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从组织中分离出一株厌氧内氏放线菌
2003年12月我院从1例"常见变异性免疫缺陷病继发增殖性脓皮病"儿童鼻组织中分离1株厌氧内氏放线菌(A.naeslundii).患儿男8岁,河北籍学生,因无明显诱因,下颏部出现一米粒大小的脓泡,后逐渐扩展,并波及整个下颏部,融合成增殖性斑块,渗岀液较多,当地诊断为"增殖性脓皮病"给予抗炎治疗后(药物不详)半年后痊愈.留有浅表性斑痕.2003年10月仍无明显诱因,鼻中隔外再次出现一米粒大小脓疱,自觉瘙痒,抓后破溃,有渗液,逐渐增大,融合成增殖斑块,迅速扩大至右鼻孔周围.
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唾液中放线菌与儿童龋病相关性的定量检测研究
目的 建立检测内氏放线菌(Actinomyces naeslundii,An)与龋齿放线菌(Actinomyces odontolyticus,Ao)的实时荧光定量PCR(RT-PCR).方法 探讨An和Ao在唾液中的定植数量与乳牙龋失补牙面指数(dmfs)的关系.方法 分别采集59名不同患龋状况儿童唾液样本,其中无龋组(dmfs=0) 19名、中龋组(dmfs=4～6)21名和高龋组(dmfs＞8)19名.提取细菌总基因组DNA,应用SYBR GreenⅡ模式的实时荧光定量PCR技术,对唾液中的内氏放线菌及龋齿放线菌进行定量检测,所得数据应用SAS9.2统计软件进行统计学分析.结果 内氏放线菌占总菌的比例在三组中有显著差异(P＜0.05),在高龋组中显著高于中龋组( P＜0.0001),在中龋组与无龋组间无显著差异(P＞0.05)；龋齿放线菌占总菌的比例在三组中无显著差异(P＞0.05).结论 儿童唾液中内氏放线菌的数量与龋病的发生发展过程有明显相关性；龋齿放线菌与儿童龋病的发生发展无明显相关性.
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放线菌的基因型及其与根面龋发生的关系
根面龋的细菌学研究始于20世纪70年代,早期研究集中于革兰阳性丝状杆菌,尤其是黏性放线菌(以下简称"黏放")和内氏放线菌(以下简称"内放").80年代中后期,变链球菌在根面龋中的作用逐渐受到重视.目前认为根面龋是以变链球菌,放线菌和乳杆菌为主的混合感染.
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内氏放线菌株ATCC 19246菌毛诱导成纤维细胞L929产生IL-1β,IL-6 TNR-α的研究
目的 提取内氏放线菌菌毛,并检测内氏放线菌菌毛是否能引起成纤维细胞表达释放IL-1β,IL-6,TNF-α.方法 用搅拌法提取内氏放线菌19246菌毛,电镜鉴定菌毛的纯度,用提取的菌毛诱导小鼠成纤维细胞L929.48 h 后收集细胞培养上清,Western-blotting分别检测细胞培养上清中IL-1β,IL-6,TNF-α.结果 电镜负染观察显示内氏放线菌菌毛与菌体充分分离,得到菌毛粗提物.Western-blotting结果显示菌毛处理过的细胞培养基中可检测到IL-1β、TNF-α、IL-6,而未经菌毛处理过的细胞培养基中未见IL-1β、TNF-α、IL-6.结论 内氏放线菌19246菌毛初提物可以诱导L929细胞产生IL-1β、TNF-α、IL-6.
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内氏放线菌尿素酶对牙菌斑生物膜酸碱平衡调节作用的初步研究
目的:初步探讨在牙菌斑生物膜天然环境中,内氏放线菌尿素酶能否发挥高效尿素水解反应,以及尿素水解对口腔环境中pH值的调节作用.方法:通过酶促反应动力学实验寻找内氏放线菌尿素水解的适条件,监测尿素水解调节细菌产酸后的pH值变化.采用SPSS软件包,对酶促动力学实验数据进行线性回归与相关分析.结果:内氏放线菌尿素酶米氏常数Km--7.5mmol/L,在口腔中正常尿素浓度3～10mmol/L范围内,内氏放线菌尿素酶催化活性大约保持在大活性的20%～63%;内氏放线菌尿素酶适pH值=6.5,但是在牙菌斑临界pH 5.0,尿素酶活性仍保持40%的大活性;在口腔正常尿素浓度范围内,内氏放线菌尿素水解产物中和细菌产酸后,pH值不会下降到牙菌斑临界pH 5.0以下.结论:在牙菌斑生物膜中,内氏放线菌尿素酶可以发挥高效尿素水解反应,尿素水解对口腔环境pH值具有明显的调节作用.
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镍铬合金析出的镍离子对内氏放线菌糖代谢和尿素代谢的影响
目的研究镍铬合金析出的镍离子对内氏放线菌糖代谢和尿素代谢的影响.方法分别用含0.260 mg/L和0.625mg/L镍离子的BHI培养基厌氧培养内氏放线菌WVU45型菌株,计算pH的变化值,检测乳酸脱氢酶(LDH)含量,测定尿素酶活性.结果镍离子对内氏放线菌产酸和产乳酸脱氢酶的作用不明显(P＞0.05),对尿素酶活性有促进作用(P＜0.05).结论镍铬合金析出的镍离子可以增加内氏放线菌尿素酶活性,促进尿素代谢.
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多乐氟联合窝沟封闭剂对龋病患儿唾液中放线菌的影响
目的 探讨多乐氟联合窝沟封闭剂治疗后对儿童唾液内的内氏放线菌(Actinomyces naeslundii,An)和龋齿放线菌(Actinomyces odontolyticus,Ao)的影响.方法 收集45例多乐氟联合窝沟封闭剂和35例单纯行窝沟封闭剂治疗前后的龋病患儿唾液,提取细菌总DNA,实时荧光定量PCR检测唾液总菌、An和Ao含量.结果 高龋、中龋患儿唾液An、Ao数量均显著高于无龋患儿(P＜0.05).高龋患儿和中龋患儿之间唾液An、Ao数量及百分含量差异均无统计学意义(P＞0.05).多乐氟联合窝沟封闭剂治疗后,龋病患儿唾液An和Ao含量显著降低(P＜0.05),且比单纯窝沟封闭剂治疗后下降更为明显,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 多乐氟联合窝沟封闭剂对龋病的保护作用可能与抑制口腔An和Ao生长有关.
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内氏放线菌细胞壁成分诱导人成纤维细胞产生白细胞介素-1β、-6和肿瘤坏死因子α的研究
目的 探讨内氏放线菌菌株ATCC19246细胞壁成分能否诱导人成纤维细胞产生白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNFα).方法 采用提取脂磷壁酸(LTA)的方法 提取内氏放线菌菌株ATCC19246细胞壁成分,用3种质量浓度(分别为1、10、100 mg/mL)提取物分别刺激人成纤维细胞THP-1细胞株,用ELISA方法 测定细胞培养上清中的IL-1β、IL-6、TNFα.结果 THP-1细胞株可以产生一定量的IL-1β、IL-6、TNFα,以质量浓度为10 mg/mL时诱导产生的量高.结论 内氏放线菌细胞壁提取物可以诱导THP-1细胞株产生IL-1β、IL-6、TNFα,但随着质量浓度变化产生的量存在差异.
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影响内氏放线菌尿素酶活性相关因素的初步研究
目的 探讨多种生态环境因素对内氏放线菌尿素酶活性的影响.方法 采用生物化学的方法检测氮源物质、糖源物质、酸性环境对内氏放线菌尿素酶活性的影响.结果 当细菌生长环境中pH值呈弱酸性、或氮源物质缺乏或糖源物质丰富,内氏放线菌尿素酶活性均有不同程度提高.在pH6.0,氮源缺乏而糖源丰富的培养条件下,内氏放线菌尿素酶活性可高达149.7 nmol/min·mg cell protein.结论 氮源物质、糖源物质、pH值均是影响内氏放线菌尿素酶活性的环境因素;当牙菌斑致龋性增强时,内氏放线菌尿素活性表达可能也随之提高.
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尿素水解对内氏放线菌增殖及耐酸力的影响
目的:通过研究尿素水解对内氏放线菌的生长和耐酸能力的影响,了解尿素水解对内氏放线菌的生理作用.方法:比较内氏放线菌利用尿素或其它物质作为氮源的生长浊度;采用耐酸实验研究尿素水解与细菌耐酸能力的关系.结果:与其他口腔中常见氮源物质相比,尿素可以促进内氏放线菌生长,获得更高的A值;在临床牙菌斑能够检测到的pH 4.0～7.0范围内,尿素水解可以提高内氏放线菌的耐酸性,在pH 3.0,尿素水解对细菌没有保护作用.结论:尿素水解可以促进内氏放线菌生长,提高酸性环境中细菌的耐酸能力,增强细菌的生存竞争力.
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部分天然药物对内氏放线菌生长和产酸影响的体外研究
目的:研究不同天然药物对内氏放线菌生长和产酸的影响.方法:选用内氏放线菌WVU627作为实验菌株.测定川芎、血藤、五倍子等11种天然药物的低抑菌浓度MIC.再测经实验后的终pH.结果:当药物浓度低于或等于8.000mg/ml时,各种药物对内氏放线菌的生长都有一定的抑制作用,五倍子较强.槟榔、茶多酚、川芎、大黄、蜂房、黄芩、三七、血藤、五倍子和儿茶对内氏放线菌的产酸具有一定的抑制能力,而白芷没有明显的抑制作用.结论:槟榔、茶多酚、川芎、大黄、蜂房、黄芩、三七、血藤、五倍子和儿茶对内氏放线菌的生长和产酸都有一定的抑制作用.
