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应用比较蛋白质组学技术筛选肾透明细胞癌细胞差异表达蛋白的初步研究
目的 探讨人肾透明细胞癌细胞株RLC-310和人正常肾近曲小管上皮细胞株HK-2蛋白表达的差异,寻找新的肾癌差异表达蛋白.方法 体外培养RLC-310和HK-2细胞,采用ProteomeLab PF 2D蛋白分离系统分离细胞总蛋白,采用毛细管反相色谱-电喷雾-线性离子阱串联质谱( Capillary LC-ESI-MS/MS)分析和鉴定差异蛋白组分.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法对代表性差异表达蛋白进行mRNA和蛋白质表达水平的验证.结果 RLC-310和HK-2细胞株共鉴定出196个差异蛋白,涉及肾透明细胞癌细胞增殖和抗凋亡、能量代谢、线粒体还原氧化、氧化应激和耐药、细胞信号传导、侵袭和黏附、细胞骨架和运动、肿瘤血管形成等.RT-PCR和Western blot检测显示,Septin-9 mRNA和蛋白在RLC-310细胞中高表达,Septin-9 mRNA在HK-2细胞中不表达,Septin-9蛋白在RLC-310细胞中的表达水平明显高于HK-2细胞(P＜0.05).结论 肾透明细胞癌和正常肾细胞在蛋白质组的表达存在显著差异,鉴定出的差异表达蛋白涉及肾透明细胞癌发生、发展的各方面,并有助于深入研究和阐明肾透明细胞癌发生、发展的分子机制.Septin-9作为重要的差异表达蛋白,在肾透明细胞癌肿瘤血管形成中的作用f值得深入研究.
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细胞减灭术联合腹腔灌注热化疗对卵巢癌患者免疫功能及血浆clusterin、septin-9蛋白表达的影响
目的 探讨细胞减灭术(CRS)联合腹腔灌注热化疗对卵巢癌患者免疫功能及血浆clusterin、septin-9表达的影响,并分析产生该效果可能的机制.方法 选取2013年1月-2016年10月丹阳市人民医院收治的106例晚期卵巢癌患者为研究对象,依据随机数字表法分为观察组和对照组,每组各53例.两组患者均在检查无手术禁忌证情况下行CRS,观察组在术后行腹腔热灌注化疗.两组患者分别于术前及术后30 d抽取静脉血,行免疫功能(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)及血浆cltus-terin、septin-9水平测定,并在术后30 d对所有患者的疗效进行评价,统计并发症的发生情况.结果 观察组治疗总有效率显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).两组患者术后30 d CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平显著升高,CD8+水平显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);且观察组变化更为显著,差异有统计学意义(P＜0.05).两组患者术后30 d血浆clusterin、sep-tin-9表达水平显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);且观察组降低更为明显,差异有统计学意义(P＜0.05).观察组总并发症发生率高于对照组,但两组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CRS联合腹腔热灌注化疗治疗卵巢癌效果良好,安全性高,有助于提高患者免疫功能,降低血浆clusterin、septin-9表达,抑制肿瘤增殖和转移.
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外周血甲基化Septin-9检测对结直肠癌诊断价值的Meta分析
目的:Meta系统性评价Septin-9在结直肠癌中的诊断价值.方法:检索PubMed、生物医学外文全文服务系统、Ovid、中国学术期刊全文数据库、中国生物医学文献数据库、维普中文科技期刊数据库、万方数据库,日期截止至2017年1月.严格按照纳入和排除标准筛选文献,并依据QUADAS标准对文献进行质量评估.使用双变量Meta模型合并检验效能分析,通过Q检验、I2检验检测研究异质性,通过亚组分析、敏感性分析探讨异质性来源,通过Deek's漏斗图评估发表偏移.结果:共纳入11篇文献;Septin-9诊断结直肠癌的合并敏感度为0.70(95%CI:0.67~0.72),合并特异度为0.91(95%CI:0.90~0.92),诊断比值比为28.76(95%CI:17.70~46.75),SROC的曲线下面积(AUC)为0.9221.异质性检验提示不存在阈值效应,但存在其他因素引起的异质性.通过敏感性分析发现纳入文献中有一个离群值.亚组分析结果显示,根据1/3判为阳性和2/3判为阳性分组:AUC为0.9397比0.8265.根据亚洲人种和欧美人种分组:AUC为0.9368比0.9210.Deek's漏斗图评估纳入文献不存在发表偏倚.结论:外周血甲基化Septin-9诊断结直肠癌的整体准确性较高,可作为一项很好的指标用于结直肠癌诊断.
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子宫内膜癌组织Septin-9表达变化及其意义
目的 探讨子宫内膜癌组织Septin-9 mRNA表达变化及其临床意义.方法 选择子宫内膜癌患者120例(子宫内膜癌组)、子宫内膜不典型增生患者63例(不典型增生组)、子宫肌瘤患者70例(子宫肌瘤组),分别取手术切除的子宫内膜癌组织、子宫内膜不典型增生组织、正常子宫内膜组织,采用qRT-PCR法检测各子宫内膜组织Septin-9 mRNA表达.同时分析子宫内膜癌组织Septin-9 mRNA表达与患者临床病理参数及预后的关系.结果 子宫内膜癌组、不典型增生组、子宫肌瘤组Septin-9 mRNA相对表达量分别为1.98 ±0.51、1.64±0.23、1.00±0.00,组间两两比较P均＜0.05.子宫内膜癌组Septin-9 mRNA表达与淋巴结转移、肌层浸润和FIGO分期有关(P均＜0.05),与患者年龄、绝经状态、病理类型及病理分级无关(P均＞0.05).以子宫内膜癌组Septin-9 mRNA相对表达量的下四分位数为界值,将子宫内膜癌患者分为Septin-9 mRNA低表达者和Septin-9 mRNA高表达者.Septin-9 mRNA高表达者术后5年生存率及总生存时间均低于Septin-9 mRNA低表达者(P均＜0.05).结论 子宫内膜癌组织Septin-9 mRNA表达升高,其表达变化可能有助于子宫内膜癌诊断、病情评估及预后预测.
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Septin-9在人肾细胞癌组织的表达及临床意义
目的 观察Septin-9在人肾细胞癌(RCC)组织中蛋白和基因的表达,探讨Septin-9在RCC肿瘤微血管形成中的作用.方法 分析我院60例手术切除的RCC患者的临床病理资料,以Western blot法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)定量分析Septin-9的蛋白和mRNA的表达,行CD105标志RCC的微血管密度(MVD),研究Septin-9在RCC中的表达及与MVD的相关性.结果 (1) RCC组织与癌旁组织均有Septin-9基因和蛋白表达,在不同病理级别的RCC组织中Septin-9基因表达量为1.258±0.372、1.339±0.408、1.502±0.476和1.689 ±0.511,蛋白表达量为1.325 ±0.315、1.597±0.376、1.634±0.513和1.805±0.572,高于癌旁组织和正常组织(P＜0.05);随着RCC病理级别的增加,基因及蛋白的表达增强;(2)RCC组织中CD105阳性表达率为76.67％(46/60),癌旁组织阳性表达率为13.33％ (2/15),差异有统计学意义(P＜0.05);癌旁组织中MVD值为12.38±2.05,在不同病理级别的RCC组织中MVD值分别为21.59±4.39、29.84±7.43、38.61 ±6.27、52.18 ±6.22,MVD值随肿瘤级别的增加而增加.结论 Septin-9的表达同RCC的病理分期密切相关,可能通过干预肿瘤微血管形成参与RCC的临床进展.
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外周血中clusterin和septin-9及CA125在卵巢癌患者中的表达及其意义
目的 探讨卵巢癌患者外周血中clusterin和septin-9及CA125的表达水平及其临床意义.方法 选择明确诊断为卵巢癌的患者62例为观察组,另选取健康体检者31例为对照组.分别抽取两组患者外周血,采用qRT-PCR方法检测两组患者clusterin和septin-9 mRNA表达水平;采用ELISA法检测两组患者clusterin和sep-tin-9蛋白表达水平;采用化学发光法检测两组患者糖类抗原-125(CA125)水平.比较观察组患者中不同病理分期、是否转移及不同分化程度患者间clusterin和septin-9及CA125等指标表达差异.结果 与对照组相比,观察组患者外周血中clusterin和septin-9 Mrna/蛋白表达量均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,观察组患者外周血中CA125表达量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌患者与Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者相比,clusterin基因/蛋白及CA125水平显著降低(P<0.05);与发生远处转移(包括淋巴结转移)者比较,未发生远处转移(包括淋巴结转移)者其septin-9基因/蛋白表达水平显著降低(P<0.05);不同分化程度患者间clusterin、septin-9及CA125表达水平均未见明显差异.结论 卵巢癌患者外周血中clusterin、septin-9及CA125水平较正常人群均显著升高,其中clusterin和CA125表达增高者可能提示病理分期较高,septin-9表达增高考虑存在原发病的远处转移可能.
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Septin-9在子宫内膜癌组织中的表达及意义
目的 探讨Septin-9在子宫内膜癌组织中表达及及意义.方法 选取子宫内膜癌患者63例、子宫内膜不典型增生患者30例和正常子宫内膜组织42例作为对照组,利用实时荧光定量PCR技术检测不同组织中Septin-9基因表达,所有子宫内膜癌患者术后均获得随访,随访截止日期2015年4月30日,以子宫内膜癌组织中Septin-9 mRNA表达量的中位数为界值,将患者分为高表达组和低表达组,利用Kaplan-Meier生存分析法分析不同Septin-9表达水平对子宫内膜癌患者术后生存时间的影响.结果 子宫内膜癌组织中Septin-9 mRNA表达量高于子宫内膜不典型增生组织和对照组,且子宫内膜不典型增生组织高于对照组,差异均有统计学意义(F=29.673,P<0.05);子宫内膜癌组织中Septin-9 mRNA表达量与组织学分级、FIGO分期和淋巴结转移有关(t值分别为17.921、5.211和6.042,P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,低表达组患者术后平均生存时间77.4个月,高表达组患者术后平均生存时间59.0个月,Log Rank检验显示两组患者术后生存时间差异有统计学意义(χ2=5.238,P=0.022).结论 Septin-9在子宫内膜癌组织中呈高表达,可能在子宫内膜癌发生、进展过程中发挥重要作用,且与患者预后密切相关.
