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Stathmin与间隙连接蛋白26相互作用并在小鼠耳蜗表达
目的 筛选和鉴定连接蛋白26(connexin 26,CX26)的相互作用蛋白质,分析其在小鼠内耳的表达,探讨与听觉的关系.方法 酵母双杂交技术筛选CX26的相互作用蛋白质.在体外真核细胞表达系统HEK293细胞内过表达人CX26和相互作用蛋白质,观察它们的定位,并用免疫共沉淀实验观察在体外真核细胞中是否存在相互作用.进一步在小鼠脑组织中用免疫共沉淀方法验证CX26和相互作用蛋白质在真核生物体内的相互作用.逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分析相互作用蛋白质在小鼠耳蜗的表达.结果 酵母双杂交实验筛选和鉴定到stathmin与CX26相互作用,两者在体外过表达系统HEK293真核细胞中有共定位,免疫共沉淀实验证实在体外真核细胞和真核生物体内存在相互作用,而且stathmin在小鼠耳蜗表达.结论 stathmin与CX26相互作用,并且在小鼠耳蜗表达.
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Cx26在甲状腺乳头状癌中的异常表达及其临床意义
目的:探讨Cx26在甲状腺乳头状癌(PTC)中的异常表达与病理分期、淋巴结转移等临床病理学参数的关系.方法:采用免疫组织化学方法对116例PTC组织、33例癌旁组织的新鲜标本进行石蜡包埋,切片染色,检测Cx26的表达,并分析其在PTC中的表达与临床病理学参数的关系.结果:Cx26在PTC组织中的表达均显著高于癌旁组织(P<0.05),其表达与肿瘤大小、临床分期、病理分级、淋巴结转移等因素相关(P<0.05).结论:Cx26的表达可有效地预测PTC的发生、早期转移以及预后.
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过表达间隙连接蛋白CX26Y155X突变体增加细胞对内质网应激的敏感性
目的 体外实验探讨间隙连接蛋白神经性耳聋相关突变CX26 Y155X突变体导致耳聋可能的致病机制.方法 HEK293细胞中过表达CX26 Y155X突变体质粒后,免疫印迹检测CX26的表达,流式细胞术检测细胞内活性氧物质的改变和内质网应激诱导剂诱导凋亡改变情况.结果 过表达CX26 Y155X突变体能增加细胞内ROS的水平,同时能增加内质网应激诱导剂对细胞的促凋亡作用.结论 CX26 Y155X突变体可能由于异常聚集于内质网,从而导致内质网应激,产生过多的ROS,增加细胞对内质网应激的敏感性,从而诱导细胞凋亡.
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遗传性耳聋基因Cx26的研究现状及临床应用
现就非综合征性遗传性耳聋基因Cx26的研究现状及临床应用进行综述,分析了Cx26基因型与临床表型,简述了临床应用的进展.
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RA对宫颈癌Hela细胞增殖的影响
目的 研究RA对宫颈癌Hela细胞中Cx26和Cx43表达的影响,探讨RA对Hela细胞增殖的影响及其机制.方法 培养Hela细胞,用计数法和MTT比色法观察并比较不同浓度RA对细胞增殖的影响情况,用免疫细胞化学方法检测Hela细胞中Cx26和Cx43蛋白的表达.结果 ①RA抑制Hela细胞增殖,抑制率与RA浓度相关.②Cx26和Cx43蛋白定位于Hela细胞的胞膜和胞质,RA组Cx26和Cx43蛋白的表达明显高于对照组(P＜0.05).结论 RA可抑制Hela细胞增殖,其机制可能与Cx26和Cx43的表达上调有关.
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间隙连接蛋白CX26和CX43在食管鳞癌组织中的表达及意义
目的 探讨间隙连接蛋白CX26和CX43在食管磷癌组织中的表达情况及意义.方法 应用免疫组化S-P法检测食管鳞癌及相对应的正常食管黏膜组织42例、癌旁不典型增生组织17例中CX26和CX43蛋白水平表达.结果 食管鳞癌组织中CX26、CX43阳性率分别为40.5％(17/42)和31.0％ (13/42),均明显低于正常食管黏膜组织及癌旁不典型增生组织(P＜0.05).CX26、CX43蛋白水平表达与食管鳞癌的组织学分级、浸润深度以及淋巴结转移有关(P＜0.05).结论 CX26、CX43在食管鳞癌的发生、发展过程中存在表达缺失或减少,CX26、CX43异常表达与食管鳞癌的恶性程度有关.
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皮肤瘢痕和瘢痕鳞状细胞癌中Cx26基因表达及突变的意义
目的 探讨Cx26基因表达及突变在皮肤瘢痕及瘢痕鳞状细胞癌(以下简称瘢痕鳞癌)中的意义.方法 采用免疫组织化学SP法及原位杂交技术检测15例皮肤瘢痕和22例瘢痕鳞癌中Cx26蛋白及mRNA的表达.分别从14例皮肤瘢痕和瘢痕鳞癌石蜡包埋组织中提取DNA,运用PCR扩增及测序的方法进行突变筛查.利用计算机图像分析系统采集、分析图像,并对数据进行统计学处理.结果 (1) Cx26蛋白、Cx26mRNA在正常皮肤表皮中阳性,在皮肤瘢痕上皮呈强阳性表达,在瘢痕鳞癌组织中呈弱阳性或阴性表达.正常皮肤组、皮肤瘢痕组及瘢痕鳞癌组两两比较,其表达(阳性面积和平均吸光度)差异均有统计学意义(P＜0.05).(2)测序后未发现瘢痕鳞癌中有Cx26基因突变.结论 Cx26蛋白及其mRNA的高表达,对瘢痕上皮增生具有促进作用；其表达下降与瘢痕鳞癌的发生有关；基因突变位点有待进一步探讨.
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抑癌基因CX26在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义
目的:观察抑癌基因CX26的mRNA和蛋白质在喉鳞状细胞癌中的表达情况,探讨CX26基因与喉鳞状细胞癌生物学行为的关系,及其与喉鳞状细胞癌发生和发展的分子机制.方法:38例喉鳞状细胞癌患者,每例患者均同时在喉癌切除手术时从喉癌肿瘤组织中心部位取癌组织(喉癌组),在肿瘤边缘外1.0 cm部位取喉癌旁组织(对照组),分别采用半定量RT-PCR检测CX26 mRNA的表达水平,冷冻切片免疫组织化学方法检测CX26蛋白的表达情况.结果:RT-PCR结果显示,CX26 mRNA在喉癌组和对照组中均呈阳性表达;经半定量分析,CX26 mRNA在喉癌组中的表达较对照组明显降低(P＜0.05);免疫组织化学发现,CX26蛋白在18例(47.4%)患者的喉癌组织呈阳性表达,在34例(89.5%)患者的喉癌旁组织呈强阳性表达,CX26蛋白在两者中的阳性表达差异有统计学意义(P＜0.05),并且伴有细胞内定位的改变;同时发现,CX26蛋白阳性表达率和CX26基因mRNA的表达水平在Ⅲ期和Ⅳ期喉癌组明显低于Ⅰ期和Ⅱ期(P＜0.05),有颈淋巴结转移者明显低于无转移者(P＜0.05),并且其表达水平随病理分化程度的降低而降低(P＜0.05).结论:CX26与喉癌的发生和发展关系密切,并可能与喉癌的预后有关.
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皮肤瘢痕上皮及瘢痕癌癌巢中Cx26Cx26mRNA的表达及意义
目的 探讨连接蛋白26在皮肤瘢痕上皮及瘢痕癌癌巢中的表达及其意义.方法 对15例皮肤瘢痕和22例瘢痕癌,用免疫组织化学方法(SP法)检测Cx26蛋白,用原位杂交技术检测Cx26 mRNA.利用计算机图像分析系统采集、分析图像,并对数据进行统计学处理.结果 Cx26蛋白、Cx26 mRNA在正常皮肤表皮的表达呈阳性,在病理性皮肤瘢痕上皮呈强阳性表达,在瘢痕癌癌巢中呈弱阳性或阴性表达.正常皮肤组、皮肤瘢痕组及瘢痕癌组两两比较,其表达(阳性面积和平均光密度)差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 ①Cx26蛋白及Cx26 mRNA的高表达,对皮肤瘢痕上皮增生具有促进作用；②Cx26蛋白及Cx26 mRNA的低表达,与皮肤瘢痕癌的发生相关.
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Cx26在胃粘膜细胞不同病变中的表达及意义
目的 探讨间隙连接蛋白26(Cx26)在胃粘膜细胞不同病变时期表达、变化特点及可能机制,以及Cx26蛋白在胃癌诊断、治疗及预后评估中的临床意义.方法 应用免疫组化法检测Cx26蛋白在169例胃粘膜细胞(35例),轻中度(22例)和重度不典型增生细胞(30例),以及不同类型胃癌细胞(82例)间的表达情况,并将观察结果按照Shimi-zu标准评分法来进行评价和统计学分析.结果 Cx26蛋白随着胃粘膜细胞向胃癌进展,其阳性表达水平逐渐升高.正常胃粘膜组织及不典型增生组,Cx26蛋白阳性表达程度均远远低于胃癌组织中的阳性表达水准(P＜0.05),而在分化相对较好的肠型胃癌中,Cx26蛋白的阳性表达明显高于弥漫型胃癌(P＜0.05).结论 Cx26蛋白可抑制胃癌的进展及侵犯转移,可能与其调控细胞通讯,进而促进细胞分化有关.
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维甲酸提高膀胱癌细胞缝隙连接蛋白Cx26的表达
目的:体外观察全反式维甲酸(ATRA)对人源膀胱移行细胞癌BIU-87细胞的缝隙连接蛋白Cx26表达的影响.方法:分别用终浓度为0 μmol/L、1 μmol/L和10 μmol/L的ATRA作用72 h后免疫细胞化学法和半定量RT-PCR观察连接蛋白Cx26的表达情况及mRNA水平.结果:对照组细胞Cx26表达为阴性,mRNA水平低,几乎不表达,经过维甲酸刺激后表达显著增高,mRNA水平也显著提高.结论: ATRA可以促进Cx26基因转录,提高mRNA水平,增加Cx26连接蛋白的表达.
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牛磺酸对环磷酰胺致神经管畸形的保护作用研究
目的 研究环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)引起小鼠神经管畸形(neural tube defects,NTDs)的动物模型,探讨牛磺酸的保护作用及其作用机理,为预防NTDs的发生提供理论依据.方法 建立CP致小鼠NTDs模型,分析比较各组鼠胚神经管发育情况和畸形情况;用免疫组织化学和图像分析技术检测各组鼠胚神经管上皮细胞中Cx26和Cx43蛋白的表达,分析其与NTDs发生的关系.结果 1)用CP建立小鼠NTDs模型的佳剂量为15 mg/kg体重,牛磺酸能有效减少NTDs的发生;2)Cx26和Cx43蛋白定位于神经细胞的胞膜和胞质,CP组Cx26和Cx43蛋白的表达明显高于对照组(P＜0.05);中、高剂量牛磺酸组Cx26和Cx43蛋白的表达显著降低(P＜0.05).结论 Cx26和Cx43的过度表达可能是CP致NTDs的途径之一;牛磺酸可能拮抗CP的毒性,保护神经细胞,减少NTDs的发生.
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间隙连接蛋白Cx43和Cx26在膀胱肿瘤组织中的表达变化及意义
目的 研究膀胱肿瘤组织中间隙连接蛋白Cx26及Cx43表达情况的变化及其意义.方法 对承德医学院附属医院泌尿外科2014年8月～2016年10月治疗的35例膀胱癌患者的肿瘤组织细胞中Cx43和Cx26的表达情况进行分析,并与35例非肿瘤患者膀胱上皮组织中Cx43和Cx26的表达情况进行对比,分析Cx43和Cx26表达的变化与膀胱癌之间的联系及其意义.结果 Cx26和Cx43在膀胱肿瘤组织中的表达较非肿瘤患者膀胱上皮组织低,差异显明,具有统计学意义(P<0.05);Cx26级Cx43的阳性表达率与膀胱癌的病理分级呈现负相关性.结论 Cx26及Cx43表达异常与膀胱肿瘤病变有相关性,且其表达会随着病理分级的增高而降低,有望通过改善Cx26及Cx43的转录与表达实现对膀胱肿瘤的逆转治疗,有进一步研究价值.
