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外周血单个核细胞 microRNA-206在类风湿关节炎患者中的诊断意义
目的：：探讨类风湿关节炎患者的诊断中,外周血单个核细胞microRNA-206的表达意义。方法：以54例类风湿性关节炎患者为研究对象,设为观察组,并选取同期健康检查者40例为对照组。分离,并比较两组患者外周血单个核细胞,测量单个核细胞中的锌指样转录因子4(KLF4)、孤儿核受体γt(RORyt)RNA及microRNA-206的表达。结果：观察组患者的外周血单个核细胞microRNA-206表达明显低于对照组,P<0.05；观察组患者的孤儿核受体γt(RORyt)RNA、锌指样转录因子4(KLF4)的水平均明显高于对照组,P均<0.05。结论：外周血单个核细胞microRNA-206在类风湿关节炎中的表达与孤儿核受体γt(RORyt)RNA、锌指样转录因子4(KLF4)的水平呈反比例关系,与疾病的发生和发展关系密切。
关键词： 类风湿关节炎 外周血单个核细胞 microRNA-206 -
慢性疼痛患者治疗前后血浆miR-206表达差异的临床研究
目的:观察慢性疼痛患者治疗前后血浆miRNA-206的表达水平改变,探索miRNA-206在慢性疼痛发病及治疗中的作用.方法:选择西南医科大学附属中医医院疼痛科2013年6月至2014年6月期间符合慢性疼痛患者(n=30)与年龄、性别比例相一致的健康成人(n=30)进行比较.慢性疼痛患者组于治疗前后分两次进行视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、自评抑郁量表评分(SelfRating Depression Scale,SDS)和简化麦吉尔疼痛量表评分(Short-form of McGill Pain Questionnaire,SFMPQ),并用实时荧光定量PCR法检测血浆miRNA-206表达水平.对照组仅检测血浆中miRNA-206的表达水平.结果(1)慢性疼痛患者组较对照组血浆miRNA-206的相对表达量显著升高(P＜0.05)(2)慢性疼痛患者组治疗后较治疗前血浆miRNA-206的相对表达量、VAS、SDS及SF-MPQ均显著降低(P＜0.05).结论:miRNA-206在慢性疼痛的发病机制中发挥重要作用,并有可能作为慢性疼痛的治疗靶点.
关键词： microRNA-206 慢性疼痛 VAS SDS SF-MPQ -
呼吸道合胞病毒毛细支气管炎婴幼儿外周血单个核细胞microRNA-206表达水平的变化
目的 检测呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎婴幼儿外周血单个核细胞(PBMCs) microRNA-206 (miR-206)的表达水平,探讨其在毛细支气管炎发生发展中的作用.方法 收集35例RSV毛细支气管炎婴幼儿急性期和恢复期及25名健康对照儿童外周血标本,分离PBMCs,经佛波酯(PMA)和离子霉素刺激后提取总RNA,反转录成互补DNA.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测PBMCs中miR-206及锌指样转录因子4(KLF4)的相对表达量,酶联免疫吸附试验检测血浆白细胞介素-17 (IL-17)水平.结果 RSV毛细支气管炎急性期、恢复期患儿及健康对照组儿童miR-206水平分别为0.055±0.018、0.187±0.069和0.204±0.075,急性期分别低于恢复期与健康对照组,组间差异有统计学意义(P＜0.01);而恢复期与健康对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).KLF4 mRNA水平分别为0.588±0.161、0.086±0.024和0.075±0.019,急性期分别高于恢复期和健康对照组,组间差异有统计学意义(P＜0.01);而恢复期和健康对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).IL-17水平分别为(58.26±25.88) ng/L、(9.87±3.01) ng/L和(7.65±2.16) ng/L,急性期分别高于恢复期和健康对照组,组间差异有统计学意义(P＜0.01);而恢复期和健康对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).急性期miR-206水平与KLF4 mRNA相对表达量和血清IL-17水平均呈负相关(r=-0.624、-0.609,P均＜0.01),KLF4 mRNA相对表达量与血清IL-17水平呈正相关(r=0.662,P＜0.01).结论 miR-206在RSV感染引起的毛细支气管炎中起一定作用,低表达miR-206的患儿可能在感染RSV后患毛细支气管炎的易感性增加.
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重症肌无力患者外周血单个核细胞中KLF4、RORγt与miR-206水平变化的临床意义
目的 检测重症肌无力患者外周血单个核细胞(PBMC)中锌指样转录因子4(KLF4)、孤儿核受体γt(RORγt)、microRNA-206的表达水平,探讨它们在重症肌无力患者发病中的作用.方法 采集重症肌无力患者及健康对照者清晨空腹外周血标本,梯度离心得到人PBMC.采用实时荧光定量聚合酶链反应检测PBMC中KLF4、RORγt mRNA、microRNA-206的相对表达量.结果 重症肌无力患者PBMC中KLF4 mRNA为0.594±0.181,健康对照者为0.089±0.025;重症肌无力患者PBMC中RORγt mRNA表达水平为0.570±0.266,健康对照者为0.067±0.016,重症肌无力患者均显著高于健康对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).重症肌无力患者PBMC中microRNA-206表达水平为0.053±0.018,健康对照者为0.134±0.056,重症肌无力患者显著低于健康对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).重症肌无力患者PBMC中KLF4、RORγt相对表达量与microRNA-206表达水平均呈负相关(r=-0.675,P＜0.05,r=-0.806,P＜ 0.05).结论 重症肌无力患者PBMC中KLF4mRNA、RORγtmRNA的表达水平增高及microRNA-206表达水平下降,和疾病的发生和发展有密切的关系.
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MicroRNA-206可能通过调控Cx43表达调节人乳腺癌细胞的转移能力
目的 通过干预人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231中微小RNA206(microRNA-206,miR-206)的表达,观察连接蛋白43(connexin43,Cx43)的表达以及细胞在增殖、迁移和侵袭能力等方面的变化.方法 使用荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测正常乳腺细胞MCF-10A和MCF-7、MDA-MB-231细胞中miR-206的表达水平.通过构建慢病毒载体转染MCF-7及MDA-MB-231细胞,分别升高和降低miR-206的表达水平;采用qRT-PCR和Westem blot法检测转染后Cx43的mRNA及蛋白表达水平的变化.利用CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力.结果 MCFJ和MDA-MB-231中miR-206的表达均明显低于正常细胞株;其中MCF-7细胞中miR-206表达水平较MDA-MB-231中低,Cx43表达水平较MDA-MB-231中高.转染慢病毒包装靶向增强miR-206表达的shRNA载体LV-hsa-miR-206(1569-11)后,MCF-7细胞的miR-206表达明显上升,Cx43的mRNA表达水平及蛋白表达水平均明显下降;细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显降低.转染慢病毒包装靶向抑制miR-206表达的shRNA载体LV-hsa-miR-206-inhibition后,MDA-MB-231细胞的miR-206表达明显下降,Cx43 mRNA表达水平及蛋白表达水平均明显上升;细胞的增殖、侵袭和迁移能力明显增强;以上差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 干预miR-206的表达可导致Cx43表达水平的变化,并影响人乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231的增殖、迁移和侵袭能力;miR-206可能通过抑制Cx43的表达调节了乳腺癌细胞的转移能力.
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miRNA-206和IGF-1在早发型子痫前期孕妇血清中的表达水平及临床意义
目的 探究microRNA-206(miRNA-206)和胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)在早发型子痫前期(early onset preeclampsia,EOPE)孕妇血清中的表达水平及临床意义.方法 选择2016年1月至2017年2月广东省妇幼保健院收治的105例孕妇为研究对象,包括35例正常晚期妊娠孕妇(正常妊娠组)、35例轻度EOPE孕妇(轻度EOPE组)和35例重度EOPE孕妇(重度EOPE组).所有孕妇均在入院次日清晨空腹状态下采集肘静脉血,实时定量PCR( qRT-PCR)技术检测各组血清miRNA-206 水平,酶联免疫(ELISA)检测各组血清IGF-1水平;利用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miRNA-206与IGF-1水平对EOPE的诊断效能.结果 ①轻度、重度EOPE组血清miRNA-206水平均高于正常妊娠组(t=2. 689、5. 404,P=0. 009、0. 000),重度 EOPE组高于轻度 EOPE组(t=2. 139,P=0. 036).② 轻度、重度EOPE组血清IGF-1水平均低于正常妊娠组(t=2. 853、5. 136,P=0. 006、0. 000),重度 EOPE组低于轻度EOPE组(t=2. 201,P=0. 031).③ EOPE患者血清 miRNA -206 水平与 IGF -1 水平呈负相关关系(r =-0. 364,P=0. 002).④ ROC曲线分析结果发现,血清miRNA-206诊断EOPE的曲线下面积为0. 749,其诊断的敏感度为67. 68 %、特异度为73. 72 %;血清IGF-1诊断EOPE的曲线下面积为0. 668,其诊断的敏感度为40. 02 %、特异度为96. 77 %.结论 EOPE患者miRNA-206表达水平较健康孕妇高、IGF-1血清表达水平较健康孕妇低,提示监测血清miRNA-206、IGF-1水平对早期诊断EOPE具有一定的参考价值.
关键词： 早发型子痫前期 血清 microRNA-206 胰岛素样生长因子-1 -
类风湿关节炎患者外周血单个核细胞microRNA-206表达水平的变化及意义
目的：探讨外周血单个核细胞microRNA-206在类风湿关节炎发生中的作用。方法收集2012年12月～2013年11月确诊的类风湿关节炎患者27例及25例健康对照外周血标本，分离 PBMCs。采用实时定量 PCR（qRT-PCR）方法检测PBMCs中microRNA-206及锌指样转录因子4（KLF4）、孤儿核受体γt（RORγt）mRNA相对表达量。统计学处理采用非配对t检验和 Spearman相关分析。结果类风湿关节炎患者外周血单个核细胞 microRNA-206表达的水平显著低于健康对照组（0.056±0.019 vs 0.138±0.057，t＝3.103，P＜0.01），KLF4 mRNA和RORγt mRNA表达水平显著高于健康对照组（0.604±0.183 vs 0.098±0.027，t＝6.651，P＜0.01；0.583±0.271 vs 0.069±0.018，t＝7.438，P＜0.01），类风湿关节炎患者外周血单个核细胞microRNA-206表达水平与 KLF4及 RORγt相对表达量均呈负相关（r＝-0.639，P＜0.01；r＝-0.842，P＜0.01）。结论类风湿关节炎患者外周血单个核细胞 microRMA-206表达的水平下降，与疾病的发生发展关系密切。
