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OCT-4在宫颈癌内表达情况及沉默表达后对宫颈癌Siha细胞放射敏感性影响
目的 研究OCT-4在宫颈癌组织中表达情况及沉默表达后对人鳞状宫颈癌Siha细胞放射敏感性的影响和机制.方法 利用RT-PCR和蛋白印迹法检测20例宫颈癌患者癌组织中OCT-4基因mRNA和蛋白表达水平.OCT-4-SiRNA转染构建OCT-4沉默表达Siha细胞系并进行检测(OCT-4 SiRNA组),并设置未转染对照组和NC转染对照组.MTT和克隆实验检测各组细胞增殖情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡和细胞周期情况,蛋白印迹法检测各组细胞中cleaved-caspase-3和p-Akt水平.多组间比较行单因素方差分析,两组间比较行成组t检验.结果 随着宫颈癌患者放疗敏感性降低OCT-4基因mRNA(P=0.011、0.009、0.003、0.001)和蛋白表达水平(P=0.008、0.005、0.002、0.001)逐渐升高.与未转染对照组和NC转染对照组相比,OCT-4-SiRNA沉默表达组Siha细胞经不同剂量X射线照射后的细胞增殖抑制率上升(P=0.009、0.003、0.001、0.001);克隆形成能力显著降低(P=0.008、0.005、0.001、0.001),细胞凋亡上升并阻滞细胞在G1期,细胞中cleaved-caspase-3水平上升而p-Akt水平下降.结论 OCT-4表达水平与宫颈癌患者放疗敏感性相关,而沉默OCT-4表达能提高Siha细胞放射敏感性,并通过促进cleaved-caspase-3而抑制p-Akt水平发挥作用.
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靛玉红对Oct-4基因在膀胱癌细胞株中的表达抑制
目的:探讨靛玉红对Oct-4基因在膀胱癌细胞株中的表达抑制.方法:体外持续传代培养已加有不同浓度靛玉红的膀胱癌细胞株30天,记录各组各代细胞的增殖周期；用RT-PCR法及琼脂糖凝胶电泳检测不同浓度不同作用时间的靛玉红作用于膀胱癌细胞株时,对Oct-4基因表达的影响.结果:不同浓度的靛玉红均可抑制Oct-4基因的表达,其抑制作用随时间和浓度增加而增强.结论:靛玉红能够抑制膀胱癌细胞株中Oct-4基因的表达,且具有量效关系和时间依赖性.
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喉癌中Oct-4基因的表达及其临床意义
目的 检测Oct-4基因在喉鳞癌组织中的表达,探讨其相关的临床意义.方法 收集我院2007年1月～2010年12月耳鼻咽喉科手术切除标本48例,所有病例经病理证实为喉鳞状细胞癌,每例另取癌旁非癌喉粘膜组织作为对照.病例按照病理分化程度、有无淋巴结转移、临床TNM分期分组对照Oct-4基因的表达.RT-PCR检测Oct-4mRNA的表达,荧光定量PCR检测Oct-4基因的表达量.结果 Oct-4基因在喉鳞癌组织中的表达率为64.6%,荧光定量PCR结果也显示喉鳞癌标本中Oct-4基因的表达量为0.533±0.142,而周围正常对照组织未检测出Oct-4基因的表达(P<0.01).Oct-4基因在喉鳞癌高分化组阳性率为33.3%显著低于中、低分化组的69.0%(P<0.01);有淋巴结转移者阳性率为47.8%显著低于无淋巴结转移的80.0%(P<0.01);处于临床Ⅰ、Ⅱ期的患者Oct-4基因表达阳性率为47.4%,而Ⅲ、Ⅳ期的患者阳性率为75.9%,两者之间统计差异有统计学意义(P<0.01).荧光定量PCR结果显示Oct-4基因的表达水平在喉鳞癌组织中会随着肿瘤分化减低、淋巴结转移和临床分期的进展而逐渐的增加(P<0.05).结论 Oct-4基因在喉鳞癌的发生发展中起到一定的作用,可以用于肿瘤的分级以及判断预后等方面,具有显著的临床意义.
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Oct-4基因在胃癌顺铂耐药中的作用
目的:建立胃癌BGC-823顺铂耐药细胞株,研究Oct-4基因在胃癌顺铂耐药中的作用.方法:使用顺铂逐步增加剂量法诱导胃癌BGC-823细胞,以建立其多药耐药细胞株BGC-823/DDP; MTT细胞毒实验检测顺铂对肿瘤细胞的细胞毒作用；半定量RT-PCR检测Oct-4基因的表达；基因转染干扰Oct-4表达；Western blot实验检测Oct-4蛋白的表达改变.结果:经过30～34周的诱导我们建立了胃癌BGC-823顺铂耐药细胞株；MTT细胞毒实验结果显示顺铂对BGC-823和BGC-823/DDP细胞的IC50值分别为(2.33±0.12)和(21.46±0.97)μmol/L(P＜0.01),与BGC-823细胞比较,BGC-823/DDP细胞对顺铂耐药是其9.21倍；半定量RT-PCR检测显示胃癌耐药株BGC-823/DDP高表达Oct-4基因；Western blot结果显示化学合成的siRNA可以靶向下调Oct-4蛋白的表达；siRNA干扰BGC-823/DDP细胞Oct-4基因的表达后,BGC-823/DDP细胞对顺铂的的IC50值从(22.04±1.84) μmol/L减小到(6.15±0.53)μmol/L,二者差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:研究结果表明,Oct-4基因的高表达在胃癌顺铂的耐药中起着重要的作用.
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皮肤肿瘤
20120310转录因子Oct-4在皮肤鳞状细胞癌、脂溢性角化病的组织表达及其意义/李毓阳(海南农垦三亚医院皮肤科),戴永江…//南方医科大学学报.-2011,31(5).-917 ～918采用免疫组化法检测Oct-4在35例鳞状细胞癌(SCC),21例脂溢性角化病(SK)及15例正常对照皮肤组织中的表达.结果:Oct-4在正常皮肤组织表达为阴性,在SCC和SK表达差异有统计学意义(P＜0.05),间接反映SCC和SK的恶性程度不同.提示SCC和SK中表达Oct-4基因的细胞很可能是SCC和SK的干细胞,这将为其终分离和鉴定人SCC和SK干细胞提供重要基础,有助于揭示SCC和SK的肿瘤起始细胞,从而对预防和治疗SCC和SK有重大意义.
