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囊胚培养和移植的临床应用
目的:探讨囊胚培养及移植的结局以及囊胚质量对其影响.方法:选择57例因输卵管及男性因素受体精-胚胎移植治疗,且以促进性腺激素反应良好者,常规取卵、受精后采用G1/G2序贯培养,5D或6D(天)选择3期以上胚胎移植.观察囊胚的植入率、临床妊娠以及囊胚分期对其影响.结果:(1)平均取卵14.84个,受精卵10.33个,受精率69.6%;5D及6D平均形成囊胚3.40个,每受精卵的囊胚形成率为32.9%.51例有一个或以上可移植囊胚,平均移植胚胎2.31个,获临床妊娠24例,囊胚植入率为31.2%,临床妊娠率为47.1%.(2)按囊胚质量分期分组,移植至少一个扩展期囊胚组30例(58.8%),植入率及临床妊娠率分别为40%及60%;无扩展期囊胚组21例,植入率及临床妊娠率分别为18.8%及28.6%.经统计学分析,两组植入率差异有非常显著性(P＜0.01),临床妊娠率差异有显著性(P＜0.05).结论:采用序贯培养法进行囊胚培养移植切实可行,囊胚的质量对移植结局有影响.
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辅助生殖技术中废弃胚胎继续培养的影响因素分析
目的 探讨辅助生殖技术中废弃胚胎继续培养的潜能,为今后利用废弃胚胎建立胚胎干细胞系提供参考.方法 将D1观察为无原核(0PN)、单原核(1PN)、多原核(≥3PN)和受精正常(2PN),D3评分为Ⅳ级的胚胎继续培养至囊胚期,观察囊胚形成率.比较年龄、受精方式、不同来源、D3卵裂球细胞数、D3胚胎碎片与囊胚形成率的关系.结果 共收集143个取卵周期499个废弃胚胎进行继续培养,形成囊胚105个(21.04％),优质囊胚为24个(22.86％).年龄、不同来源、D3卵裂球的奇偶性、D2卵裂球的数目各组之间差异不显著(P＞0.05)；受精方式、D3卵裂球数目、胚胎碎片各组之间差异显著(P＜0.05).结论 部分废弃胚胎有继续发育成囊胚的潜能,受精方式、D3卵裂球的数目和胚胎碎片情况可能为囊胚形成的主要影响因素.
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囊胚培养与移植
随着辅助生殖技术(ART)的广泛应用,体外受精-胚胎移植(IVF-ET)已成为治疗不孕症的主要手段,如何获得高质量的胚胎,并在提高妊娠率的同时减少多胎妊娠的发生率是IVF-ET治疗中的重要问题.有研究证明进行囊胚期培养和移植较卵裂期移植能获得更高的妊娠率并减少多胎率的发生.
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移植冷冻后剩余可利用胚胎继续囊胚培养的潜在价值分析
目的:观察IVF/ICSI-ET治疗周期中第三天(D3)移植冷冻后剩余可利用胚胎继续体外培养的囊胚形成情况及意义.方法:将D3移植冷冻后剩余的可利用胚胎通过序贯培养至囊胚阶段,将可利用囊胚进行冷冻,在未妊娠患者下一周期将其解冻移植,比较同时期通过冷冻解冻D3移植后的胚胎的植入率、妊娠率、多胎率和流产率.结果:402例不孕症患者D3移植冷冻后剩余的胚胎2807枚形成囊胚2001枚,可利用囊胚1074枚,将可利用囊胚冷冻;其中43例未妊娠患者的65枚囊胚在下一周期解冻后移植,其植入率47.0%极显著高于878例患者的1814枚卵裂期胚胎解冻后移植的植入率21.3%;而妊振率65.1%显著高于解冻后卵裂期胚胎的妊振率37.9%;多胎率和流产率无性显著差异.结论:囊胚体外培养可以筛选出具有发育潜能的剩余胚胎提高可利用胚胎数和临床妊娠率.
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子宫内膜细胞共培养联合序贯成组培养对人早期冷冻胚胎发育的支持作用
目的 探讨子宫内膜细胞体外共培养联合序贯成组培养对人早期废弃冷冻胚胎发育的影响.方法 获取人子宫内膜细胞并冷冻保存.共培养前,解冻内膜细胞并培养至30％～50％汇合时解冻人早期废弃胚胎,胚胎冷冻年限为3～10年.2～3个胚胎一起转移至已更换胚胎培养液的内膜细胞上行成组共培养,待胚胎发育至8-细胞期更换为囊胚培养液,观察胚胎复苏存活、桑葚胚及囊胚形成情况.结果 人子宫内膜细胞生长良好.采取内膜细胞联合序贯成组培养废弃胚胎33个,总体桑葚胚形成率45.5％,囊胚形成率27.2％,其中Ⅰ～Ⅱ级胚胎桑葚胚、囊胚形成率皆高于Ⅲ～Ⅳ胚胎,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 子宫内膜细胞共培养联合序贯成组培养对人早期冷冻时限较长的胚胎发育具有积极的支持作用,可为充分利用宝贵资源进行胚胎实验室质控、胚胎干细胞研究等领域提供支持性方案.
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人早期胚胎体外培养中自体子宫内膜细胞共培养与序贯培养联合系统的建立
目的:建立早期胚胎与自体子宫内膜细胞共培养与序贯培养联合系统的培养方法.方法:黄体中期获取子宫内膜,细胞培养后程序化冻存.取卵前解冻自体内膜细胞,受精后将双原核胚转移至已更换分裂期胚胎培养液的自体子宫内膜细胞行共培养,取卵后72 h更换囊胚培养液行共培养.结果:人黄体中期子宫内膜有良好的体外培养活力,程序化冷冻与快速复温后细胞存活高,自体胚胎共培养的应用比率为74.04%.种植前各时期早期胚胎联合应用序贯培养液,在自体内膜细胞上生长良好.建立联合培养系统的临床妊娠率68.83%,种植率44.23%.结论:人早期胚胎与自体子宫内膜细胞共培养联合序贯培养系统的建立,为早期胚胎体外培养的模式提供了一种新的思路,力求提高种植前胚胎的质量与发育潜能.
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对废弃胚胎行囊胚培养在体外受精-胚胎移植中的意义
目的：探讨对不可移植的废弃胚胎行囊胚培养在体外受精-胚胎移植（IVF- ET）中的意义。方法通过囊胚序贯培养法将d3废弃胚胎培养至囊胚期。比较不同来源胚胎及d3胚胎的卵裂球数与囊胚形成的关系；利用废弃胚胎囊胚形成情况对体外受精妊娠结局进行预测；并将获得的可移植囊胚行胚胎移植及冷冻。结果共收集782例患者的1962个废弃胚胎，经序贯培养，形成囊胚376枚（19.2%）；1PN胚胎、0PN胚胎、d 3卵裂球数＞6的胚胎囊胚形成率较高（均P＜0.05）；废弃胚胎中有囊胚形成者的临床妊娠率明显高于无囊胚形成者（P＜0.05）；由2PN胚胎形成囊胚共64枚，其中10枚囊胚行移植，剩余囊胚行玻璃化冷冻保存，囊胚移植后临床妊娠率66.7%。解冻移植囊胚24个周期，妊娠周期13个，妊娠率54.2%。囊胚移植共获得健康婴儿18名。结论IVF- ET中废弃胚胎部分可发育为囊胚，选择合适的胚胎行囊胚培养，能获得部分可用胚胎，提高胚胎利用率。
关键词： 体外受精- 胚胎移植 废弃胚胎 囊胚 序贯培养 -
人胚胎囊胚期培养及相关因素研究
目的 分析受精后第3天(D3)胚胎的细胞数、质量分级与囊胚形成之间的关系，比较不同囊胚培养液的囊胚形成率。方法 将体外授精(IVF)患者胚胎移植后的剩余胚胎54个，移入含10％合成血清代用品(SSS)的囊胚培养液(IVC-Three、Blastocyst)或人输卵管液(HTF)中，每天观察胚胎卵裂情况，直至退化或受精后第7天。结果 总囊胚形成率29.6％，囊胚形成率与D3胚胎细胞数呈显著正相关(r=0.99，P＜0.01)，胚胎质量级别1～2.5级的卵裂球较3～4级者具有更高的囊胚形成率(34.9％比9.1％)。IVC-Three培养液中囊胚形成率达56.1％，与其他两种培养液比较有显著差异(x21=5.77，x22=3.95，P＜0.05)。结论 序贯培养的囊胚期胚胎培养技术是简便可行的。D3胚胎细胞数及质量分级与囊胚形成有密切关系。IVC-Three培养液是良好的囊胚培养液，可应用于临床。
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序贯培养与囊胚移植术的临床护理
目的：探讨序贯培养与囊胚移植术的佳护理方法，提高囊胚移植患者的临床妊娠率和护理满意度。方法对568例序贯培养-囊胚移植患者开展术前宣教、术中配合与术后指导3个阶段的护理，重视其心理护理。于移植日给患者发放满意度调查表。结果568例序贯培养-囊胚移植患者的临床妊娠率为57．07％，护理满意度为99．12％。结论优质的整体护理有利于提高囊胚移植患者的临床妊娠率和护理满意度。
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胚胎体外培养的研究进展
胚胎质量的优劣是影响ART成功率的重要因素,而对其起决定作用的是胚胎体外培养条件,其中包括培养液的成分和培养体系.在过去的25年中,培养液的构成及应用已经发生了很大的变化,培养体系也从单一培养发展到序贯培养、共培养和微流体培养.近年来人们对胚胎早期发育和对环境的需求以及自身的代谢特性有了不断的认识,该文就胚胎体外培养系统及培养液的改进进行综述.
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剩余胚胎继续培养囊胚的潜在价值
目的:探讨在新鲜周期中,经IVF/ICSI-ET、冷冻后的剩余胚胎在体外继续培养至囊胚的意义.方法:在新鲜周期中,将D3天发育的胚胎选择评分较高的进行移植,部分胚胎玻璃化冷冻保存后,所剩余的胚胎通过序贯微滴培养法在体外继续培养至囊胚阶段,将优质囊胚进行玻璃化冷冻.在未妊娠患者下一周期将其解冻、移植,比较同时期D3通过玻璃化冷冻解冻移植后的卵裂期胚胎与囊胚期胚胎的植入率、妊娠率、单胎率和多胎率.结果:422例不孕症患者D3天移植冷冻后剩余的胚胎1842枚形成囊胚437枚(23.72％),优质囊胚315枚(17.10％)；将优质囊胚行玻璃化冷冻；其中42例患者的62枚囊胚在下一周期解冻后移植,其植入率(41.94％)极显著高于243例患者的536枚卵裂期胚胎解冻后移植的植入率(20.90％)(P＜0.01)；而妊娠率(54.76％)显著高于解冻后卵裂期胚胎的妊娠率(36.63％)(P＜0.05)；但是单胎率(71.26％vs 85.71％)和多胎率(28.74％ vs 13.64％)无显著差异(P＞0.05).结论:囊胚体外培养可以筛选出具有发育潜能的剩余胚胎,大限度地利用胚胎,从而提高可用胚胎数和临床妊娠率.
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不同培养条件对人类体外授精与胚胎移植妊娠率的影响
目的 探讨模拟体内环境改善培养系统对胚胎发育及临床妊娠率的影响。方法 对217个周期的IVF—ET治疗分为四组，对不同的培养液、蛋白来源、培养时间、培养方式进行了比较分析。结果 对四组的综合研究表明序贯培养液添加人血清白蛋白进行序贯培养3天获得了48.2％的临床妊娠率，胚胎平均评分8.6分，移植胚胎平均评分9.1分，显著高于其它方案。对蛋白来源和培养时间的配伍研究表明使用人血清蛋白并培养3天，胚胎平均评分(7.1分)、移植胚胎平均评分(8.5分)及临床妊娠率(33.3％)显著高手使用血清培养2天。结论 根据不同时期的需要，选择不同的培养液，添加有益的蛋白来源，延长体外培养时间至3天，可有效改善胚胎质量，筛选优质胚胎移植，从而提高临床妊娠率。
