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ATP敏感性钾通道的心肌保护机制研究进展
自心肌细胞膜片钳技术应用以来,Nome 1 983年首先在豚鼠心室肌细胞发现ATP敏感性钾通道(KATP channel)[1],随后证实KATP在缺血再灌注中对心肌细胞具有保护作用,为细胞离子通道的研究开创了崭新的局面,成为临床及基础研究的热点.迄今,对心血管系统ATP敏感性钾通道的调节作用缺乏系统研究,本文就KATP的生理作用、在缺血再灌注及在触发性心律失常中对心室肌细胞的保护机制加以综述,为KATP通道开放的临床应用与基础研究提供理论依据.
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刺五加皂甙对胃癌细胞膜电位和亚细胞结构的影响
刺五加皂碱(acanthophopanax senticosus,ASS)为五加科植物,具有益气健脾、补肾安神和增强抗肿瘤免疫活性等作用[1].我们曾用流式细胞仪观察到ASS作用于Hep G2肝癌细胞的S期,抑制肝癌细胞DNA合成[2].我们用细胞膜片钳(patch clamp)技术及透射电镜观察ASS对胃癌细胞的离子通道和超微结构的影响,从分子水平探讨ASS对胃癌细胞的作用机制,以寻找治疗胃癌的新途径.
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黄体酮对豚鼠结肠平滑肌及细胞膜钙依赖的钾通道电流的影响
目的观察黄体酮(Progesterone)对豚鼠结肠平滑肌肌条和细胞的作用,借此探讨肠易激综合征(IBS)的病理生理机制.方法急性分离豚鼠结肠平滑肌肌条和单个平滑肌细胞.采用TD-112S型等张传感器测量肌条收缩与舒张的幅值、频率,并用Axopatch 1-D膜片钳放大器测全细胞模式下的单个平滑肌细胞大电导的钙离子依赖钾通道电流(BKCa).结果 64.8 μmol*L-1黄体酮可抑制结肠带肌条的收缩(0.1792±0.0873) g( n=6, P<0.05),而低浓度黄体酮仅抑制结肠环行平滑肌肌条的收缩(162 pmol*L-1 0.2360 g±0.1578 g,n=6,P<0.05;1.62 nmol*l-1 0.4332 g±0.2111 g,n=6,P<0.01;3.24 nmol*l-1部分肌条完全抑制P<0.01),其效应呈剂量依赖的趋势.细胞实验中12.96 μmol*L-1的黄体酮可抑制BKCa的幅值约60%±17%(n=10,P<0.01),而灌流液含5 μmol*L-1尼卡地平(nicardipine)时抑制BKCa的作用不明显.结论高浓度黄体酮对纵行和环行平滑肌均有抑制作用,而低浓度主要抑制环行平滑肌的收缩,作用机制与减少细胞外钙离子内流及抑制BKCa有关,这种作用可部分解释在临床上IBS妇女患病更普遍的现象,对女性IBS患者的激素治疗有一定的提示作用.
关键词: 结肠平滑肌 细胞膜片钳 钙离子依赖的钾通道 黄体酮 肠易激综合征(IBS) -
一种对玻璃微吸管电极抛光的装置及使用方法
目的:对玻璃微电极尖端进行热抛光处理,以提高膜片钳实验中高阻抗封接的质量和成功率.方法:用双相可控硅增加电流方法,完成低电压高电流输出;利用普通显微镜加以改造,在同一平面内观察电极尖端和电热丝情况.结果:直流输出电压6V;直流输出电流0~20A;40×(物距1cm)物镜;光镜和扫描电镜观察电极尖端平整、光滑.结论:利用简单的双相可控硅增流技术和对普通生物显微镜的改造,可以制做出用于玻璃微电极尖端热抛光的装置.