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消岩汤含药血清介导下Survivin siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响
[目的]分析消岩汤含药血清介导下Survivin siRNA对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响，探究其抑瘤机制。[方法]在Invitrogen公司的网上设计系统中设计靶向Survivin基因的siRNA序列，并将其转染A549细胞，应用噻唑蓝（MTT）法检测消岩汤以及转染组对A549细胞生长抑制的情况，免疫组化法观察A549细胞Survivin蛋白的表达情况，流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。[结果] MTT法显示消岩汤具有抑制A549细胞生长的作用，其作用具有一定的时间依赖性，转染中药组的抑制率显著高于转染对照组及非转染中药组。经免疫组化法检测，转染对照组对Survivin蛋白表达的抑制率明显高于非转染中药组，但显著低于转染中药组。流式细胞术检测结果显示消岩汤及重组质粒以诱导细胞晚期凋亡为主，转染中药组A549细胞凋亡率显著高于其他各组。[结论]消岩汤可诱导A549细胞的凋亡，联合应用转染靶向Survivin基因的重组质粒可增强其体外诱导A549细胞凋亡的作用。
关键词： 消岩汤 Survivin siRNA A549 细胞增殖 凋亡 -
消岩汤对肺腺癌A549实体荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡干预机制的研究
目的 分析消岩汤干预下Survivin siRNA对肺腺癌A549实体荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡的影响.方法 以人肺腺癌A549实体移植瘤裸鼠模型为研究对象,将消岩汤含药血清及siRNA转染后的A549细胞分别进行瘤内注射,通过流式细胞术观察小鼠体内细胞凋亡情况;免疫细胞化学法检测Survivin蛋白表达.结果 siRNA转染组对Survivin蛋白表达的抑制率明显高于消岩汤组,但显著低于消岩汤4siRNA转染组.siRNA转染组和消岩汤组均可诱导细胞凋亡,且siRNA转染组的诱导作用强于消岩汤组,消岩汤+siRNA转染组可协同增强诱导细胞凋亡作用.结论 消岩汤联合Survivin siRNA可协同增强诱导细胞凋亡作用.
关键词： 消岩汤 Survivin siRNA A549 肺腺癌 细胞凋亡 -
厄洛替尼联合survivin siRNA对人肺腺癌细胞A549增殖的影响
目的:探讨厄洛替尼联合survivin siRNA对人肺腺癌细胞A549的作用.方法:survivin siRNA转染、厄洛替尼单独或联合应用于人肺腺癌细胞A549,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察对A549细胞的增殖抑制作用,免疫组化染色法观察A549细胞Survivin蛋白的表达情况.结果:survivin siRNA转染联合厄洛替尼对A549细胞具有明显的抑制作用,且可明显降低A549细胞Survivin蛋白的表达,与单独应用survivin siRNA转染和厄洛替尼比较均有统计学意义(P<0.01).结论:应用siRNA沉默survivin表达可提高人肺腺癌细胞A549对厄洛替尼的敏感性.
关键词： 厄洛替尼 Survivin siRNA 人肺腺癌A549细胞 -
厄洛替尼联合RNAi对人肺腺癌A549细胞凋亡及survivin表达的影响
目的 探讨厄洛替尼联合survivin siRNA转染对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响及对survivin基因的抑制作用.方法 选用survivin siRNA转染和厄洛替尼二者单独或联合作用于人肺腺癌A549细胞,作用48 h后采用流式细胞技术检测其对各组细胞凋亡的影响,Western blot法检测其对survivin蛋白表达的影响.结果 survivin siRNA转染和厄洛替尼二者单独或联合作用于人肺腺癌A549细胞48 h后细胞凋亡均明显增加(P＜0.05),并且均能明显降低细胞内survivin蛋白的表达水平,联合应用较单独应用促进细胞凋亡作用更显著(P＜0.05),对survivin蛋白表达的抑制作用更强(P＜0.05).结论 应用siRNA沉默survivin表达可以提高肺腺癌细胞对厄洛替尼的敏感性.
关键词： 肺肿瘤 厄洛替尼 Survivin siRNA A549细胞 -
Survivin siRNA提高人结肠癌HT-29细胞对顺铂化疗敏感性的实验研究
目的 以siRNA抑制结肠癌HT-29细胞内survivin的表达,探讨HT-29细胞对顺铂(cisplatin,cDDP)的增敏效果.方法 转染siRNA于HT-29,检测survivin siRNA处理对survivin、Bax、Bcl-2蛋白表达及胱天蛋白酶-3(caspase-3)活性的影响.cDDP处理后,以四甲基偶氮唑蓝比色(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)及酶联免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法分析HT-29细胞增殖抑制及凋亡情况.结果 Survivin siRNA下调survivin、Bcl-2蛋白表达,上调caspase-3活性及Bax蛋白表达.Survivin siRNA还可增强cisplatin对HT-29的生长抑制效果及提高cisplatin所诱导的HT-29凋亡发生水平.结论 Survivin siRNA可提高HT-29对化疗药物cisplatin的敏感性.抑制survivin可能是一个重要的、可行的结肠癌治疗标的.
关键词： Survivin siRNA 化疗敏感性 凋亡 顺铂 结肠癌 -
以量子点为载体转染Survivin siRNA至人舌鳞癌Tca8113细胞中的实时观察
目的：通过量子点( quantum dot,QD)为载体将靶向Survivin 基因的siRNA转染至人舌鳞癌Tca8113细胞中,并通过激光共聚焦显微镜实时观察转染过程,以期在肿瘤治疗的同时对其进行实时影像学观察。方法表面带正电荷的水溶性量子点,通过正负电荷的吸引力与表面带负电荷的Survivin siRNA以1∶2比例结合成QD-siRNA复合物。 QD-siRNA复合物通过内吞作用进入人舌鳞癌Tca8113细胞,用激光共聚焦显微镜对QD-siRNA复合物转染至细胞中的过程和分布情况进行实时动态观察。结果激光共聚焦显微镜观察显示QD成功将Sur-vivin siRNA转染至人舌鳞癌Tca8113细胞中,QD-siRNA复合物加入培养皿15 min后开始吸附至细胞膜上,并慢慢穿透胞膜到达胞浆,直至6 h可见QD-siRNA复合物充分进入细胞,QD主要分布在细胞质中,而siRNA在细胞质和细胞核中均有分布。来自QD的红色荧光强度大于来自siRNAFAM的绿色荧光。结论激光共聚焦显微镜观察QD成功将Survivin siRNA转染至人舌鳞癌Tca8113细胞中,QD相对于羧基荧光素更适于进行细胞动态观察。
