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  • 小鼠皮肤损伤愈合过程中PI3K/Akt通路的作用

    作者:高彦令;刘长胜;赵锐;王林林;李姗姗;刘敏;张淼;姜述堃;田志岭

    目的 探讨小鼠皮肤损伤愈合过程中损伤区磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶(phospho-PI3K,p-PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称Akt)和磷酸化蛋白激酶B (phospho-Akt,p-Akt)的表达及其随时间的变化规律. 方法 应用免疫组织化学染色、Western印迹法和real-time PCR技术检测小鼠皮肤损伤不同时间段PI3K、Akt、p-PI3K及p-Akt的变化情况.结果 免疫组织化学染色显示,皮肤损伤后,PI3K、p-Akt阳性染色出现在单核细胞和成纤维细胞,峰值出现在组织修复期.Western印迹法显示,各个时间段均有PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt的阳性条带,其中p-PI3K、p-Akt表达的峰值出现在炎症期和增生期,PI3K、Akt表达的高峰出现在组织重建期.real-time PCR结果显示,PI3K mRNA的峰值出现在炎症期和组织重建期,Akt mRNA的峰值出现在组织重建期.结论 在皮肤损伤愈合过程中,PI3K、Akt、p-PI3K及p-Akt的表达变化呈现不同的规律性并有较好的时间依赖性,PI3K/Akt通路的表达规律可以用于法医学损伤时间推断.

  • 米诺环素改善血管性痴呆大鼠认知功能障碍的机制研究

    作者:庞慧;刘怡;韩冰;付强

    目的:探索米诺环素是否在血管性痴呆导致的认知功能损害发生发展中发挥一定的神经保护作用,并进一步分析参与其中的相关分子机制。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组和米诺环素治疗组。结扎双侧颈总动脉建立大鼠血管性痴呆模型,术后腹腔注射米诺环素(25,50 mg/kg),28 d后进行水迷宫行为学实验检测认知变化,HE染色和Western blotting分析大鼠海马神经细胞凋亡的相关机制。结果(1)水迷宫认知功能测试显示,米诺环素能够显著缩短血管性痴呆大鼠寻找平台的潜伏期,并且明显延长在目标象限的停留时间,P<0.05为差异具有统计学意义。(2)HE染色显示米诺环素能够显著减轻模型组大鼠海马神经细胞损伤。(3)米诺环素治疗组含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值较模型组明显下降, P<0.05为差异具有统计学意义。(4)与模型组相比,米诺环素组磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)及磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达水平明显升高,磷酸化糖原合酶激酶-3β(p-GSK-3β)蛋白表达却显著下降,P<0.05为差异具有统计学意义。结论米诺环素通过激活PI3K/AKT信号通路,抑制该通路下游靶分子GSK-3β活性,减少海马神经细胞凋亡的发生,在神经细胞保护和改善认知功能障碍中发挥重要作用。

  • PKB/CDC25B信号通路在卵巢上皮性癌组织中的表达及临床意义

    作者:刘辉;高志安(通讯作者)

    目的:从分子水平上检测蛋白激酶B和CDC25B在卵巢上皮性癌组织中表达,探讨PKB/CDC25B信号通路在卵巢癌发生发展中的意义。方法:应用western印迹方法对2010年1月至2012年12月在辽宁医学院附属第一医院进行手术治疗,经病理组织学检查确诊的20例卵巢上皮性癌组织,正常卵巢组织10例,卵巢良性肿瘤15例的PKB和CDC25B的表达进行了分析。结果:PKB 与CDC25B western印迹检测卵巢上皮性癌组织中磷酸化PKB蛋白和CDC25B蛋白与正常卵巢、卵巢良性肿瘤组织相比,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:磷酸化PKB蛋白和CDC25B蛋白与卵巢上皮性癌的发生、发展呈正相关,有望成为卵巢上皮性癌生物学行为的重要指标。

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