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HLA-DQ等位基因与哮喘相关性研究
目的探讨在中国汉族哮喘家系中，HLA-DQ基因与哮喘的相关性。方法对98例哮喘家系成员，用PCR-序列特异性引物(PCR-SSP)技术对HLA-DQA1和B1进行基因分型，并与正常对照进行比较。结果发现DQA1*0101和DQA1*0601等位基因频率在哮喘患者组(40.0%，45.0%)较正常对照组(16.4%，13.4%)显著升高(χ2=6.186 0，P<0.05，RR=3.39；χ2=11.609 0，P<0.01，RR=5.27)；DQB1*0303和DQB1*0601等位基因频率在哮喘患者组(55.0%，47.5%)较正常对照组(13.7%，13.7%)显著升高(χ2=15.740 0，P<0.01，RR=7.68；χ2=10.930 0，P<0.01，RR=5.69)。同时发现HLA-DQB1*0201等位基因频率在对屋尘螨抗原特异性IgE反应哮喘家系成员(39.4%)较家系中非特应症者（12.0％）显著高频表达(t=2.382 5，P<0.05)。结论 HLA-DQA1*0101，*0601和DQB1* 0303，*0601是哮喘遗传易感等位基因；HLA-DQB1*0201限定对屋尘螨抗原特异性IgE反应。
关键词： 人类白细胞抗原Ⅱ类基因 哮喘 特应症 屋尘螨抗原 -
屋尘螨抗原致敏大鼠支气管上皮细胞白介素6、白介素8和转化生长因子β1的表达
目的 探讨屋尘螨抗原(Derp1)对大鼠原代支气管上皮细胞白介素6(IL-6)、IL-8和转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法 将实验随机分成正常对照组和实验组,实验组中细胞分别暴露于3个不同的Derp1浓度(1、5、10 mg/L)及3个不同的培养时间点(4、8和24 h).然后用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)及酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测细胞及细胞上清液中IL-6、IL-8和TGF-β1的表达及含量.结果 与对照组相比,实验组各指标有明显变化.Derp1刺激4h,IL-6和IL-8表达开始升高,直至8～24 h呈高水平.而在Derp1浓度≥5 mg/L条件下,IL-6和IL-8表达明显,与正常对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).而TGF-β1 则随着时间和浓度的增加.其表达水半呈逐渐上升趋势,各时间点的表达差异均有统计学意义(P＜0.05).各炎症指标(IL-6,IL-8,TGFβ1)ELISA结果与PCR趋势基本一致.结论 Derp1刺激气道上皮细胞,引起支气管上皮细胞免疫反应,释放一系列炎症因子如IL-6、IL-8和TGF-β1.从而参与哮喘气道炎症反应及哮喘的气道重塑.
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屋尘螨抗原脱敏治疗毛囊螨感染的酒渣鼻36例临床观察
资料与方法一般资料:门诊筛选的酒渣鼻患者,必须有典型临床表现,为红斑期及脓疱期酒渣鼻患者,实验室镜检毛囊螨阳性及尘螨变应原皮试阳性.所选患者共36例,其中男25例,女11例.年龄25～45岁,平均年龄32岁.病程2～5年,平均3.5年.
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屋尘螨抗原Der p2重组耻垢分枝杆菌的构建及其鉴定
目的 构建并鉴定能够分泌表达外源蛋白--屋尘螨抗原(Der p2)的基因重组耻垢分枝杆菌(rM.s).方法 采用电穿技术,将鉴定好的PCW - Der p2质粒转化到耻垢分枝杆菌(M.s),通过PCR鉴定目标基因在rM.s中的表达.结果 经PCR鉴定,成功将PCW - Der p2质粒转化到M.s.结论 成功构建了以分泌方式表达外源蛋白的Der p2 - rM.s.
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胞壁表达Der p2的重组BCG对BALB/c小鼠Th细胞免疫应答的影响
目的:观察接种以膜蛋白形式表达屋尘螨抗原Derp2基因的重组BCG(rBCG),对BALB/c小鼠Th细胞免疫应答的影响.方法:以生理盐水为对照,分别将rBCG和BCG经腹腔注射接种于6～8wk龄和新生BALB/c小鼠,用ELISA法测定小鼠血清、脾脏T细胞培养上清(STLCS)中IL-4、IFN-γ水平,用双色荧光标记-流式细胞仪法测定脾脏细胞Th细胞亚群.结果:接种rBCG和BCG后,成年和新生小鼠血清和STLCS中IL-4水平较对照组显著降低、IFN-γ水平显著升高;无论成年鼠还是新生鼠,在CD4+的脾脏细胞中,IFN-γ+细胞的比例明显升高,而IL4+细胞比例明显降低;此外,在两个年龄组小鼠,接种rBCG者脾细胞均产生了较BCG组更高水平的IFN-γ;同时,用rBCG免疫的两组小鼠脾脏CD4+IFN-γ+的细胞比例也明显高于BCG免疫各组.结论:无论rBCG还是BCG通过腹腔注射免疫,均可诱导不同年龄BALB/c小鼠产生Th1免疫应答;表达在rBCG细胞壁上的Der p2被当成BCG的成分,为机体免疫系统所识别,抗原再次接触进一步刺激了Der p2特异性的Th1应答.这些结果表明,胞壁型抗原重组BCG可作为有效的疫苗,特异性地调节Th1/Th2平衡.
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特应性皮炎与HLA-DRB1 DQB1基因的相关性研究
目的探讨HLA-DRB1和DQB1位点基因与汉族特应性皮炎的相关性.方法用序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)方法,对59例特应性皮炎患者(来自27个家系)和60例正常对照者进行了HLA-DRB1和DQB1等位基因的分型,并分析了DRB1和DQB1基因在各组中的分布.结果特应性皮炎患者组DRB1*15,DR7,DQB1*0601等位基因频率较正常对照组增高(P＜0.05);特应性皮炎患者组DQB1*0302频率较正常对照组降低(P＜0.05).特应性皮炎家系成员中对屋尘螨抗原皮试阳性者HLA-DR7等位基因频率较皮试阴性者均显著增高(P＜0.05).结论特应性皮炎的发病可能与DRB1*15,DR7,DQB1*0601相关;DQB1*0302对特应性皮炎的发病可能起保护作用.HLA-DR7在限定对屋尘螨抗原特异性IgE反应过程中起重要作用.
