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HPLC梯度洗脱法同时测定参杞酒中的党参炔苷、东莨菪苷、东莨菪亭、槲皮素、山柰酚和异鼠李素
目的：建立HPLC梯度洗脱法同时测定参杞酒中的党参炔苷、东莨菪苷、东莨菪亭、槲皮素、山柰酚和异鼠李素。方法采用Shiseido C18（4.6 mm×250 mm，5μm）色谱柱；流动相A：乙腈，流动相B：0.5％醋酸水溶液，进行梯度洗脱；进样量为20μl；流速：1.0 ml/min；柱温：30℃；检测波长分别为269 nm（党参炔苷）、346 nm（东莨菪苷和东莨菪亭）和360 nm（槲皮素、山柰酚和异鼠李素）。结果党参炔苷、东莨菪苷、东莨菪素、槲皮素、山柰酚和异鼠李素分别在4.59～91.80（r=0.9999）、2.62～52.40（r=0.9996）、1.95～39.00（r=0.9998）、3.34～66.80（r=0.9995）、2.30～46.00（r=0.9991）、2.86～57.20μg/ml（r=0.9999）范围内与峰面积呈良好的线性关系，平均加样回收率分别为98.27％、97.62％、99.17％、98.50％、97.35％和98.86％，RSD（n=9）分别为1.33％、1.48%、0.99％、1.37%、1.35％、1.70%。结论本文建立的HPLC梯度洗脱法同时测定参杞酒中的上述6种组分，方法操作简便，准确，重现性好，可作为参杞酒全面可靠的质量控制方法。
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不同产地白花蛇舌草中东莨菪亭和耳草酮B的含量分析比较
目的 建立HPLC法对不同产地白花蛇舌草药材中东莨菪亭和耳草酮B含量进行了考察研究,为药材的开发利用奠定了基础.方法 应用高效液相色谱法进行含量测定,色谱柱:Agilent Eelipse XDB-C18(5μm,4.6 mm× 150 mm);流动相:甲醇-0.1％冰醋酸水溶液,梯度洗脱;检测波长:385 nm;柱温:30℃;流速:10 mL/min;进样量:10 μL.结果 江西产白花蛇舌草药材中东莨菪亭和耳草酮B含量均高于其他产地,其次为湖北、安徽,广西产含量低.结论 不同产地的白花蛇舌草中东莨菪亭和耳草酮B的含量有较大的差异,通过方法学考察验证,该方法精密度高、稳定性良好,方法可行.
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美花圆叶筋骨草的化学成分研究
目的 研究美花圆叶筋骨草Ajuga ovalifolia var.calantha的化学成分.方法 采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、ODS柱色谱和半制备型高效液相色谱等方法分离纯化,通过波谱学手段进行结构鉴定.结果 从美花圆叶筋骨草全草95％乙醇提取物中分离得到了13个化合物,分别鉴定为(16S)-12,16-epoxy-11,14-dihydroxy-17(15→16)-abeo-abieta-8,11,13-trien-7-one (1)、痢止蒿乙素(2)、ajudecumin A(3)、14,15-dihydroajugapitin (4)、杯苋甾酮(5)、β-谷甾醇(6)金合欢素(7)、芹菜素(8)、木犀草素(9)、东莨菪亭(10)、异东莨菪亭(11)、4-羟基-3-甲氧基苯甲醛(12)、乙酰香子兰酮(13).结论 化合物1、10～13为首次从该属植物中分离得到,化合物2～5、7均为首次从该植物中分离得到;并对化合物1进行了单晶X射线衍射实验,首次得到化合物1的单晶X射线衍射晶体结构数据.
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东莨菪亭(7-羟基-6-甲氧基香豆素)对7,12-二甲基苯并蒽诱导的皮肤乳头状瘤小鼠相关关键信号蛋白的影响
目的:东莨菪亭(7-羟基-6-甲氧基香豆素)是从常绿钩吻中提取的有效成分,前期体外研究证实了其抗肿瘤潜能,本研究评价其在小鼠体内的抗肿瘤作用.方法:30只健康小鼠随机分为正常对照组、模型组、溶剂对照组和低、高剂量东莨菪亭组,每组6只.正常对照组小鼠不接受任何干预,其余小鼠背部涂抹100 μg 7,12-二甲基苯并蒽(7,12-dimethylbenz[a]anthracene,DMBA)(每周一次)和1%巴豆油(每周2次)诱导皮肤乳头状瘤,共24周.溶剂组小鼠在造模基础上每天予2%酒精口服,低剂量(50 mg/kg)和高剂量(100 mg/kg)东莨菪亭组小鼠每天予东莨菪亭治疗.治疗24周后,检测碱性磷酸酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽S-转移酶活性;信号蛋白及其受体,包括芳香烃受体(Aryl hydrocarbon receptor,AhR)、p53、细胞色素P450亚酶1A1(cytochrome P450 1A1,CYP1A1)、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription-3,Stat-3)、存活素、金属基质蛋白酶2、cyclin D1、c-myc、金属蛋白酶组织抑制因子2和半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3),采用逆转录聚合酶链反应、蛋白印迹法或免疫沉淀法检测.结果:致癌物DMBA和巴豆油可以诱导毒性反应,生化指标中相关酶活性升高,AhR、CYP1A1、PCNA、Stat-3、存活素、MMP-2、cyclin D1和c-myc表达上调,p53、caspase-3和TIMP-2表达下调.荷瘤小鼠采用东莨菪亭治疗后,生化指标中相关酶的活性下降,蛋白表达和毒性生物标志物恢复正常.结论:东莨菪亭可能通过下调AhR表达来下调一些重要信号蛋白的表达,其作用机制可能是通过竞争性抑制存活素的表达.分裂原活化蛋白激酶可能也起到关键作用.东莨菪亭或许可作为化疗的替代药物用于治疗肿瘤.
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东莨菪亭与橙皮素联用对小鼠抗炎作用的定量分析
目的: 研究白花马鞍藤中主要成分东莨菪亭和橙皮素的相互作用.方法: 用巴豆油致小鼠耳肿胀模型研究东莨菪亭与橙皮索的量效关系;用Loewe Additivity模型定量分析东莨菪亭和橙皮素联用对小鼠耳肿胀的抑制作用.结果: 东莨菪亭与橙皮素能分别抑制巴豆油所致小鼠耳肿胀,并呈剂量一依赖关系;小剂量东莨菪亭+橙皮素合用指数<1,大剂量时>1.结论: 东莨菪亭与橙皮素各单用时对炎症有抑制作用,合用时小剂量有协同作用,大剂量有拮抗作用.
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东莨菪亭和橙皮素联用的镇痛效果定量分析
目的:应用均匀设计法,定量分析海滩牵牛中东莨菪亭和橙皮素联用对冰醋酸所致小鼠扭体实验的镇痛效果.方法:设置5个水平的东莨菪亭(s)和橙皮素(H)联用比例和剂量,采用冰醋酸致小鼠扭体模型,观察不同组合的镇痛效果,综合数理分析结果,确定优配方.结果:联合使用橙皮素194.5 mg/kg和东莨菪亭15.36 mg/kg对冰醋酸所致小鼠扭体实验町达到佳的抑制作用.佳剂量范围,H:175-215 mg/kg;S:14～17 mg/kg.结论:本实验采用均匀设计法确定了海滩牵牛中东莨菪亭和橙皮素联用对冰醋酸所致小鼠扭体实验的镇痛效果的佳配比.均匀设计法可用于多药物联用的定量分析,但有一定的局限,其结果需经实验确证.
