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桑叶多糖含量测定与成分分析
目的 提取桑叶多糖并对分级醇沉所得桑叶多糖进行含量测定与单糖组成分析.方法 用水提醇沉法提取桑叶多糖,以三氯乙酸除蛋白、活性炭脱色,用AB-8大孔吸附树脂纯化,以95％乙醇将桑叶多糖分级醇沉为四段(a、b、c、d);以苯酚-硫酸法测定桑叶多糖含量;用薄层色谱法与气相色谱法测定四段多糖中单糖组成.结果 分级醇沉的多糖含量分别为38.4％,45.5％,40.7％,42.3％.在四段多糖中均含有3种已知单糖:鼠李糖、半乳糖、葡萄糖;部分含有木糖、甘露糖、果糖.结论 在桑叶多糖中,不同分子量段的含量及其各单糖数目、种类和含量均有所区别.
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多孔性白及胶的制备及辅料特性初步研究
目的 根据“药辅合一”理念,从中药白及中提取白及多糖(BSP),制备多孔性白及胶(BSPG),并分析多孔性BSPG的辅料特性,对其作为功能性辅料的可行性进行初步评价,为制剂学设计提供理论依据.方法 白及药材经脱脂、红外辅助水提、Sevage法脱蛋白、分级醇沉、冷冻干燥得到多孔性BSPG;采用分级乙醇法,分别以乙醇体积分数40％、60％、80％进行醇沉,以获得不同BSP组分(BSPG40、BSPG60、BSPG80);采用冷冻干燥法制备多孔性BSPG,利用质构仪测定多孔性BSPG固体和凝胶特性,比较各样品的辅料特性;以十八醇为轻质辅料,以多孔性BSPG为原料,采用全粉末直接压片,制备多孔性BSPG空白片以及非多孔性BSPG空白片,测定其在人工胃液中的漂浮性、吸水率、溶胀性、降解性能,对其作为漂浮型和生物黏附型胃滞留制剂功能性辅料的可行性进行研究.结果 红外辅助提取BSP各醇沉样品BSPG40、BSPG60、BSPG80的总多糖质量分数分别为69.33％、57.64％、42.83％,BSPG40、BSPG60、BSPG80所占比例分别为83.25％、12.16％、4.49％.BSPG80提取率低,且凝胶特性较弱,因此针对BSPG、BSPG40、BSPG60样品进行性能分析.经冷冻干燥后,BSPG、BSPG40、BSPG60样品均呈现疏松多孔的性状,各样品硬度随质量浓度的增加而逐渐增大,在相同质量浓度时,各个样品硬度表现为BSPG＞BSPG40＞BSPG60,而蓬松度随着硬度的增加逐渐减小,且BSPG、BSPG40、BSPG60分别为15、20、20 mg/mL时冻干样品的回弹性较好.分级醇沉样品凝胶强度和黏附力均随着质量浓度的增加而增大,黏附力表现为BSPG40＞BSPG＞BSPG60.初步实验表明,多孔性BSPG具有快速起漂、长时间漂浮、吸水性能好和缓释的性能.结论 不同体积分数乙醇沉淀使样品具有不同的辅料特性,且同一体积分数乙醇沉淀样品的质量浓度又影响其液体特性和冷冻干燥后的固体特性,同时多孔性BSPG是一种潜在的胃滞留漂浮型缓控释制剂辅料.因此,该研究为BSPG作为功能性辅料的研究提供了理论上的依据,对新型辅料的开发具有重要的意义.
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云芝多糖对小鼠脾细胞的免疫增强作用研究
目的 研究云芝多糖对小鼠脾细胞的免疫增强作用.方法 水提醇沉法制备云芝粗多糖,采用不同浓度的乙醇对所得云芝粗多糖进行梯度醇沉,并计算各级产物的总多糖含量及收率.将小鼠脾细胞分别与云芝粗多糖及分级醇沉各级样品共同孵育,采用CCK-8法检测各样品对脾细胞增殖、对ConA或LPS诱导的脾细胞增殖的影响,采用酶联免疫法检测各级产物对NO释放的影响.结果 分级醇沉各级产物多糖含量差异较小,但收率差别较大,其中30％浓度醇沉多糖收率高,40％浓度醇沉多糖收率低.云芝多糖分级醇沉各级样本对小鼠脾细胞增殖均有一定的促进作用,综合评价,优选出70％、80％醇沉样本较好,且作用效果明显优于粗多糖.总多糖及70％、80％醇沉多糖样品分别在0.50～1.25、0.50～0.75、0.50～1.00 mg·mL-1内药理活性与剂量呈正相关,且对ConA或LPS诱导的脾细胞增殖及NO释放有明显的协同作用(P＜0.05).结论 云芝粗多糖及分级醇沉各级产物对体外小鼠脾细胞具有免疫增强作用,本研究为云芝多糖的开发、利用研究提供了一定理论依据.
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不同分离提纯工艺对冬凌草多糖提取率与免疫活性的影响
目的:优选分离冬凌草多糖的方法,探究不同分离方法对冬凌草多糖分离效果的影响.方法:分别以DEAE-Sepharose Fast Flow(CI-型)弱极性阴离子交换层析法、乙醇分级醇析法对冬凌草粗多糖进行分离纯化,以不同分离组分中多糖含量及其免疫活性比较优选冬凌草粗多糖的分离工艺.结果:DEAE-Sepharose Fast Flow(Cl型)弱极性阴离子交换层析法分离得到5个组分,通过乙醇分级醇沉初步得到4个冬凌草多糖组分,前者分离产品纯度较高,而后者产品在体外小鼠脾淋巴T细胞的增殖实验中表现出较强生物活性.结论:为进一步研究冬凌草多糖的生物活性,可选用乙醇分级醇沉法对冬凌草多糖进行分离纯化.
关键词： 冬凌草多糖 弱极性阴离子交换层析法 分级醇沉 -
分级醇沉柳茶多糖的含量与单糖组成及抗氧化性研究
目的 研究分级醇沉的柳茶多糖(SAPs)含量、单糖组成及抗氧化活性.方法 采用水提、分级醇沉法制备SAPs,用硫酸-苯酚法测定多糖的含量,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化HPLC法分析单糖的组成,红外分光光度法研究多糖的构型,DPPH·法评价分级多糖的抗氧化活性.结果 分级醇沉SAPs含量的高低顺序为60％＞ 40％＞ 80％＞ 20％;葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖在各级醇沉SAPs三氟乙酸水解产物中的含量均高,其次是半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、甘露糖和核糖,未检测到鼠李糖和木糖;分级醇沉SAPs的抗氧化性优劣顺序为40％＞ 80％＞ 60％＞ 20％,40％醇沉多糖浓度为0.4 mg·mL-1时对DPPH·清除能力与0.04 mg·mL-1抗坏血酸相当,其半数抑制浓度IC50=0.235 mg·mL-1.结论 实验结果为柳茶多糖进一步化学、工艺和药理研究提供了参考.
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维药刺糖抗氧化活性多糖筛选研究
目的：研究维药刺糖中不同级别多糖的抗氧化活性。方法采用水提醇沉法得刺糖粗多糖，再用30％、50％和80％的乙醇进行分级醇沉得不同级别刺糖多糖 SAP-1、SAP-2和 SAP-3。分别考察 SAP-1、SAP-2和SAP-3对羟自由基和超氧阴离子的清除能力。结果刺糖多糖浓度为15 mg／mL 时对羟自由基的清除能力与对照品相同，刺糖多糖对超氧阴离子的清除能力较弱，SAP-1对羟自由基和超氧阴离子的清除能力均强于 SAP-2和SAP-3。结论刺糖多糖具有良好的抗氧化活性。
