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磷酸化Girdin蛋白在乳腺癌中的表达及意义
目的 探讨乳腺癌组织中磷酸化Girdin蛋白的表达与乳腺癌临床病理特征和分子分型的关系.方法 应用免疫组化SP法检测27例乳腺小叶增生、61例乳腺导管原位癌和94例乳腺非特殊型浸润性导管癌组织中磷酸化Girdin蛋白的表达情况.结果 磷酸化Girdin蛋白定位于细胞浆和(或)细胞核.磷酸化Girdin蛋白在乳腺小叶增生、乳腺导管原位癌和乳腺非特殊型浸润性导管癌中的阳性表达率分别为25.9％( 7/27)、39.3％ (24/61)和66.0％( 62/94),差异有统计学意义(x2=26.724,P＜0.001).磷酸化Girdin蛋白的表达与乳腺非特殊型浸润性导管癌的病理学分期(r =0.204,P=0.049)、淋巴结转移(r=0.212,P=0.041)以及人表皮生长因子受体2(HER-2)的状态(r=0.248,P=0.016)呈正相关,而与组织学分级(r=-0.015,P=0.918)、患者年龄(r=-0.011,P=0.918)、肿瘤大小(r=0.075,P=0.471)、ER状态(r=0.071,P=0.498)、PR状态(r=-0.050,P=0.634)无关.磷酸化Girdin蛋白在管腔A型、管腔B型、HER-2(+)型和三阴性乳腺非特殊型浸润性导管癌中的阳性表达率分别为55.8％、95.8％、66.7％和41.7％,差异有统计学意义(x2=14.017,P=0.003).结论 磷酸化Girdin蛋白的表达与乳腺癌的恶性进展密切相关,其有可能成为乳腺癌临床治疗的新靶点.
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Girdin基因在肝癌细胞表达及抑制其表达的生物学特性
目的 观察Girdin基因在肝癌细胞表达及抑制其表达对癌细胞增殖、凋亡的影响.方法 Western blot检测人正常肝细胞HL-7702及肝癌Huh7、HepG2、MHCC97H、HCCLM3细胞Girdin的蛋白表达;Girdin的小干扰RNA(siRNA)通过LipofectamineTM2000转染HCCLM3细胞,并设置阴性对照组和空白对照组,收集转染48 h的细胞,Westemblot检测Girdin、细胞核增殖抗原(Ki-67)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)家族含Caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)家族促凋亡基因bcl-2相关X蛋白(bax)及酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)通路磷酸化的酪氨酸激酶2(p-JAK2)、磷酸化的信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)的蛋白表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测转染的24、48、72 h各组细胞的活力;流式细胞术检测转染48 h的细胞凋亡率.结果 Girdin在HepG2(0.355±0.043)、HCCLM3 (0.599±0.068)、MHCC97H (0.462±0.055)、Huh7 (0.378±0.049)肝癌细胞中的表达均显著高于在正常肝细胞HL-7702(0.112±0.013)的表达(PHepG2 =0.001;PHCCLM3=0.000;PMHCC97H=0.000;PHuh7=0.001);Girdin-siRNA组在24 h(0.247±0.032)、48 h (0.477±0.043)和72 h (0.666±0.073)的细胞活力均显著低于空白对照组(0.385±0.045)、(0.711±0.068)、(0.936±0.096),在48 h的细胞凋亡率(16.18±1.38)％显著高于空白对照组(1.87±0.39)％,Ki-67(0.162±0.019)、p-JAK2(0.096±0.011)、p-STAT3(0.057±0.009)蛋白表达显著低于空白对照组(0.626±0.073)、(0.170±0.021)、(0.145 ±0.018),Caspase-3(0.257±0.032)和bax(0.279±0.032)的蛋白表达显著高于空白对照组(0.120±0.013、0.135±0.015)(PKi-67 =0.000;Pp-JAK2=0.006;Pp-STAT3=0.002;PCaspase-3 =0.002;Pbbax=0.002).结论 Girdin基因在肝癌细胞高表达,通过RNA干扰抑制其表达通过下调JAK2/STAT3信号降低癌细胞的增殖及诱导细胞凋亡.
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消化系统肿瘤中Girdin基因的表达分析
目的 探讨Girdin基因在消化系统肿瘤(食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌、结肠癌及直肠癌)的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学Envision二步法,检测Girdin蛋白在62对消化系统肿瘤的组织芯片中的表达情况.结果 Girdin在食管鳞癌、胃腺癌、胰腺管状腺癌、结肠腺癌以及直肠管状臃癌内均有高表达,其癌旁组织内为阴性表达.但是在肝脏系统疾病中,肝细胞肝癌内Girdin强阳性表达,癌旁组织(慢性肝炎、脂肪肝以及慢性肝炎伴脂肪肝)内均有不同程度的阳性表达.结论 Girdin基因在消化系统各肿瘤中均有高表达,提示其可能参与肿瘤的进展与转移,这也为判定肿瘤预后以及有无转移提供了新的生物学标记物.
