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肠上皮细胞缺血缺氧凋亡模型的实验研究
我们建立了以体外人工基底膜为表衬的肠上皮细胞(IEC)原代培养,模拟临床缺血缺氧损伤后IEC的脱落凋亡变化的实验模型,报道如下.
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白藜芦醇诱导胃癌细胞脱落凋亡
目的研究白藜芦醇诱导胃癌细胞脱落凋亡的作用.方法采用细胞形态学观察、Annxin-Ⅴ和PI细胞染色和流式细胞仪检测,观察白藜芦醇(o.1、0.2、o.5 mmol/L)对脱落培养胃癌细胞BGC823、SGC7901和HGC27的生长状态、细胞周期的影响及诱导脱落凋亡的作用.结果倒置显微镜下发现脱落培养的胃癌细胞聚集成团生长,0.1 mmol/L白藜芦醇作用细胞后可抑制抗脱落凋亡的胃癌细胞聚集成团;流式细胞仪检测和Annxin-Ⅴ和PI细胞染色表明0.5 mmol/L白藜芦醇可分别阻滞脱落培养的BGC823、SGC7901和HGC27细胞于G0/G1、S、G2/M期,并可诱导这3株胃癌细胞发生脱落凋亡,其中白藜芦醇诱导HGC27细胞脱落凋亡比例达19.3%,远高于其他两株胃癌细胞.结论白藜芦醇可诱导胃癌细胞发生脱落凋亡.
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葡萄籽提取物原花青素诱导乳腺癌MCF-7细胞脱落凋亡
目的检测葡萄籽提取物原花青素诱导乳腺癌MCF-7细胞脱落凋亡的作用.方法采用DNA ladder检测及软琼脂集落形成试验方法,观察乳腺癌MCF-7细胞对脱落凋亡的敏感性以及原花青素诱导其脱落凋亡的作用.结果MCF-7细胞具有抗脱落凋亡的特性,而0.1 mmol/L原花青素即可引起悬浮培养的MCF-7细胞凋亡.表现为细胞染色质DNA断裂及软琼脂集落形成受阻.结论原花青素可诱导乳腺癌MCF-7细胞脱落凋亡.
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姜黄素诱导人肺腺癌A549细胞脱落凋亡作用的研究
目的检测姜黄素诱导人肺腺癌细胞(A549)脱落凋亡的作用.方法采用DNA ladder 法,流式细胞仪(FCM)技术结合PI及AnnexinV-FITC双标记染色试验方法及Western-blot法观察姜黄素是否能诱导A549脱落凋亡.结果 A549细胞具有抗脱落凋亡的特性, 而10 μmol·L-1的姜黄素即可引起悬浮培养的A549细胞发生脱落凋亡.结论姜黄素可诱导人肺腺癌细胞(A549)脱落凋亡.
关键词： 姜黄素 A549人肺腺癌细胞 脱落凋亡 -
葡萄籽提取物原花青素诱导胃癌细胞脱落凋亡
目的研究葡萄籽提取物原花青素诱导胃癌细胞脱落凋亡的作用.方法采用细胞形态学观察、Annxin-V和PI细胞染色实验和流式细胞仪检测方法观察原花青素对悬浮培养的胃癌细胞生长状态和细胞周期的影响以及诱导脱落凋亡的作用.结果 0.1 mmol·L-1原花青素可抑制抗脱落凋亡的胃癌细胞聚集成团,0.5 mmol·L-1原花青素可阻滞悬浮培养的不同胃癌细胞于不同的细胞周期,并诱导胃癌细胞发生脱落凋亡.结论原花青素可诱导胃癌细胞发生脱落凋亡.
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人肺癌细胞株抗脱落凋亡特性的分析
目的:研究肺癌细胞A549、 Spc-A1、 PLA801及Calu-3抗脱落凋亡的特性, 为研究肺癌细胞抗脱落凋亡的机制提供理论依据.方法: 应用形态学观察, 流式细胞术结合PI及AnnexinV-FITC双标记染色法及Western blot法观察4株肺癌细胞脱落凋亡的特性.结果: 脱落培养12 h后, 4株肺癌细胞有不同形态学变化; 流式细胞仪检测发现Calu-3悬浮培养24 h后, 凋亡率与贴壁培养24 h的凋亡率有明显差别; 而A549等3种肺癌细胞系与贴壁培养的对照组相比较, 其凋亡率无显著性差异, Western blot结果也验证了上述结果.结论: 肺癌细胞Calu-3属于脱落凋亡细胞, 而A549、 Spc-A1、 PLA801属于抗脱落凋亡细胞.
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肺腺癌胸水肿瘤细胞分离与体外悬浮培养及鉴定
目的:模拟体内环境,探索恶性胸水肿瘤细胞分离的合适方法,建立肺腺癌肿瘤细胞抗脱落凋亡模型.方法:取经病理诊断已确诊的30例肺腺癌胸水1000ml,离心沉淀重悬后,分为2份,分别为A、B两组,A组采用40％/20％ percoll液(配置为下层为40％ percoll液,上层为20％ percoll液等梯度密度分离液,比重为1.056、1.031)一次性分离;B组:首先用人淋巴细胞分离液(比重为1.077)进行初次分离,采用含20％胎牛血清的1640培养液悬浮培养2天,待肿瘤细胞聚集成团块样生长,再用40％/20％ percoll液进行二次分离.结果:A组中肿瘤细胞获得率较低,30例肺腺癌患者样本中,17例未收集到肿瘤细胞,7例肿瘤细胞收集数量极少,仅6例肿瘤细胞获得数量较为满意.B组的二次分离法的肿瘤细胞获得率及获得数量明显高于A组的一次分离法,其中7例未发现肿瘤细胞,其余23例均获得满意的肿瘤细胞数量.经10次重复检测肺癌胸水肿瘤细胞的比重为1.050左右.利用含20％胎牛血清的1640培养液悬浮培养约30天,成功建立了肺腺癌肿瘤细胞抗脱落凋亡模型.结论:对肺癌恶性胸水的二次分离可有效的分离并纯化胸水中的肿瘤细胞.利用20％胎牛血清的1640培养液可加快肿瘤细胞的生长,提高肿瘤细胞的获得数量,并能够保证分离后的肿瘤细胞在悬浮状态下继续生长.
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人胃癌细胞株抗脱落凋亡特性的分析
目的: 研究胃癌细胞HGC27, BGC823, MGC803, SGC7901抗脱落凋亡的特性.为研究肿瘤细胞抗脱落凋亡的机制奠定基础.方法: 应用软琼脂集落形成实验,DNA ladder检测,流式细胞术等技术观察胃癌细胞脱落培养后细胞生长状况的改变.结果: 对照组细胞MDCK(狗的正常肾脏上皮细胞系)在软琼脂中不生长,没有形成细胞集落;悬浮培养15 h后,可见有细胞凋亡特征性的DNA ladder出现;流式细胞仪检测,悬浮培养24,48 h可见有凋亡峰出现.而HGC27等4种胃癌细胞系在软琼脂中均形成大小不等的细胞集落,脱落培养15 h后,没有细胞凋亡特征性的DNA ladder出现,流式细胞仪检测,与贴壁培养的对照组相比细胞周期没有显著性差异,也没有凋亡峰的出现.结论: MDCK细胞属于锚着依赖性细胞,可出现脱落凋亡.胃癌细胞HGC27, BGC823, MGC803, SGC7901属于抗脱落凋亡细胞.
