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Ad-TIMP-3转染增加宫颈癌细胞对顺铂的敏感性
目的 研究携带TIMP-3基因的重组腺病毒(Ad-TIMP-3)转染宫颈癌细胞后对顺铂(cDDP)敏感性的影响,探讨Ad-TIMP-3基因与cDDP联合在宫颈癌治疗中的作用.方法 Ad-TIMP-3体外感染宫颈癌细胞系后,观察细胞凋亡效应、细胞周期及细胞内p53蛋白表达情况.Ad-TIMP-3与cDDP联合应用后,检测细胞克隆形成率;MTT法检测杀伤率及评价协同效应;裸鼠致瘤实验观察瘤体生长曲线.结果 Ad-TIMP-3转染可促进细胞凋亡,引起细胞G2/M期阻滞,并诱导宫颈癌细胞内p53蛋白表达.Ad-TIMP-3与cDDP联合应用后,细胞克隆形成率明显减少,杀伤率成倍提高,肿瘤生长显著抑制.结论 Ad-TIMP-3可增加宫颈癌对cDDP化疗的敏感性,二者联合应用在宫颈癌治疗中有潜在的应用价值.
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TIMP-3基因转染血管平滑肌细胞移植对大鼠急性心肌梗死后心功能的影响
目的 研究基质金属蛋白酶组织抑制因子3 ( tissue inhibitor-3 of matrix metalloproteinases,TIMP-3) 基因转染血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs) 移植, 对急性心肌梗死(acute myocardial infarction, AMI) 后早期心脏功能变化的影响, 并探讨其可能的机制.方法 取Wistar大鼠胸主动脉,采用组织块贴壁法培养VSMCs.采用左冠状动脉远端结扎的AMI动物模型,随机分3组.于冠状动脉结扎后立即向缺血部心室壁内注射含有1×106 个TIMP-3基因转染的VSMCs (A组)、1×106 个VSMCs(B组)或不含细胞的DMEM液(C组),各0.5ml.术后3天, 进行心脏功能学检测观察大鼠心脏功能变化,免疫组化染色验证TIMP-3 基因转染VSMCs在缺血心肌中的存活情况,RT-PCR法测定缺血心肌TIMP-3和基质金属蛋白酶9 (matrix metalloproteinase 9,MMP-9) mRNA含量.结果 分离、培养的VSMCs纯度达98% ,TIMP-3基因成功转入VSMCs 中.术后3天,A组的LVIDd、LVIDs、EDV和ESV值较正常鼠升高(P<0.05),但小于B(P<0.01)组和C组(P<0.01).A组的FS和EF值较正常组有所下降(P<0.01),但大于B和C组(P<0.01).免疫组化染色见TIMP-3基因转染VSMCs被成功种植缺血心肌并在其中存活.RT-PCR结果显示:各移植组TIMP-3 mRNA含量均较对照组显著升高(P<0.01),A组较B组、C组明显增高(P<0.01);A组MMP-9 mRNA含量较B组、C组明显降低(P<0.01).结论 将TIMP-3基因转染的VSMCs 移植入心肌缺血区可明显抑制MMP-9的表达,进而抑制AMI后早期心肌重塑,改善心功能.
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TIMP-3基因转染血管平滑肌细胞移植对大鼠急性心肌梗死后心脏结构的影响
A含量较B组、C组明显降低(P<0.01),B组较C组降低(P<0.01).结论 将TIMP-3基因转染的VSMCs移植入心肌缺血区可明显抑制MMP-9的表达,进而抑制AMI后早期心肌重塑,改善心功能.
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肾癌组织中APC、CXR32、TIMP-3基因启动子的甲基化研究
肾癌是泌尿系统常见的肿瘤之一,除手术治疗外,放疗、化疗及激素治疗均不敏感,生物靶向治疗有一定的作用.本研究旨在探计肾肿瘤组织中APC基因、CXR32基因、TIMP-3或因启动子的甲基化状况,观察其在肾脏肿廇 发生中的可能作用.
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基质金属蛋白酶组织抑制因子-3基因转染血管平滑肌细胞移植对大鼠心肌梗死的治疗作用
目的 观察基质金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP-3)基因转染血管平滑肌细胞(VSMCs)移植,对大鼠心肌梗死(AMI)的治疗效果,并探讨其可能的机制.方法 取Wistar大鼠胸主动脉,采用组织块法培养VSMCs.左冠状动脉远端结扎方法复制AMI模型.随机分三组:冠状动脉结扎后3d向缺血心室壁内分别注射含有1×106个TIMP-3基因转染的VSMCs(TIMP-3组)、1×106个VSMCs(VSMC组)、不含细胞的DMEM液(DMEM组)各0.5mL.术后第4周,观察大鼠心脏功能变化,免疫组化染色检测TIMP-3和基质金属蛋白酶2(MMP-2)的表达,RT-PCR法检测缺血心肌组织中TIMP-3和MMP-2 mRNA含量.结果 TIMP-3基因成功转入VSMCs中.术后4周,TIMP-3组的LVIDd、LVIDs、EDV和ESV值较正常鼠升高(P＜0.05),但小于VSMC(P ＜0.01)组和DMEM组(P＜0.01).RT-PCR结果显示:各移植组TIMP-3 mRNA含量均较对照组显著升高(P＜0.01),TIMP-3组较VSMC组、DMEM组明显增高(P＜0.01)；TIMP-3组MMP-2 mRNA含量较VSMC组、DMEM组明显降低(P＜0.01).结论 将TIMP-3基因转染的VSMCs移植入心肌缺血区可明显抑制MMP-2的表达,进而抑制AMI后早期心肌重塑,改善心功能.
