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基因芯片技术在中药研发中的应用
中药成份复杂、作用靶点不明确、重现性差,而基因芯片作为一种高通量、大规模研究基因功能的新技术,能够从分子生物学水平上阐明中医药治病的机制,在中药药理分析、新药研制开发、中药鉴定、毒理观察等中药现代研究中展示出良好的应用前景.
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以鸡内金为例探讨中药选用方法
为探讨临床上中药筛选的思路和方法,精确中药选用标准,试以中药鸡内金为例,通过对其古今应用进行整理、分析,总结出适用的疾病、症状、证型,并建立病、症、证三者同时作为筛选条件的选药模式,筛选条件的增多可使中药临床选用更加准确、合理,对中药的规范使用,对中医从业人员学习掌握中药有着重要的现实意义.
关键词： 中药筛选 病、证、症三联选药法 鸡内金 -
浅谈如何对中药新药进行筛选
目的:探讨中药新药的筛选方法.方法:建立现代中药新药筛选系统,利用OLIGo芯片技术,建立动物模型、基因表达差异谱数据库、高速计算机和处方模拟软件,对整体动物药效学试验验证,达到对中药新药有效性的检测.结果:新药筛选系统可使中药的理论和作用机制明确,使使中药从根本上实现现代化、国际化.结论:新药筛选系统是一个中药研究的有效方法,为中药现代化研究提供了一个全新的思路和方向.
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以丙型肝炎病毒体内感染裸鼠模型筛选20种常用清热解毒类中药
目的:用HCV体内感染裸鼠模型筛选20种常用清热解毒类中药,以寻找有效的抗HCV药物.方法:模型鼠用药3个月,用透射电子显微镜观察裸鼠脾内移植的人胎肝细胞中是否仍有HCV样颗粒,用定量RT-PCR技术检测用药前后血清HCVRNA含量.结果:(1)各中药组,用药3个月在裸鼠脾脏内移植的人胎肝细胞中均可找到HCV样颗粒.(2)仅龙胆草、黄芩、山豆根、栀子、苦参5味中药组,用药3个月后血清HCVRNA含量明显下降,其他中药组,用药3个月前后血清HCVRNA含量无明显下降.结论:该20种中药均无直接清除HCV的作用,但龙胆草、黄芩、山豆根、栀子及苦参5味中药可明显抑制HCVRNA的复制.
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甲型H1N1流感病毒非结构蛋白NS1与人CPSF30结合拮抗剂筛选模型的建立及药物筛选
利用酵母双杂交技术研究甲型H1N1流感病毒非结构蛋白NS1和人切割与多聚腺苷酸化特异因子30kDa亚基(CPSF30)的相互作用,构建了一个酵母模型用于筛选NS1和CPSF30相互作用的拮抗剂,从而为筛选抗甲型H1N1流感病毒药物奠定基础.采用连续重叠PCR技术克隆得到H1N1流感病毒NS1基因.提取人HeLa细胞RNA,通过RT-PCR克隆得到人CPSF30基因.将NS1基因克隆到表达载体pGBKT7中获得诱饵载体pGBKNS1,将CPSF30基因克降到载体pGADT7中获得捕获载体pGADCPSF;将pGBKNS1和pGADCPSF共转入酿酒酵母AH109,获得重组酿酒酵母AH109[pGADCPSF+pGBKNS1].利用该模型筛选了30余种中成药,发现双黄连口服液等4种中成药能抑制NS1和CPSF30之间的相互作用.
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抗结核杆菌有效中药筛选及蛇床子对结核杆菌分子表达影响的研究
结核病作为一种常见的慢性传染病，已经成为人类健康生活中的主要威胁。结核病主要的病原菌就是结合分枝杆菌。根据世界卫生组织的报道，由结核病所导致的病死率已经远远的超过了艾滋病、疟疾等其他传染性疾病的总和。随着对抗结合杆菌的不断研究，研究学者已经从中发现了一些中药及蛇床子对结核杆菌有着良好的效果。本文所要探讨的主旨就是对抗结核杆菌有效中药筛选及蛇床子对结核杆菌分子表达的影响进行研究。
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失眠的中药治疗及研究思路
对万方医学数据库2000年1月-2010年12月中药治疗失眠的文献进行检索分析发现,中药治疗失眠存在用药缺乏一致性,实验设计较少使用随机对照,疗效评价主观性太强等不足.对失眠方药的研究可以从中药筛选、组方研究、动物实验、临床研究几个方面进行,在临床研究的病例选择方面要有规范的诊断标准及纳入、排除标准,疗效判定需多引入相关量表及多导睡眠图等客观评估方法.
关键词： 入睡和睡眠障碍/中医药疗法 中药筛选 组方研究 动物实验 临床研究 -
鸡胚法筛选促血管生成中药的研究
目的:建立中药促进血管生成活性的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验模型,筛选对CAM具有促血管生成作用的治疗冠心病中药.方法:成功建立鸡胚绒毛尿囊膜实验模型后,将丹参、川芎、黄芪、赤芍、当归、红花、党参、瓜蒌、郁金、炙草等十种临床常用治疗冠心病的中药溶液及生理盐水作为被测物分别置于CAM表面的载体上,作用后数码照相记录结果.计算血管生成反应阳性率,从而分析比较不同中药对血管生成的影响.结果:丹参、黄芪促CAM血管生成阳性反应较生理盐水对照组有显著差异(P＜0.05).党参、当归、炙草表现出一定的促CAM血管生成作用,但较对照组无显著差异.结论:丹参、黄芪具有较强的促CAM血管生成作用.
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胰岛细胞损伤体外模型的建立及在药物筛选中的应用
目的:体外建立胰岛细胞损伤模型,并初步应用于保护和修复胰岛细胞中药的筛选.方法:将INS-1胰岛细胞接种于96孔板中,以四氧嘧啶诱导建立体外胰岛细胞损伤模型,MTT法测定不同剂量四氧嘧啶对细胞活力的影响,并应用于研究不同药物对损伤的胰岛细胞的增殖作用.结果:将密度为1×104个/孔的INS -1细胞接种于96孔板,细胞24h贴壁后予以12mmol·L-1四氧嘧啶诱导,可建立稳定的胰岛细胞损伤模型；翻白草、银杏叶能够保护和修复四氧嘧啶损伤的INS -1细胞.结论:以四氧嘧啶诱导胰岛细胞损伤的方法,可建立稳定的体外胰岛细胞损伤模型,并可用于保护修复胰岛细胞药物的筛选.
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鸡胚法筛选具有血管生成抑制作用中药的实验研究
血管生成抑制剂的研究正在引起人们的兴趣,已经成为抗肿瘤研究的一个新的领域.本研究采用鸡胚法对43个抗癌方中出现频率高的12味单味中药进行初筛.在实验中将药物置于孵化3至4d的鸡胚卵黄膜血管上,通过药物是否产生无血管区域来决定药物有否血管生成抑制作用.经过筛选得出:中药莪术、郁金有血管生成抑制作用.
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基于“方证相对”原理抗肝肾纤维化方药筛选平台的构建与应用
目的 构建基于“方证相对”原理的抗肝肾纤维化方药筛选平台,以筛选符合中医原理的相关方药.方法 在中医“方证相对”原理指导下,依托“中医方证研究与新药研发决策服务平台”,设计肝肾纤维化方证筛选的工作程序及技术流程,确立数据采集的原则与方法,建立肝肾纤维化相关方证数据库群,进而构建抗肝肾纤维化中医方药筛选工作平台.结果 筛选出与肝纤维化相关的主治方剂20首,单味药(或药对)30种；与肾纤维化相关的主治方剂20首,单味药(或药对)20种.结论 基于“方证相对”原理抗肝肾纤维化方药筛选平台可为有关抗肝纤维化、抗肾纤维化研究筛选有效方剂,对中医文献的深度发掘和利用以及中药新药研发有实际应用价值.
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中西医结合治疗重症急性胰腺炎病死率的Meta分析及中药筛选
根据循证医学的方法,全面收集中西医结合治疗重症急性胰腺炎(SAP)的临床试验.在严格质量评价的基础上,根据纳入标准,摘录30篇文献,利用RevMan 4.2软件对中西医结合治疗SAP的临床研究进行系统评价和Meta分析.分析表明,中西医结合治疗SAP与单纯西医治疗比较具有一定优势,能明显降低SAP患者病死率;大黄、芒硝、黄芩、柴胡、木香、延胡索、厚朴、赤(白)芍、枳壳(实)、胡黄连是治疗SAP的主要药物.
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体外胰岛素抵抗细胞模型的建立及在药物筛选中的应用
目的 在体外建立肝胰岛素抵抗细胞模型和脂肪细胞胰岛素抵抗模型,并初步应用于中药有效成分的胰岛素抵抗活性筛选中.方法 采用高胰岛素诱发HepG2细胞建立肝胰岛素抵抗模型,地塞米松诱发3T3-L1脂肪细胞建立脂肪细胞胰岛素抵抗模型,研究不同药物对胰岛素抵抗模型细胞葡萄糖消耗的影响.结果 将HepG2细胞置于10-6 mol·L-1的胰岛素中36 h,HepG2细胞对胰岛素的抵抗作用为明显,该特性可维持48 h,但未发现细胞形态学变化;地塞米松作用3T3-L1脂肪细胞后,96 h空白组与模型组葡萄糖消耗量差值大,此时为胰岛素抵抗的高状态;脂肪细胞胰岛素抵抗模型成立后,撤掉地塞米松,胰岛素抵抗细胞模型能够在24 h内稳定.某些中药提取成分(如水苏糖、小檗碱和人参皂苷等)能促进HepG2胰岛素抵抗模型和3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗.结论 高胰岛素诱导培养法可以复制出稳定可靠的肝胰岛素抵抗细胞模型;地塞米松诱导3T3-L1脂肪细胞也可建立稳定的脂肪细胞胰岛素抵抗模型.
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对血管内皮细胞有保护作用的中药筛选
血管内皮细胞不再被认为仅是血液和血管平滑肌的屏障,而是一个高度活跃的代谢库,它能合成多种血管活性物质,对血管舒缩功能与血液流变性有不可替代的调节作用.同时对细胞生成、炎症、免疫等功能的影响都具有重要生理意义.多种因素损伤血管内皮细胞都可诱发动脉粥样硬化的形成和发展.筛选对内皮细胞保护作用的药物,对防治动脉粥样硬化具有积极意义.从上世纪80年代末开始,我国学者就某些中药对血管内皮细胞损伤的保护作用进行了研究,现综述如下.
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细胞模型在中药研究中的应用
随着中药现代化进程日趋加快,细胞模型开始广泛应用于中药的各项研究.综述细胞模型在中药研究中的应用,包括其用于研究中药的筛选与毒性评价、吸收转运机制、药理学及药效学评价等方面.对细胞模型用于中药研究的前景进行了阐述与分析.
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基于转基因秀丽隐杆线虫模型的抗阿尔茨海默病中药成分筛选思路
转基因秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)是近20年发展起来的优良衰老模型,被应用于包括阿尔茨海默病在内的神经退行性病变的药物筛选与基因组学研究.秀丽隐杆线虫模型具有操作简单、 筛选周期短、 能提供多个靶点等特点,分析了利用其进行抗阿尔茨海默病中药成分筛选的可行性与优势,以期为药学工作者提供新思路.
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杀灭人体蠕形螨的中药筛选
目的:从中药中筛选杀灭人体蠕形螨的有效药物.方法:选用百部、丁香等11种具有杀虫灭菌作用的中药煎剂,以3种不同浓度进行体外杀螨实验,并以已知有效杀螨药物甲硝唑作对比.结果:浓度为100%的百部、丁香和花椒组蠕形螨全部死亡的时间分别是5h,7h,9h,而其他中药组均在11h以上;甲硝唑对照组为9h.结论:浓度为100%的百部、丁香和花椒煎剂都具有较好的杀螨作用;百部的杀螨效果优于2%甲硝唑水剂.
