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白细胞介素1受体相关激酶4基因沉默抑制人成骨样细胞相关基因的表达
背景：造成假体周围骨溶解的完整分子机制目前尚未完全清楚。假体周围骨溶解、吸收是人工关节松动的典型病理生理过程。白细胞介素1通过MAPK信号通路影响骨吸收进程。
目的：实验通过观察siRNA沉默白细胞介素1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor-associated kinase-4， IRAK-4)基因表达对人成骨样细胞株MG63的MAPK信号转导通路的影响，为防治人工关节置换后假体周围骨溶解提供实验基础。
方法：以Lipofectamine 2000为载体将IRAK-4-siRNA转染入MG63细胞。实验分为3组，空白组不加入任何转染试剂；对照组以 scrambled siRNA 序列进行转染；沉默组以特异性 IRAK-4-siRNA 序列进行转染。Western blot检测靶细胞细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK基因的表达。
结果与结论：与对照组相比，靶基因沉默组的IRAK-4 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。MG63细胞 IRAK-4表达下调后，与空白组和对照组相比，c-Jun 氨基末端激酶1/2P46、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2、磷酸化p38MAPK表达下调分别为62%，64%，68%(P <0.05)。结果证实，siRNA沉默IRAK-4基因抑制人成骨样细胞株MG63细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK基因的表达。 -
白细胞介素1受体相关激酶4活性在皮瓣缺血再灌注损伤中的作用
背景：白细胞介素1受体相关激酶4活性引发炎症及感染的作用已得到广泛认可，但其对皮瓣缺血再灌注损伤是否有影响尚无文献报道。目的：探讨白细胞介素1受体相关激酶4活性在皮瓣缺血再灌注损伤中的意义。方法：将36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注损伤组、白细胞介素1受体相关激酶4抑制剂组，每组12只。制备右下腹岛状皮瓣缺血再灌注损伤模型，白细胞介素1受体相关激酶4抑制剂处理组于再灌注前腹腔注射1 mL白细胞介素1受体相关激酶1/4抑制剂(100μmol/L)，分别采集缺血再灌注后1，2，4，6 h的皮瓣行组织病理学观察，取缺血再灌注后1 h的皮瓣组织行白细胞介素1受体相关激酶4的蛋白表达量，并于术后7d计算皮瓣存活比例。结果与结论：组织病理学观察显示，与缺血再灌注损伤组相比，白细胞介素1受体相关激酶4抑制剂组中性粒细胞浸润及组织水肿程度明显改善，白细胞介素1受体相关激酶4的蛋白表达量逐渐降低。术后7d缺血再灌注损伤组皮瓣存活比例为(51.70±7.62)%，白细胞介素1受体相关激酶4抑制剂组皮瓣存活比例高达(86.56±12.23)%，两组比较差异有显著性意义(P<0.01)。提示大鼠皮瓣缺血再灌注损伤后，可以通过抑制白细胞介素1受体相关激酶4活化提高移植皮瓣的成活率。
