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  • 微囊化异种肝细胞移植治疗大鼠急性肝功能衰竭

    作者:张伟杰;官念樵;李锦文;马绪娴;左利群;郭晖;李岗山

    目的:探讨微囊化猪肝细胞异种移植治疗大鼠急性肝功能衰竭的可行性.方法:将分离的猪肝细胞微囊化后移植到Wistar大鼠腹腔内,3 d后切除大鼠80%肝叶造成肝衰模型,观察大鼠2 wk存活情况.结果:对照组、未微囊化肝细胞移植组及微囊化肝细胞移植组的2 wk存活率分别为6.2%,31.2%和56.2%,微囊化组肝细胞存活率明显较未微囊化组及对照组高.微囊化肝细胞在移植14 d后结构基本完好.结论:微囊化异种肝细胞移植提供了一种治疗急性肝功能衰竭的可行方法.

  • 异种肝细胞移植研究现状

    作者:何念海;赵文利;陈耀凯;王宇明

    uPA/RAG-2小鼠的发现为异种肝细胞移植研究提供了一个有效的动物模型.在uPA/RAG-2转基因小鼠脾内注入大鼠、土拨鼠、人肝细胞后,均能部分或完全取代小鼠肝细胞.文章主要介绍了大鼠、土拨鼠、人肝细胞在uPA/RAG-2转基因小鼠内的增生、对肝功能影响等情况,同时探讨了该模型体系存在问题及应用前景.

  • 猪肝细胞异种移植过程中移植肝细胞凋亡

    作者:陈钟;杨欣荣;戴新征

    目的 探讨猪肝细胞异种移植后移植肝细胞凋亡情况.方法 采用原位胶原酶循环灌注法分离中国实验用小型猪肝细胞.D-氨基半乳糖腹腔内注射制作大鼠急性肝衰竭模型,48h时将培养24h的猪肝细胞悬液2ml (含5.0×107个肝细胞)移植到急性肝衰竭大鼠腹腔内,观察移植后ALF大鼠2周存活率和肝功能变化;收集移植后不同时段的移植肝细胞观察其病理变化,应用Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒结合流式细胞仪检测移植肝细胞的凋亡率、坏死率及存活率.结果 2周存活率ALF大鼠为18.75%,移植组为56.25%(P<0.05).注药后48h肝功能明显恶化,移植后肝功能明显改善.移植肝细胞在腹腔内存活时间约3~5d.肝细胞体外培养24h已有凋亡出现.与培养24h时相比,移植后24h,移植肝细胞凋亡率明显上升,活率明显下降(P<0.05),坏死率无明显上升(P>0.05);与移植后24h相比,移植后48h,移植肝细胞凋亡率进一步上升,活率进一步下降(P均<0.05),坏死率仍没有明显变化(P>0.05);移植后72h,移植肝细胞凋亡率明显下降,与体外培养24h相比,差异无显著性(P>0.05),与移植48h相比,移植肝细胞活率无明显变化(P>0.05),移植肝细胞坏死率明显上升(P<0.05).结论 猪肝细胞异种腹腔内移植时,移植肝细胞仅能存活3~5d,早期免疫排斥以肝细胞凋亡为主,3d后则以肝细胞坏死为主.

  • PLA-O-CMC纳米粒子培养的猪肝细胞大鼠腹腔内移植后凋亡相关蛋白的变化

    作者:陈钟;汤飞;蔡鸿宇;官伟军

    目的 探讨聚乳酸-O-羧甲基壳聚糖(PLA-O-CMC)纳米粒子培养的猪肝细胞大鼠腹腔内移植后移植肝细胞凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax和Fas表达的变化.方法 原位胶原酶循环肝灌注法分离猪肝细胞.D-氨基半乳糖腹腔内注射制作大鼠急性肝衰竭模型.随机分为2组,48 h后分别将5 mLⅠ型胶原凝胶包埋的PLA-O-CMC纳米粒子黏附培养24 h的猪肝细胞(A组),5 mLⅠ型胶原凝胶固定培养24 h的猪肝细胞(B组)移植至急性肝衰竭大鼠腹腔内.移植量均为5.0×107个肝细胞.采用免疫组化法检测移植后3 d内移植肝细胞Bcl-2,Bax和Fas的表达情况.结果 移植后1,2,3 d,A组Bcl-2阳性细胞百分数明显高于B组(P<0.05),Bax和Fas阳性细胞百分数明显低于B组(P<0.05).结论 PLA-O-CMC纳米粒子能上调移植猪肝细胞的抗凋亡蛋白的水平和下调凋亡蛋白的水平,具有良好的抗凋亡作用.

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