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屈膝点按叩揉法调控L型电压依赖性钙通道影响软骨细胞代谢的机制研究
[目的]通过分析屈膝点按叩揉法调控L型电压依赖性钙通道影响软骨细胞合成代谢,探讨该手法防治膝骨性关节炎(KOA)的分子机制.[方法]50只新西兰大耳白兔随机分成5组,运用Hulth造模法构建KOA兔模型,治疗组采用屈膝点按叩揉法治疗,阳性对照组采用关节腔注射玻璃酸钠注射液治疗,正常组、假手术组及模型组同条件饲养.通过实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法检测L型电压依赖性钙通道α1亚基及合成代谢相关蛋白的表达.[结果]治疗组、阳性对照组Cav1.2、Cav1.3、Cav1.4、PTHrP、ColⅡ蛋白的表达均高于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05),治疗组Cav1.2、Cav1.3、Cav1.4、PTHrP、ColⅡ蛋白的表达与阳性对照组相比无统计学差异(P>0.05).[结论]屈膝点按叩揉法通过影响L型电压依赖性钙通道蛋白,增加细胞内钙离子浓度,上调甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)的表达,进而发挥促软骨细胞合成代谢的作用.
关键词： 屈膝点按叩揉法 L型电压依赖性钙通道 软骨细胞 代谢 -
急性缺氧对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞内钙浓度的影响
目的:研究急性缺氧对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞(PVSMC)细胞内钙浓度([Ca2+]i)的影响及L型电压依赖性钙通道(VDCC)阻断剂硝苯地平的作用,为缺氧性肺动脉高压发病机制的进一步研究提供理论依据.方法:胶原酶消化法培养大鼠远端PVSMC,利用荧光显微镜和细胞内钙浓度检测系统观测急性缺氧(4％O2)、高钾(60 mmol/L KCl)溶液对PVSMC的[Ca2+]i影响及硝苯地平的干预作用.结果:对照组PVSMC的[Ca2+]i随时间变化维持基线水平；缺氧组PVSMC急性缺氧后,[Ca2+]i迅速升高并维持平台水平,△[Ca2+]i达82.83 nmol/L士23.03 nmol/L;硝苯地平干预组PVSMC予急性缺氧和5μmol/L硝苯地平干预后,[Ca2+]i升高幅度较小；高钾溶液孵育PVSMC后,[Ca2+]i迅速增高,5 μmol/L硝苯地平能完全阻断PVSMC的[Ca2+]i对高钾溶液的反应.结论:急性缺氧可使大鼠远端PVSMC的[Ca2+]i升高,其机制可能与激活PVSMC的VDCC和另外的非VDCC依赖的钙通道导致细胞外Ca2+内流有关.
关键词： 急性缺氧 细胞内钙浓度 肺静脉平滑肌细胞 L型电压依赖性钙通道 大鼠 -
L型钙通道α1c蛋白在犬肺静脉前庭中表达的研究
目的 研究快速起搏心房引起心房颤动(简称房颤)动物模型肺静脉前庭中L型电压依赖性钙通道(L-type voltage dependent calcium channel,LVDCC)α1c蛋白表达.方法 通过建立犬房颤模型,并按是否产生房颤设立房颤组、窦性心律组和对照组,应用免疫组织化学方法检测各组肺静脉前庭中LVDCC α1c蛋白表达,用图像分析系统对组织化学抗原表达进行半定量分析.结果 α1c蛋白阳性表达在发生房颤的犬肺静脉前庭组织中表达明显下降,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).而同样条件下,不能诱发房颤的犬肺静脉前庭组织中α1c蛋白表达与对照组相比差别无显著性(P＞0.05).结论 肺静脉前庭组织中LVDCC蛋白表达的变化可能参与了心房的电重构和心房颤动的发生和维持,该通道的变化也可能是房颤难以自发终止的原因之一,也可能是房颤发生的机制之一.
关键词： 心房颤动 肺静脉前庭 L型电压依赖性钙通道 免疫组织化学
