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突出腰椎间盘组织中TNFa、IL-1β的表达及其意义
目的:研究肿瘤坏死因子a(TNFa)和白细胞介素质1β(IL-1β)在突出腰椎间盘组织中的表达,并对其意义进行探讨.方法:用免疫组织化学方法,分别应用TNFa、IL-1β的单克隆抗体,对16例腰椎间盘突出症患者突出腰椎间盘组织中TNFa、IL-1β的表达水平进行了检测,并取6例健康成人(尸体)正常腰椎间盘作对照.结果:在16例突出腰椎间盘组织中,12例存在TNFa表达阳性细胞,8例存在IL-1β表达阳性细胞,有6例为两种细胞因子均表达.表达阳性的细胞主要为软骨细胞和成纤维细胞.6例正常腰椎间盘组织中,均无表达阳性的细胞.结论:突出腰椎间盘细胞可产生这两种细胞因子,它们可能在椎间盘退变中发挥作用.
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健骨颗粒含药血清对肿瘤坏死因子α诱导大鼠成骨细胞凋亡的影响
背景:成骨细胞数量减少或凋亡进程加速,使骨形成少于骨吸收可导致骨质疏松的发生.肿瘤坏死因子а在去势大鼠或绝经后骨质疏松患者骨组织中呈高表达,在体外可刺激成骨细胞凋亡.健骨颗粒可降低骨质疏松模型鼠血清肿瘤坏死因子а水平.目的:验证健骨颗粒含药血清对肿瘤坏死因子а诱导的鼠成骨细胞凋亡的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2004-07/2006-12在福建巾医学院骨伤系分子生物学实验室完成.材料:3月龄SD雌性大鼠40只用于制备含药血清,24 h SD乳鼠5只用于培养成骨细胞.健骨颗粒由煅狗骨、淫羊藿、山茱萸、党参等药味组成,原约材由福建省药材公司提供,福建中医药研究院中试车间加工制备,每克颗粒含原生药2.9 g.方法:用酶消化法培养成骨细胞.随机将40只SD大鼠分为高、中、低剂量含药血清组和生理盐水对照组,每组10只,分别将健骨颗粒按4,2,1 g/(kg·d)的药量灌服,对照组每天灌服2 mL生理盐水.连续给药7 d后腹主动脉取血得到健骨颗粒含药血清,将含药血清作用于成骨细胞48h后,再用肿瘤坏死因子а诱导24 h.运用TUNEL技术、流式细胞术、免疫细胞化学结合图像分析方法,检测成骨细胞凋亡情况.主要观察指标:①成骨细胞凋亡指数.②成骨细胞凋亡峰.③成骨细胞Bcl-2、Bax表达.结果:用肿瘤坏死因子а诱导的各组成骨细胞均出现凋亡现象,其中中、高剂量含药血清组的细胞凋亡指数和凋亡率明显低于其他组,而Bcl-2/Bax灰度比值却较其他组高(P<0.05),Bcl-2/Bax灰度比值与凋亡指数呈负相关(r=-0.757,P<0.01).结论:健骨颗粒对肿瘤坏死因子Q诱导的成骨细胞凋亡有一定的保护作用,可能通过提高Bcl-2的表达来实现.
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Akl对哮喘小鼠肺组织TNF-α的调节作用
目的 探讨在哮喘发病机制中,蛋白激酶B(Akt/PKB)对哮喘小鼠肺组织肿瘤坏死因子α(1NF-α)表达的调节作用.方法 BALB/c小鼠30只,按随机数字表法均分为正常对照组、哮喘组、Akt/PKB阻断组.利用AniRes2005肺功能仪测小鼠气道阻力、免疫荧光、Western blot方法 检测各组小鼠肺组织TNF-α的表达.结果 哮喘小鼠吸气阻力和呼气阻力明显高于正常组小鼠(P<0.01);免疫荧光结果 显示:哮喘组肺组织TNF-α阳性产物的平均光密度值(MOD)显著高于正常对照组(P<0.01);而Akt/PKB阻断组与哮喘组相比,肺组织TNF-α阳性反应产物的MOD值明显降低(P<0.01).Western blot结果 显示:与正常对照组比较,哮喘组、Akt/PKB阻断组小鼠肺组织TNF-α的1DV与内参照IDV的比值均明显升高(P<0.01).而PKB/Akt阻断组肺组织TNF-α目标带的IDV与内参照IDV的比值则明显低于哮喘组(P<0.01).结论 在神经生长因子介导的哮喘发病机制中,Akt/PKB能上调哮喘小鼠肺组织TNF-α的表达.
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沙利度胺联合孕三烯酮对大鼠子宫内膜异位症血管生成的影响
目的 探讨沙利度胺、孕三烯酮及两者联合用药对大鼠子宫内膜异位组织中血管生成的影响.方法 24只子宫内膜异位症模型SD大鼠,随机分为模型对照、沙利度胺(20 mg·kg~(-1)·d~(-1))、孕三烯酮(0.5 mg·kg~(-1)·d~(-1))及联合用药(沙利度胺20 mg·kg~(-1)·d~(-1)和孕三烯酮0.5 mg·kg~(-1)·d~(-1))4组,每组6只.药物溶于生理盐水中腹腔注射给药,模型对照组每日腹腔注射生理盐水2 mL.给药4 wk后处死,免疫组织化学SP法测定血管内皮生长因子(VEGF)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在异位内膜的表达,并通过Ⅷ因子标记异位子宫内膜血管,检测异位内膜组织中微血管密度(MVD).结果 沙利度胺组、孕三烯酮组及联合用药组异位内膜MVD、VEGF和TNF-α的表达均显著低于模型对照组(P＜0.01),其中联合用药组MVD和VEGF比沙利度胺组和孕三烯酮组降低得更为显著(P＜0.05),联合用药组TNF-α与孕三烯酮组无显著差异(P＞0.05).结论 沙利度胺和孕三烯酮可抑制大鼠异位内膜的MVD、VEGF和TNF-α的表达,从而抑制子宫内膜异位症血管生成,当两者联合用药时,作用更强.
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脓毒症早期大鼠肾上腺Toll样受体4、肿瘤坏死因子-аmRNA表达及地塞米松影响
目的 观察脓毒症早期相对肾上腺皮质功能不全(RAI)大鼠肾上腺Toll样受体4(TLR4)、肿瘤坏死因子(TNF)-а mRNA表达及地塞米松对其的影响.方法 将300只Wistar大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、地塞米松预先给药组、地塞米松治疗组,各组50只动物.液相平衡放射免疫分析法(RIA)检测血清皮质醇浓度,逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾上腺组织TLR4、肿瘤坏死因子(TNF)-а mRNA的相对表达量.结果 模型组促肾上腺皮质激素(ACTH)刺激前后血清皮质醇浓度无明显变化(13.84±4.47与13.58±4.13),肾上腺组织TLR4、TNF-а mRNA的表达较其他组明显升高,地塞米松预先给药组48 h生存率高(65.12%),治疗组次之(35.00%),模型组低(23.32%).结论 肾上腺组织,TLR4、TNF-аmRNA的表达与脓毒症相对肾上腺皮质功能不全的发生有关,小剂量地塞米松能够抑制肾上腺组织TLR4、TNF-а mRNA的表达,改善预后,且早期应用效果更好.
