊断、治疗一体化,从而降低患者死亡风险.
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超声引导下丙泊酚联合丁卡因在绝经后妇女困难取环术中的应用
目的 探讨超声引导下丙泊酚联合丁卡因在绝经后妇女困难取环[宫内节育器(IUD)]术中应用的有效性及安全性.方法 选择绝经后困难取环术患者180例.随机等分为3组.对照1组:应用盐酸丁卡因胶浆宫颈表面润滑麻醉.对照Ⅱ组:应用丙泊酚全凭静脉麻醉.实验Ⅲ组:应用丙泊酚静脉麻醉联合盐酸丁卡因胶浆宫颈表面润滑麻醉.3组均在超声引导下行取环术.临床观察各组生命体征、镇痛效果、宫颈松弛效果及不良反应等.结果 实验Ⅲ组生命体征平稳、镇痛效果好、镇痛显效率高、宫颈松弛显效率高、手术时间短、丙泊酚用量小及不良反应少,与对照组比较差异有显著性(P<0.01或P<0.05).结论 超声引导下丙泊酚联合丁卡因在绝经后妇女困难取环术中应用,术中生命体征平稳,镇痛效果确切,安全可靠,不良反应少.
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小切口胆囊切除术后不放置预防性引流63例报告
胆囊切除术后恰当而适时的引流可起到有效的预防治疗胆瘘及感染的作用.但是,不必要的、不正确的引流也会增加感染造成各种并发症的发生.
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去乳糖奶粉对轮状病毒性肠炎的治疗作用
去乳糖奶粉对于轮状病毒性肠炎的影响的报道较少,现将我们研究结果报告如下.1临床资料1.1一般资料2001年3月至2003年3月在我院儿内科住院的患儿79例,均符合轮状病毒性肠炎诊断标准[1].所有患儿粪便轮状病毒抗原检测阳性(试剂盒购于上海贝西科技发展有限公司),年龄6～27个月.大便次数4～12次/天,水样或蛋花汤样便,发热31例,均有不同程度脱水,以牛奶或奶粉喂养为主.所有患儿住院前没有长期腹泻史及营养不良.将人工喂养儿按入院顺序按随机数字表随机分为治疗组及对照组,其中治疗组34例(男17例,女17例),去乳糖奶粉喂养(雅培公司生产),年龄6～25月;对照组35例(男18例,女17例)继续延用原奶粉(一般牛奶或奶粉)喂养,年龄6～27个月.两组一般资料经统计学处理差异无显著性(P＞0.05).
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脑室出血侧脑室外引流的临床应用与分析
脑室出血(IVH)是指由非外伤因素导致颅内血管破裂,血液进入脑室系统引起的综合征,约占自发性颅内出血的20%～60%[l],并发症多,致残、致死率高.
