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RGD修饰的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的影响
目的 研究RGD修饰的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞(CNE)裸鼠移植瘤的影响并探讨其可能调节机制.方法 用RGD修饰的ING4单基因腺病毒载体(Ad.RGD-ING4)及腺病毒空载体(Ad.RGD-GFP)感染CNE细胞,RT-PCR法及Western blot法检测ING4基因的表达水平.采用CNE细胞株来建立15只人鼻咽癌裸鼠模型,分为PBS组、Ad.RGD-GFP及Ad.RGD-ING4组,每组5只.分别对瘤体内局部注射相应的干预用药,动态测量肿瘤体积,免疫组化检测Caspase-3基因的表达.结果 CNE细胞感染Ad.RGD-ING4 72 h后,ING4在CNE细胞中过表达,Ad.RGD-ING4组肿瘤体积明显小于PBS组及Ad.RGD-GFP组(P＜0.01),免疫组化结果显示Ad.RGD-ING4组比其余两组Caspase-3基因的表达明显上调(P＜0.01).结论 Ad.RGD-ING4抑制人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的生长,可能的机制是通过上调Caspase-3基因促进肿瘤细胞凋亡.
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Ad.RGD-ING4对人鼻咽癌细胞CNE抑癌增效及其机制的研究
目的:研究带RGD的腺病毒介导的ING4对人鼻咽癌细胞CNE生长、凋亡及细胞周期的影响并探讨其可能调节机制.方法:以Ad.RGD-ING4及腺病毒空载体感染CNE细胞,RT-PCR法检测ING4基因的表达水平,Western blot法检测目的蛋白的表达.用MTT试验检测ING4对CNE细胞生长情况的影响,用AnnexinV-PE/7-AAD双染色测定ING4对CNE细胞凋亡的影响,用PI单染色检测ING4对CNE细胞细胞周期的影响.RT-PCR检测p21、Bcl-2、Bax基因的表达水平的差异,Western blot法检测Survivin蛋白、Cleaved-caspase3蛋白表达的差异.结果:CNE细胞感染Ad.RGD-ING4 72h后,ING4在CNE细胞中过表达,CNE细胞的生长受到明显抑制,细胞凋亡率明显升高,G2/M期出现明显阻滞.RT-PCR结果显示,感染Ad.RGD-ING4的CNE细胞中Bcl-2表达下降,p21、Bax表达升高,差异具有统计学意义(均P＜0.01).Western blot结果显示Survivin蛋白表达下降,Cleaved-caspase3蛋白表达升高.结论:Ad.RGD-ING4可以对鼻咽癌细胞株CNE的起到抑癌增效作用,这一作用可能是通过下调Bcl-2、Survivin表达及上调p21、Bax、caspase3实现的.
关键词： Ad.RGD-ING4 鼻咽肿瘤 MTT 凋亡
