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miRNA-21在子宫颈鳞癌组织中表达的初步研究
目的 探讨微小分子RNA (microRNA-21,miR-21)在宫颈癌患者组织中的表达情况.方法 选择宫颈鳞癌20例作为宫颈癌组,其中12例HPV16阳性,8例HPV16阴性;正常宫颈16例作为对照组,采用实时定量PCR方法检测miR-21在各组中的表达情况.结果 MiR-21在宫颈癌和对照组中的相对表达量为4.019±0.002;MiR-21在HPV16阳性宫颈癌组和阴性组的相对表达量分别为2.376±0.034和2.002±0.024,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-21在宫颈癌组织中呈高表达,可能与宫颈癌发生、发展有关.
关键词： 微小分子RNA 子宫颈癌 实时荧光定量PCR法 人乳头瘤病毒 -
microRNA在肺纤维化中的作用
肺纤维化是机体在应对各种因素引发的肺损伤时发生的修复功能失调,造成肺间质损伤、成纤维化及丧失弹性,并以成纤维细胞增殖及大量细胞外基质沉积为病理组织学特征的一类难治性疾病.近十年来微小分子RNA显露出其在器官表型调节中的关键作用,在肺纤维化的作用受到关注,有望成为肺纤维化诊疗潜在新靶点.
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人分化抑制因子3基因靶向微小分子RNA表达载体的构建及筛选
目的 人分化抑制因子3(inhibitor of differentination 3, Id3)基因在A549细胞中的外源性表达能抑制细胞生长并诱导细胞凋亡.文中旨在构建靶向人Id3基因的微小分子RNA(miRNA)表达载体,观察miRNA对A549细胞中Id3表达的下调作用,为进一步探讨Id3基因在A549细胞生长调控中的作用机制提供一定实验依据. 方法 依据miRNA设计原则,针对人Id3基因的mRNA序列,设计并合成编码miRNA的2条寡核苷酸序列,经退火成互补双链,再克隆至pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体中,构建含靶向人Id3基因的miRNA表达质粒(pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-Id3),DNA测序验证后,采用Lipofectamine2000TM脂质体转染技术将该质粒导入A549细胞.荧光倒置显微镜下观察miRNA干扰质粒转染A549细胞后EGFP的表达情况,应用RT-PCR和Western blot方法分别检测miRNA干扰后Id3 mRNA及蛋白水平的表达. 结果 DNA测序表明重组质粒pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-Id3构建正确,将其成功导入A549细胞后,在Id3 mRNA水平和蛋白表达水平均有不同程度的抑制作用. 结论 成功构建了针对人Id3基因的4组pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-Id3 miRNA表达载体,其中,SRId3-1干扰组在mRNA水平和蛋白表达水平均能有效抑制A549细胞Id3的表达.
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胃肠胰神经内分泌肿瘤循环生物标记物研究进展
胃肠胰神经内分泌肿瘤(GEP-NEN)是一类少见肿瘤,近年报道的发病率在不断上升.由于大多数GEP-NEN临床表现出现较晚以及常规肿瘤标记物在GEP-NEN中的局限性,约50%的患者在诊断时肿瘤已为晚期.因此,寻找能对GEP-NEN早期诊断以及准确评价肿瘤生物学行为的循环生物标记物十分重要.本文概述了用于GEP-NEN诊断及疗效评估的循环生物标记物的研究进展.传统循环生物标记物包括特异性循环生物标记物和非特异性循环生物标记物,其中非特异性循环生物标记物包括嗜铬素A(CgA)、胰抑素(PST)、嗜铬素B(CgB)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胰多肽(PP).新型生物标记物包括循环肿瘤细胞(CTC)和微小分子RNA(miRNA)等,其中NETest可能是一种具有较好临床应用前景的生物标记物.但新型生物标记物广泛应用于临床仍有较长的路要走.
