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MAPK通路对胚胎干细胞向心肌细胞分化的作用
目的 研究促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)通路对胚胎干细胞诱导分化心肌细胞的影响.方法 采用10-4M维生素C诱导小鼠R1胚胎干细胞分化为心肌细胞.以未经处理ESC心肌细胞分化(ESCM)相应时间点的总RNA作对照组,20 μM细胞外信号调节激酶(ERK)特异性抑制剂PD98059和20 μM p38 MAPK特异性抑制剂SB203580孵育细胞,诱导分化后期通过计数搏动拟胚体的比率和实时定量聚合酶链式扩增反应(RT-PCR)和免疫印迹(WesternBlotting)检测心肌标志物的表达确定其作用.结果 与对照组相比,诱导分化第14天,SB203580组搏动拟胚体比率显著降低(24％ vs.56％,P=0.025);RT-PCR和Western Blotting结果表明SB203580、PD98059组均可下调心肌特异性标志物表达,SB203580组更加明显.结论 MAPK通路与心肌细胞分化有关,以p38信号通路为主.
关键词： 胚胎干细胞 心肌分化 促分裂素原活化蛋白激酶 -
NNRG/ErbB信号通路在神经系统中的研究进展
神经调节蛋白(NRG)是一类细胞间信号转导蛋白,其功能性受体是由ErbB酪氨酸激酶受体组成,属于跨膜酪氨酸激酶的表皮生长因子受体家族成员,包括表皮生长因子受体(也称ErbB1)、ErbB2/人源的ErbB2/neu、ErbB3/HER3和ErbB4/HER4.NRG通过诱导ErbB受体构象变化,使ErbB蛋白形成二聚体,继而激活酪氨酸激酶,引起C-末端的自身酪氨酸磷酸化和反式酪氨酸磷酸化,引起下游信号通路转导从而发挥其生物学作用.
关键词： 神经调节蛋白 ErbB受体 神经系统 磷脂酰肌醇3激酶 促分裂素原活化蛋白激酶 -
白细胞介素1受体相关激酶4基因沉默抑制人成骨样细胞相关基因的表达
背景：造成假体周围骨溶解的完整分子机制目前尚未完全清楚。假体周围骨溶解、吸收是人工关节松动的典型病理生理过程。白细胞介素1通过MAPK信号通路影响骨吸收进程。
目的：实验通过观察siRNA沉默白细胞介素1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor-associated kinase-4， IRAK-4)基因表达对人成骨样细胞株MG63的MAPK信号转导通路的影响，为防治人工关节置换后假体周围骨溶解提供实验基础。
方法：以Lipofectamine 2000为载体将IRAK-4-siRNA转染入MG63细胞。实验分为3组，空白组不加入任何转染试剂；对照组以 scrambled siRNA 序列进行转染；沉默组以特异性 IRAK-4-siRNA 序列进行转染。Western blot检测靶细胞细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK基因的表达。
结果与结论：与对照组相比，靶基因沉默组的IRAK-4 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。MG63细胞 IRAK-4表达下调后，与空白组和对照组相比，c-Jun 氨基末端激酶1/2P46、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2、磷酸化p38MAPK表达下调分别为62%，64%，68%(P <0.05)。结果证实，siRNA沉默IRAK-4基因抑制人成骨样细胞株MG63细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK基因的表达。 -
低氧激活ERK/JNK通路促进Smad2/3蛋白磷酸化诱导小鼠心脏成纤维细胞表型转换的实验研究
目的 研究体外低氧诱导小鼠心脏成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)向心脏肌成纤维细胞(cardiac myofibroblasts,CMFs)表型转换过程中,促分裂素原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)信号通路与Smad2/3蛋白磷酸化的关系.方法 新生小鼠第1代CFs低氧(37℃、3％O2)无血清培养48 h,免疫荧光检测α-SMA蛋白；新生小鼠CFs给予3种MAPK(ERK、JNK和p38)特异性抑制剂常氧培养1h,进行低氧培养30 min,免疫印迹检测ERK、JNK、p38和Smad2/3蛋白磷酸化水平.结果 ①低氧显著上调新生小鼠CFs中α-SMA蛋白的表达；②低氧能显著地促进ERK、JNK和P38蛋白磷酸化,PD98059(ERK特异性抑制剂)、SP600125(JNK特异性抑制剂)和SB203580(P38特异性抑制剂)能抑制低氧诱导的ERK、JNK和P38蛋白的磷酸化；③PD98059(ERK特异性抑制剂)和SP600125(JNK特异性抑制剂)能抑制低氧诱导的Smad2/3蛋白的磷酸化,SB203580(P38特异性抑制剂)无此作用.结论 ①低氧可诱导小鼠CFs细胞发生表型转化为CMFs；②ERK和JNK信号通路能调控Smad2/3蛋白的磷酸化表达；③MAPK和Smad信号通路可能参与低氧诱导的小鼠CFs细胞的表型转化.
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顺铂肝毒性机制的研究进展
顺铂是一种高效、广谱的抗肿瘤药物,但其临床应用受到耳毒性、肾毒性、肝毒性等不良反应限制,其中耳毒性和肾毒性已进入动物和临床研究阶段,但肝毒性尚未引起足够重视.因此,本文概述近年来国内外顺铂肝毒性机制的新研究现状,为确立临床有效防护措施提供参考.
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变应性鼻炎患者中MAPK和NF-κB信号通路的表达变化
目的 探讨变应性鼻炎(AR)患者中促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)和核转录因子(NF-κB)信号通路的表达及变化.方法 采用酶联免疫吸附试验检测AR患者(试验组)和健康体检者(对照组)血清中肿瘤坏死因子-α(T N F-α)、白细胞介素(IL)-Iβ、IL-4、p38M A PK和N F-κB的表达.结果 与对照组相比,试验组中T N F-α、IL-Iβ、IL-4、p38M A PK和N F-κB的表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 A R患者血清中 T N F-α、IL-Iβ、IL-4、p38M A PK和N F-κB呈过度表达状态;检测患者血清中的相关细胞因子,N F-κB有利于了解患者过敏状态并协助AR的诊断.
关键词： 变应性鼻炎 促分裂素原活化蛋白激酶 核转录因子 酶联免疫吸附试验
