首页 > 文献资料
-
T7肽修饰共载多柔比星与miRNA脂质体的制备及其对结肠癌细胞的增殖抑制作用
目的 制备T7肽修饰共载多柔比星(DOX)与MIFsiRNA脂质体(T7-LPs-DOX/RNA),研究其对人源结肠癌细胞(RKO)的靶向抑制作用.方法 薄膜分散法制备脂质体,透射电镜观察其形态.流式细胞仪检测RKO细胞对不同脂质体的摄取效率和摄取机制.细胞克隆形成实验检测不同脂质体对RKO细胞存活率的影响.构建RKO细胞肿瘤球模型,观察T7-LPs-DOX/RNA对实体肿瘤球的穿透能力.结果 RKO细胞对T7-LPs的摄取效率显著强于普通脂质体,T7-LPs-DOX/RNA对RKO细胞增殖抑制作用强于其他脂质体(P＜0.05).经过T7肽修饰后,脂质体对肿瘤球的穿透能力显著增强.结论 T7-LPs-DOX/RNA是一种有效的结肠癌靶向给药系统.
-
T7肽修饰氧化还原敏感型聚酰胺-胺作为siRNA递送载体的初步评价
拟构建一种具有潜在肝肿瘤靶向作用的T7肽修饰氧化还原敏感聚酰胺-胺(T7-PEG-SS-PAMAM,T7-PSSP)复合物,并用于M2型丙酮酸激酶(PKM2)-siRNA的体外递送.聚合物T7-PSSP的结构特征通过1H NMR进行确证.制备的T7-PSSP/siRNA复合物粒径为(119.8±0.76) nm,多分散系数(PDI)为0.19±0.12,ξ电位为(8.92±0.38) mV.琼脂糖凝胶电泳试验证明载体-基因复合物具有较好的稳定性,且对siRNA具有较好的保护作用.通过凝胶电泳法观察到,在谷胱甘肽还原剂的作用下,siRNA能快速从PSSP/siRNA复合物中释放出来,说明PSSP/siRNA复合物在还原环境中可有效释出携载的siRNA.体外摄取试验表明,T7肽的修饰可以显著提高siRNA在肝癌细胞HepG2中的摄取量.实时荧光定量RT-PCR结果显示,与阴性对照和其他复合物组相比,T7-PSSP/siRNA具有高的PKM2基因转染和沉默效率.
-
Tumstatin活性片段-T7肽抑制血管生成的实验研究
目的:探讨肿瘤抑素(Tumstatin)的活性片段T7肽在体外对血管生成的影响及相关机制.方法:选取人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为研究对象,在模拟肿瘤缺氧微环境的缺氧培养箱内进行相关实验.分为缺氧对照组、缺氧+T7肽(1.0μ mol/L)处理组、缺氧+T7肽(2.0 μ mol/L)处理组.体外小管形成实验观察T7肽在缺氧环境下对血管生成的影响;CCK-8法检测T7肽对HUVECs活力的影响;Annexin V-FITC法检测细胞凋亡情况;Western blot检测Bax、Bcl-2蛋白的表达变化;免疫荧光及Western blot检测HUVECs中VE-钙黏蛋白表达变化.结果:在缺氧环境下,T7肽可明显抑制体外血管生成(P＜0.05),并显著降低HUVECs活力,促进其凋亡(P＜0.05);T7肽可诱导促凋亡蛋白BAX表达增加(P＜0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低(P＜0.01);T7肽可降低HUVECs内VE-钙黏蛋白的表达(P＜0.05).结论:T7肽可通过抑制内皮细胞活力、促进内皮细胞凋亡及降低VE-钙黏蛋白表达发挥其抗血管生成的作用.
-
T7肽修饰的硫酸长春新碱脱铁铁蛋白纳米粒制备及其对胶质瘤细胞的体外靶向性研究
目的:制备T7肽修饰的硫酸长春新碱(VCR)-脱铁铁蛋白(APO)纳米粒,并研究其对胶质瘤细胞的体外靶向性.方法:采用解离-重组法制备VCR-APO纳米粒,以靶头(T7肽)修饰后制成T7-VCR-APO纳米粒.采用质谱分析和紫外-可见分光光度法评价靶头连接效率,并对所制纳米粒进行形态、粒径、Zeta电位、包封率等进行表征.以胶质瘤C6细胞为模型,考察T7-VCR-APO纳米粒对C6细胞及肿瘤球的靶向作用,并以低温条件和4种细胞内吞抑制剂考察C6细胞对T7-VCR-APO纳米粒的摄取机制.结果:经质谱检测证明T7肽已连接在纳米粒上,连接率为68.39％;所制得的T7-VCR-APO纳米粒形态圆整、均一,粒径为(31.14±1.26)nm,Zeta电位为(-23.30±0.42)mV,包封率为(39.49±2.84)％.体外靶向性研究显示,T7-VCR-APO纳米粒可有效地被C6细胞及肿瘤球摄取,并可到达肿瘤球核心位置;C6细胞对纳米粒的摄取是多通路共同作用的结果,主要是通过小窝蛋白介导的内吞并伴随巨胞饮途径.结论:本研究成功制得T7-VCR-APO纳米粒,其能够对胶质瘤C6细胞实现体外靶向递送药物,入胞效率大大提高.
