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原发性高血压患者颈动脉粥样硬化与AT1R基因多态性的关系
目的探讨血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)基因多态性与原发性高血压颈动脉粥样硬化之间的关系及其发病机制. 方法采用盐析法提取150例原发性高血压患者的白细胞DNA,多聚酶链式反应结合限制性内切酶法检测AT1R基因型;彩色多普勒超声测定颈总动脉、颈内动脉,并与100例健康成年人对照. 结果原发性高血压患者的AC基因型频率22.0%,C等位基因频率18.7%,均比正常健康组高(P＜0.05);随高血压分级增加,颈动脉内膜中层厚度(IMT)逐渐增厚. 结论 AT1R基因多态性可能是原发性高血压的遗传因素,高血压是颈动脉粥样硬化的重要易感因素.
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SEDT-PA患者关节软骨细胞生物学特性及基因表达谱的改变
目的研究晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病(SEDT-PA)患者关节软骨细胞生物学特性及基因表达谱的改变.方法从1例SEDT-PA患者及正常同龄个体的关节软骨分离软骨细胞进行体外培养,对培养的软骨细胞进行生长曲线、细胞增殖、细胞周期测定及基因表达谱分析, RT-PCR、Western blot及免疫组化分别从转录与翻译水平对基因表达谱分析进行验证. 结果 SEDT-PA软骨细胞体积增大,增殖速度加快,增殖指数及DNA合成增多;处于DNA合成及有丝分裂期的细胞比例增加.软骨细胞外基质的主要降解酶系基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3、MMP-13等的mRNA表达显著下调,而其细胞内的相应蛋白却明显增多,同时促进细胞生长、增殖与细胞周期演进的部分基因mRNA转录明显上调,而细胞外胶原、非胶原蛋白及部分蛋白多糖的表达改变并不一致,大部分mRNA转录明显下调,少部分如细胞外基质蛋白1、ⅩⅤ型胶原蛋白α1等的mRNA表达增高,同时伴细胞骨架蛋白的相应变化.结论 SEDT-PA患者软骨细胞生长及增殖速度加快,软骨细胞凋亡减少.软骨细胞外主要MMP系的出胞障碍,以及胶原、非胶原蛋白和蛋白多糖表达的不均一性改变是SEDT-PA发病的细胞生物学基础.
关键词： 软骨细胞 基因表达型 晚发型脊柱骨骺发育不良伴进行性骨关节病 -
微阵列分析转染ARL-1基因后人肝癌细胞基因表达的差异
目的分析转染醛糖还原酶相似基因-1(ARL-1)后,实验组人肝癌细胞与对照组细胞在基因表达谱方面的差异. 方法以实验组及对照组细胞的总RNA反转录合成的cDNA为探针,与cDNA芯片(cDNA chips)进行差异杂交,并应用半定量RT-PCR对差异表达的重要的相关基因进行初步筛选. 结果 cDNA芯片分析发现6种基因的表达水平明显上调,9种基因的表达水平明显降低,涉及细胞的蛋白质代谢、信号传导、转移和耐药性等方面. 结论 cDNA芯片分析发现:转染醛糖还原酶相似基因-1后肝癌细胞的基因表达谱发生改变,为系统研究肝癌的耐药性及其机制提供了有益的线索.
关键词： 寡核苷酸序列分析 基因表达型 醛还原酶 醛糖还原酶相似基因-1 -
苯作业工人淋巴细胞p53相关基因mRNA表达水平分析
目的 了解苯环境作业工人外周血淋巴细胞中,经p53介导的DNA损伤修复路径相关基因表达水平.方法 选择某喷涂厂直接接苯工人46人(直接接苯组)、间接接苯工人26人(间接接苯组)和无苯及其他毒物接触工人29人(对照组),应用SYBR GreenI嵌合荧光法实时RT-PCR分析技术,检测外周血淋巴细胞p53及相关基因mRNA表达水平,比较对照组与作业组问P53及相关基因mRNA表达倍数差异.结果 直接接苯组和间接接苯组p53、Ku80、Ape1和Mdm-2 mRNA表达水平与对照组比较磋异无统计学意义(P＞0.05);p21有增高趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05).直接接苯组的Rad51、Bcl-2、Bax、Xpa和Xpc mRNA表达水平下调、间接接苯组Rad51 mRNA表达下调,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).直接接苯组的白细胞、血红蛋白和血小板分别为(4.93±1.27)×10- /L、(123.97+11.80)g/L和(124.02±41.22)×109 /L,间接接苯组血小板为(135.80±39.44)×109 /L,均低于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 长期慢性的低浓度苯接触可使工人淋巴细胞中p53介导的部分DNA损伤修复相关基因mRNA表达水平发生改变,直接接苯工人的外周血白细胞、血红蛋白、血小板减低以及Bcl-2、Bax、Xpa和Xpc mRNA表达水平改变明显.
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小鼠造血组织卵黄囊与胎肝的基因表达谱初步研究
目的以C57BL/6小鼠胚胎期造血组织卵黄囊与胎肝为对象,识别在不同的发育阶段c-kit+与Sca-1+早期造血细胞的变化,以及在基因表达水平上的主要特点,了解造血组织在原始造血向永久造血转移阶段造血能力变化的机制.方法用流式细胞仪计数分离到的单个细胞中c-kit+与Sca-1+细胞的比例,以总RNA建立的cDNA文库通过随机测序的方法,识别这些细胞总体的基因表达情况.结果随胚胎发育,卵黄囊和胎肝中的Sca-1+细胞比例逐步升高,交配后9～12 d卵黄囊Sca-1+细胞比例为0.24%～2.50%,而卵黄囊中c-kit+细胞的比例有明显下降,交配后9～12 d卵黄囊c-kit+细胞比例为6.10%～1.77%;对交配后第9天和第12天的卵黄囊和交配后第12天的胎肝3个文库的部分基因测序,识别的已知功能基因显示表达量较高的基因为各型珠蛋白,且以胚胎型为主.结论细胞表面标志和基因表达的水平测定显示胚胎期的红系造血相对较为活跃;卵黄囊和胎肝基因表达存在明显差异.
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乳腺癌治疗提倡“个性化”
乳腺癌治疗是一门艺术,需要把握佳时机、争取更大的治愈机会.随着检测技术的提高和分子肿瘤学的发展,根据治疗方法不同,可以把乳腺癌分三大类.第一类是激素反应型,这类患者病情发展相对缓慢,适合做内分泌治疗.第二类就是癌基因表达型,这类患者往往病情发展比较快,适合应用新的分子靶向药物治疗.第三类是"三阴型",即各项指标都是阴性的,这类患者就应该以化疗为主.所以对于乳腺癌患者,首先要明确病理类型,再设计个性化治疗路线,做到分类明确、分别治疗.
