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GC-MS法在老年营养不良患者血浆小分子代谢物质测定中的应用
目的 采用GC-MS法测定老年营养不良患者血浆小分子代谢物质,寻找与老年患者营养不良发生发展密切相关的小分子代谢物,探讨代谢组学在老年营养不良患者中的应用.方法 选取2015年2月-2016年2月在浙江医院诊治的30例老年营养不良患者作为实验组,同期按年龄、性别匹配选取30例营养状况正常的老年人作为对照组,分别采集2组研究对象的晨起空腹静脉血5 ml,静置分离血浆,分装低温保存.采用GC-MS法测定2组研究对象血浆小分子代谢物质,采用主成分分析和小方差判别分析法对2组研究对象血浆小分子代谢物质进行统计分析,并比较2组血浆小分子代谢物质水平.结果 2组研究对象血浆总离子流色谱图基本相似,色谱保留时间主要集中在5 ～ 15 min,实验组峰高明显低于对照组.实验组与对照组样品主成分得分图可以明显区分.实验组和对照组的置换检验截距R2 =0.668,Q2=-0.309.实验组甘氨酸、天冬氨酸、苏糖酸的值较对照组升高,而鸟氨酸、油酸、尿酸、D-塔罗糖、N-甲基-DL-丙氨酸、甘露糖、D-甘油磷酸酯、β-丙氨酸、α-酮戊二的值较对照组低(P＜0.05).结论 GC-MS法能检测出与老年营养不良患者有关的小分子代谢物质种类,提示GC-MS法可作为老年营养不良患者小分子代谢物检测的筛选方法.
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基于NMR技术对Wilson病模型大鼠尿液的代谢组学研究
目的:以基于核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)的代谢组学方法对Wilson病(Wilson's Disease,WD)铜负荷模型大鼠及正常对照组大鼠的尿液进行研究,分析模型大鼠尿液中代谢物的变化,继而从小分子层面探讨铜过量对机体的损伤机制,以更加清楚的认识本病.方法:28只雄性Wistar大鼠,体重(180±20)g,随机被分为模型组(n=14)和健康对照组(n=14).采用铜负荷法制作Wilson病大鼠模型,以NMR技术对大鼠尿液进行检测.采用MestRe-C 2.3软件及自编软件对谱图进行手动调相、基线校正和谱峰对齐.对样品进行分段积分,将积分数据归一化后构成数据矩阵,并利用PCA方法对数据矩阵进行统计分析.结果:相对于正常对照组,模型组大鼠尿液醋酸盐(acetate)含量有显著升高,柠檬酸盐(citrate)、苯乙酰甘氨酸(PAG)、琥珀酸盐(succinate)、甲胺(methylamine)、肌氨酸+肌氨酸酐(creatine/creatinine)、丙酮酸盐(pyruvate)、二甲基甘氨酸(DMG)、丙氨酸(alanine)含量有所升高,胆碱(cholin.)、牛磺酸(taurine)含量有所降低.这些发生改变的代谢物可能是潜在的WD铜负荷小分子代谢标志物,可为进一步研究WD的铜过量代谢机制提供参考.
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肝豆灵干预Wilson病模型大鼠NMR代谢组学研究
目的:以基于核磁共振(Nuclear Magnetic Resonance,NMR)的代谢组学方法对肝豆灵干预Wilson 病(Wilson's disease,WD)模型大鼠进行研究,分析肝豆灵干预后,WD模型大鼠尿液中代谢物的变化,从小分子层面探讨肝豆灵对WD的治疗作用机制.方法:42只雄性Wistar大鼠,体重(180±20)g,随机被分为健康对照组(n=14)、模型组(n=14)和肝豆灵组(n=14).采用铜负荷法制作Wilson病大鼠模型,以NMR技术对大鼠尿液进行检测,经MestRe-C 2.3软件及自编软件对谱图进行手动调相、基线校正和谱峰对齐.对样品进行分段积分,将积分数据归一化后构成数据矩阵,并利用PCA方法对数据矩阵进行统计分析.结果:相对于模型组,肝豆灵组大鼠尿液色氨酸(tryptophan)、马尿酸盐(hippurate)、苯基丙氨酸(phenylalanine)、甘氨酸(glycine)、苯乙酰甘氨酸(PAG)含量有显著升高;乳酸(lactate)、甜菜碱(TMAO/betaine)、甲酸盐(formate)、二甲基甘氨酸(DMG)含量有所升高;柠檬酸盐(citrate)、肌氨酸酐(creatinine)、谷氨酰胺(glutamine)含量显著降低;丙酮酸盐(pyruvate)甲基胍(methylguanidine)、丙酮(acetone)、牛磺酸(taurine)含量有所降低.这些发生改变的代谢物可为进一步研究肝豆灵干预WD的作用机制提供参考.
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甲状腺癌代谢组学诊断研究现状及展望
代谢组学是全面系统地描述生物样本中所有小分子代谢产物的一门学科.代谢组学可以通过内源性代谢物整体反映细胞内外环境的变化,在疾病的诊断研究等方面具有明显优势.近年来,甲状腺癌代谢组学研究发现小分子代谢产物对该病的诊断具有一定指导作用.作者就代谢组学在甲状腺癌诊断中的应用现状及展望进行综述.
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健脾益气养血法对老年营养不良患者小分子代谢物质的影响
目的:探讨健脾益气养血法对老年营养不良患者小分子代谢物质的影响.方法:选取2015年2月至2016年2月在本院诊治的老年营养不良患者30例作为观察组,同期选30例正常老年人作为对照组,观察组给予健脾益气养血法治疗42 d.采用GC-MS代谢组学检测对照组、观察组治疗前后的小分子代谢物质的变化差异.结果:对老年营养不良患者接受健脾益气养血法治疗前后血清代谢差异性产物进行分析,得到可能的小分子代谢物7种,分别为L-脯氨酸、L-肉毒碱、5-羟色胺、脱氧肌酐、Ⅳ-乙酰-L-酪氨酸,亚麻酸、花生四烯酸.结论:健脾益气养血法治疗后能使老年营养不良患者7种小分子代谢物血清水平基本恢复至正常,说明该疗法具有较好的临床效果.
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小剂量γ射线累积照射对大鼠尿液中小分子代谢物影响
目的 探讨小剂量137Csγ射线累积照射对大鼠尿液中小分子代谢物的影响.方法 无特定病原体级健康雄性成年SD大鼠40只,随机分为对照组和照射组,每组20只.照射组大鼠采用137Csγ射线照射,吸收剂量率为0.353 mGy/min,每天累积照射0.083 3 Gy,每3天累积剂量为0.25 Gy;对照组大鼠不作任何处理.分别于照射前1d和照射开始后第3、6、9、12 d收集大鼠尿液,对照组与照射组开始照射后第6d同步收集尿样.采用核磁共振技术对大鼠尿样进行检测,结合主成分分析法和偏小二乘法判别法,分析对照组与各剂量组大鼠尿液中小分子代谢物的差异.结果 小剂量γ射线累积照射后,各剂量亚组大鼠尿液中小分子代谢物发生了变化,各剂量组共发现了5种共同差异代谢物,分别为糖类、瓜氨酸、牛磺酸、柠檬酸盐和尿嘧啶.4个剂量亚组大鼠尿中5种差异代谢物相对水平分别高于对照组(P＜0.05);其中牛磺酸相对水平与累积剂量呈正相关关系(P＜0.05).结论 小剂量γ射线累积照射可造成大鼠尿液中小分子代谢物扰动.
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不同储存条件下人尿中小分子代谢物表征差异的初步研究
目的 了解代谢组学研究中常用的4种尿液储存条件下人尿中小分子代谢物表征的差异.方法 采用超高效液相色谱串联飞行时间质谱(UPLC-Q/TOF),分别在正离子和负离子模式下检测5名志愿者尿液中小分子代谢物,运用多元统计法分析4种储存条件(-80℃、-20℃、1％ HNO3置-80℃和2％抗坏血酸置-80℃)影响代谢物表征的差异性.结果 方差分析显示4种常见方法保存后的尿液检测到1375个具有显著性差异的小分子代谢物(ESI+/-为613/762个,P＜0.001),修正后,-80℃组尿液中存在小分子代谢物3700多个,与-80℃组相比,-20℃组存在4个具有显著性差异的小分子代谢物(ESI+/-为2/2个),1％ HNO3置-80℃保存后尿液中有120个(ESI+/-为76/44个),2％抗坏血酸置-80℃保存尿液中有18个(ESI+/-为6/12个).结论 本研究通过对比尿液的4种保存条件后尿液中小分子代谢物表征差异,初步认定-80℃为首选保存条件.
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过敏性鼻炎患者血液代谢组学研究
目的:采用代谢组学方法分析过敏性鼻炎患者血清中小分子代谢物的变化.方法:采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)检测20例过敏性鼻炎患者(病例)和同期20例健康者(对照组)血清中代谢物,采用正交偏小二乘法(OPLS)的方法,观察病例组和对照组的代谢谱变化,并寻找有差异的小分子代谢物.结果:对照组和病例组的代谢谱能明显区分,鉴定了23个差异代谢物,并对差异代谢物进行了ROC曲线绘制,计算ROC曲线下的面积,得出曲线下面积大于0.5的物质有甘油酸、丝氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、色氨酸和十九烷酸.结合代谢途径分析,发现过敏性鼻炎患者体内存在丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,半胱氨酸和甲硫氨酸代谢和色氨酸代谢异常.结论:基于GC/MS的代谢组学技术能全面客观地反映过敏性鼻炎患者体内血液中的代谢物变化,小分子代谢物分析及代谢途径探讨将为过敏性鼻炎的诊断和发病机制研究提供一个可借鉴的思路和手段.
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代谢组学在血虚证动物模型中的研究进展
综述了代谢组学在不同血虚动物模型及不同生物样本代谢途径变化的研究进展.血虚证是中医临床常见证候,其病理十分复杂,一般的研究方法具有一定的局限性.代谢组学通过对生物体体液及组织中小分子代谢产物进行高通量检测和筛选,随着代谢组学的快速发展,代谢组学已经广泛应用于血虚证的研究.
