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肠干细胞与结直肠肿瘤干细胞研究进展
干细胞(stem cell,SC)是一群结构和功能未特化的原始细胞,具有长期自我更新潜能和产生至少一种终末分化细胞的能力.而肠干细胞是位于小肠隐窝下部潘氏细胞上方及结直肠隐窝的底部的成体干细胞,具有增殖和自我维持、能产生许多子代细胞并能在受损伤后再生的特性.近年较多的文献报道结直肠癌组织中存在肿瘤干细胞,而这些具有干细胞特性的瘤细胞可能来自突变的肠干细胞,本文就肠干细胞和结直肠癌肿瘤干细胞的研究进展作一综述.
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12-氧-十四烷酰佛波醇-13-癸酰酯对小鼠肠道急性放射损伤的保护作用及机制研究
目的 研究12-氧-十四烷酰佛波醇-13-癸酰酯(TPD)对小鼠肠道急性放射损伤的保护作用及其机制.方法 将20只6~8周雌性BALB/c小鼠随机分为4组:对照组、TPD组(25、50、100 μg/kg),10 Gy 60Co γ射线全身照射造成小鼠急性肠道放射损伤模型,TPD组照射前经尾静脉连续给药3 d,观察小鼠照射后20 d的生存时间,并用相同方法测定照射后3.5 d隐窝数量.大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC-6)给予1 nmol/L TPD作用12 h后经10 Gy 60 Co γ射线照射,应用CCK-8法检测照射后0、1、2、3、4 d细胞增殖情况.结果 对照组小鼠平均存活4.2 d,佳给药组(100 μg/kg)平均存活时间为10 d;对照组和佳给药组平均隐窝数量分别为(11.0 ±1.3)个、(35.1 ±1.9)个;连续测定4 d IEC-6增殖活性,给药组平均D值明显高于对照组.结论 TPD对小鼠肠道急性放射损伤有保护作用,其保护作用机制可能是通过促进小肠隐窝上皮细胞增殖、增加小肠隐窝数量来实现.
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RSPO1基因转染间充质干细胞株的构建及其促进肠隐窝的生存和增殖作用研究
目的 构建表达RSPO1的间充质干细胞株,并检测其在肠上皮生存和更新中作用.方法 将表达人RSPO1的重组表达载体pEGZ-TermR/RSPO1及辅助病毒pHIT456和pHIT60共转染293T细胞,收取上清后感染小鼠细胞系C3H10 T1/2,而后经G418抗性筛选、细胞内细胞因子染色和流式细胞术鉴定获得稳定表达RSPO1基因的细胞株;通过体外肠隐窝培养体系,观察其对小鼠肠隐窝的生存和增殖的影响.结果 成功建立了稳定表达RSPO1的间充质干细胞株,体外肠隐窝培养实验证实该细胞株可维持肠隐窝存活并促进其增殖.结论 成功建立了稳定表达RSPO1的基因转染细胞株,为探讨修复肠上皮策略提供了有力工具.
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肠道干细胞标志物研究进展
肠道干细胞(intestines stem cells,ISCs)是一群结构和功能未特化的原始细胞,其位于肠道隐窝,具有长期自我更新潜能和产生至少一种终末分化细胞的能力,但目前尚缺乏特异识别的组织学和免疫学标志物.通过小鼠遗传学标志谱系实验、长期保留标志等实验提供了鉴定和证实干细胞标志物的存在,如Musashi-1,BMPR1α、phospho-PTEN、DCAMKL1、Eph receptors、integrins、Lgr5(GPR49)等,然而它们的有效性还有待证实.本文综述了近报道的肠道干细胞标志物并且提供了鉴定和分离这些肠道干细胞的基础理论和系统模式.
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间充质干细胞移植促进放射性肠损伤肠绒毛的结构修复
目的 研究人脐带间充质干细胞(hMSCs)对放射性肠损伤小鼠存活率的影响及其对肠道损伤修复的作用.方法 选取成年C57BL/6J小鼠,分为空白对照组,腹部照射+PBS组(IR+PBS)和腹部照射+hMSCs移植治疗组(IR+hMSCs).13 Gyγ射线腹部照射造成肠损伤模型,检测30 d存活率,另外分别于照射后的第3.5天和第5.0天,HE染色观察各组十二指肠、空肠和回肠的绒毛结构改变和肠隐窝的数量变化.结果 相较于IR+PBS组的小鼠,IR+hMSCs组的小鼠存活率明显提高(P＜0.05).与空白对照组比较,13 Gyγ射线腹部照射后第3.5天,IR+PBS组的十二指肠、空、回肠绒毛均发生断裂、长度变短且数目稀少,而IR+hMSCs组肠损伤减轻.至照射后第5.0天,IR+PBS组小肠结构完整性有所改善,但达不到IR+ hMSCs组的水平(P＜0.01).照射后的第3.5天和第5.0天,IR+ hMSCs组小鼠肠隐窝的数目明显多于IR+PBS组,但低于空白对照组(均P＜0.01).结论 MSCs可以提高放射性肠损伤小鼠存活率并且对损伤肠道具有促修复作用,其有望用于放射性肠损伤的治疗.
