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羟基喜树碱对A549人肺腺癌细胞增殖的影响
目的 观察羟基喜树碱对体外A549人肺腺癌细胞增殖的影响.方法 采用细胞培养及MTT比色法检测羟基喜树碱对体外A549人肺腺癌细胞的抑制作用.结果 低浓度羟基喜树碱作用24 h对A549人肺腺癌细胞没有明显影响,当药物浓度达到 50 μg/mL 时,抑制作用明显增强,抑制率迭 44.17%,药物浓度达到100 μg/mL 时抑制率达50.28%;随着药物作用时间的延长,抑制更明显,100 μg/mL 药物组作用48 h抑制率达 70.98%.结论 羟基喜树碱具有抑制A549人肺腺癌细胞增殖的作用,抑制作用具有明显的浓度和时间依赖性.
关键词： 羟基喜树碱 A549人肺腺癌细胞 细胞培养 MTT检测 -
弓形虫Ⅰ、Ⅱ型虫株ROP16基因重组表达载体的构建及其对A549细胞STAT3/6磷酸化水平的影响
目的 探索弓形虫Ⅰ、Ⅱ型虫株ROP16在A549细胞中的功能. 方法 提取弓形虫Ⅰ(RH)、Ⅱ(ME49)型虫株总RNA,PCR扩增ROP16基因全长序列后克隆至真核表达载体pEGFP-N1,转染A549细胞,采用Western blot方法检测细胞中STAT3/6磷酸水平,采用实时荧光定量PCR检测IL-12、iNOS、ARG1mRNA表达水平. 结果 PCR扩增Ⅰ、Ⅱ型虫株ROP16基因全长为2148bp.双酶切和测序验证重组载体构建正确,pEGFP-N1-RH ROP16和pEGFP- N1-ME49ROP16过表达载体转染A549细胞后ROP16mRNA表达水平较未转染组上调(P＜0.05,F=824.184, 270.904),pEGFP-N1-ME49ROP16转染A549细胞p-STAT3/6表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05,F =1.051,1.203),IL-12 、iNOS mRNA 与对照组表比呈高表达(P＜0.01,F=157.705,173.623).pEGFP-N1-RH ROP16转染组相比A549细胞对照组p-STAT3/6表达水平上调(P＜0.05,F=121.227,68.324),IL-12mRNA表达下调(P＜0.01,F=186.397),ARG1mRNA表达上调(P＜0.01,F=126.236). 结论 弓形虫Ⅰ型RH 株ROP16蛋白具有激活p-STAT3/6作用,且能使ARG1mRNA 的表达上调,IL-12mRNA的表达下调,而弓形虫Ⅱ型ME49虫株 ROP16蛋白则无激活p-STAT3/6作用,但能使IL-12mRNA和iNOS mRNA的表达上调.
关键词： 弓形虫 ROP16 A549人肺腺癌细胞 重组质粒 -
姜黄素诱导人肺腺癌A549细胞脱落凋亡作用的研究
目的检测姜黄素诱导人肺腺癌细胞(A549)脱落凋亡的作用.方法采用DNA ladder 法,流式细胞仪(FCM)技术结合PI及AnnexinV-FITC双标记染色试验方法及Western-blot法观察姜黄素是否能诱导A549脱落凋亡.结果 A549细胞具有抗脱落凋亡的特性, 而10 μmol·L-1的姜黄素即可引起悬浮培养的A549细胞发生脱落凋亡.结论姜黄素可诱导人肺腺癌细胞(A549)脱落凋亡.
关键词： 姜黄素 A549人肺腺癌细胞 脱落凋亡 -
姜黄素对A549人肺腺癌细胞增殖抑制作用及其机制的研究
目的:探讨姜黄素对人肺腺癌细胞(A549)抗癌作用及其分子机制.方法:采用荧光显微镜、四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪(FCM)技术结合PI及AnnexinV-FITC双标记染色、Western blot法.结果:(1)姜黄素作用于癌细胞后,光镜下可见有细胞脱壁,悬浮培养液中;荧光镜下可见细胞核破碎,裂解成大小不等的凋亡小体.(2)MTT法测得不同浓度姜黄素作用A549细胞72 h后,可产生显著的细胞增殖抑制作用.将量效关系进行直线回归,得IC50值18 μmol/L.(3)姜黄素诱导凋亡作用呈剂量依赖性.随着药物浓度从5 μmo/L增加至30 μmol/L,Annexix-FITC单阳性细胞(早期凋亡细胞)由3.4%增加到59.1%;当姜黄素浓度增至40 μmol/L时,PI及AnnexinV-FITC双阳性细胞(凋亡继发性坏死细胞)成为主要的细胞组成.同时发现G2期细胞比例明显增多,出现了G2期阻滞.(4)Western blot法观察到,随着姜黄素浓度增至10 μmol/L,116 kD裂解成为89 kD片段的多聚ADP-核糖聚合酶的表达同步增加.结论:姜黄素能干扰细胞周期进程,对A549细胞有生长抑制作用,且呈剂量依赖性,其抑制作用不仅是由于非特异性的细胞毒性造成的,还与诱导肿瘤细胞发生凋亡有关.
关键词： 姜黄素 A549人肺腺癌细胞 凋亡 多聚ADP-核糖聚合酶 -
黄桷树叶总黄酮提取物对A549细胞的保护作用研究
目的 探索黄桷树叶总黄酮的提取和初步了解提取物是否具有细胞损伤的保护作用,为黄桷树叶药用价值的研究提供依据.方法 采用乙醇浸提法,提取黄桷树叶中的总黄酮,以芦丁为标准计算提取效率.以鱼藤酮诱导A549A549人肺腺癌细胞损伤为模型,研究提取物对细胞活力、细胞形态、活性氧的产生、凋亡率的影响作用.结果 对黄桷树叶中的总黄酮,60％的乙醇的提取效率为5.02％;提取物32 mg/L可明显抑制100μg/L鱼藤酮诱导的细胞活力的降低、细胞形态的改变、活性氧的产生和凋亡.结论 乙醇浸提法能用于提取黄桷树叶中的总黄酮;提取物具有保护鱼藤酮诱导的A549细胞损伤的作用;黄桷树叶具有进一步研究开发其药用价值的潜力.
关键词： 黄桷树叶 总黄酮提取物 A549人肺腺癌细胞 活性氧 细胞凋亡
