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地高辛标记的金黄地鼠RPL30cDNA探针的制备和应用

于丽;陈燕春;赵春艳;管英俊;高海玲;岳炳德

摘要: 目的 制备地高辛标记的核糖体蛋白RPL30cDNA探针并用其研究RPL30在神经管发育过程中的表达状况.方法 利用分部分排除技术(SSS法)从金黄地鼠神经管cDNA文库中逐级筛选得到RPL30cDNA的全长序列;随机引物法制备地高辛标记RPL30cDNA探针,点杂交法检测探针的灵敏度;Northern杂交检测神经管发育过程中RPL30mRNA的表达状况.结果 本研究从构建的神经管cDNA文库中得到RPL30cDNA片段,全长535bp;制备探针的浓度达到50mg/L;Northern杂交检测发现E8d~E12d神经管中RPL30mRNA的表达均处于较高水平.结论 该研究结果为进一步探讨RPL30与神经管发育和神经管畸形发生之间的关系奠定基础.

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