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胍丁胺对谷氨酸和高钾诱发海马神经元细胞内钙离子浓度升高的影响
目的 观察胍丁胺对原代培养的大鼠海马神经元细胞内钙离子浓度([Ca2+]I)的影响及其对谷氨酸和高钾诱发[Ca2+]I升高的影响,探讨胍丁胺对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体和电压依赖性钙通道(VDCC)的作用.方法 原代培养的新生大鼠海马神经元,在细胞外液中加入1、10、100、1 000μmol·L-1胍丁胺,再用300μmol·L-1谷氨酸诱发NMDA受体通道的开放,或用50mmol·L-1 KCl诱发VDCC的开放,应用激光共聚焦扫描技术,动态观察胍丁胺对[Ca2+]I的影响.结果 1～1 000μmol·L-1胍丁胺对细胞内基础钙荧光强度无影响,1、10、100、1 000μmol·L-1胍丁胺使谷氨酸引起的[Ca2+]I升高大变化率由对照组的372%分别降至349%、327%、297%、233%.其中100、1 000μmol·L-1胍丁胺对谷氨酸引起的[Ca2+]I升高的抑制作用与对照组相比有显著性差异(P＜0.01).仅1 000μmol·L-1胍丁胺能抑制KCl诱发的[Ca2+]I升高(P＜0.01),低剂量组对KCl诱发的[Ca2+]I的变化无影响.结论 胍丁胺可以阻断NMDA受体耦联钙离子通道而抑制钙离子的内流,高浓度时也抑制VDCC.
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补肾生血中药对溶血性贫血小鼠骨髓幼稚红细胞DNA和RNA影响
目的探讨补肾生血中药的疗效机制及中医肾生髓分子水平变化的形态学基础.方法采用激光共聚焦技术,通过AO染色,观察补肾生血中药对溶血性贫血DNA、RNA的影响.结果溶血性贫血小鼠骨髓幼稚红细胞有不同程度破坏,红细胞形态不规则,DNA和RNA荧光强度弱,三维图像,形状不完整,呈锯齿状;经过治疗,尤其是中剂量组,红细胞破坏有所好转,细胞形态规则,形状趋于完整,荧光强度增强.结论补肾生血中药对溶血性贫血骨髓早期造血细胞有恢复作用,具有保护骨髓,促进造血的作用.
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应用激光共聚焦扫描技术对海马脑片神经元内钙的观察
用微量注射法将荧光剂Fluo-3(AM)注入大鼠海马,对神经元进行在体荧光标记,可清晰地标记多个神经细胞.联合应用激光共聚焦扫描显微镜(confocallaser scanning microscope,CLSM),观察大鼠海马脑片CA1锥体细胞在青霉素、谷氨酸模拟致痫及缺糖缺氧时胞内钙的变化.结果显示:无镁时,谷氨酸和青霉素可致海马CA1锥体细胞胞内钙的缓慢增加;离体缺糖缺氧时CA1锥体细胞胞内钙亦增多.
关键词： 细胞内钙 激光共聚焦扫描技术 海马脑片 Fluo-3(AM) 微量注射
