首页 > 文献资料
-
人IgE-Fc结构域的基因克隆、原核表达及单克隆抗体的制备
目的：通过制备小鼠抗人 IgE单克隆抗体，为过敏性疾病的研究及诊断打下基础。方法以 CRL8033细胞的 cDNA为模板扩增人 IgE Fcε3-4段基因序列并将其连接到 pET-32a(+)载体中，转化 BL21(DE3)大肠杆菌并进行表达。然后将表达所得包涵体进行变复性，把复性所得蛋白进行亲和纯化，通过 SDS-PAGE验证纯化效果。后将纯化的蛋白作为抗原免疫 BALB/c小鼠，经三次免疫后取小鼠脾脏细胞与 SP2/0细胞融合。用 ELISA法筛选出能结合人 IgE蛋白的阳性克隆，并应用 ELISA、Western blot等手段对杂交瘤所分泌单克隆抗体的特异性进行鉴定。结果成功构建 pET-32a(+)-IgE Fcε3-4载体并纯化 IgE Fcε3-4蛋白。用该蛋白作为免疫原免疫小鼠，成功制备了杂交瘤细胞株，其分泌的单克隆抗体能够特异性结合人 IgE蛋白，可用于 ELISA、Western blot等手段对人 IgE的检测。结论成功获得了可用于特异性检测人 IgE蛋白的单克隆抗体，为人 IgE的检测及哮喘等过敏性疾病的研究、诊断及治疗奠定了基础。
-
老年人免疫特征与过敏性鼻炎
老年人免疫功能随年龄增长出现减退，突出的表现是 T 细胞功能下降。过敏性鼻炎在老年人群中的发生率相对较低，这可能与机体免疫应答随衰老而减弱有关。研究表明，过敏原皮肤试验反应性、血清总 IgE 及特异性 IgE 水平随衰老而改变，但变化趋势尚无统一定论。了解老年人免疫系统的改变，以及老年人过敏性鼻炎的免疫学特征，可为临床诊断与治疗提供理论基础和科学依据。
-
过敏性紫癜患儿血清过敏原检测应用
目的：探究血清过敏原检测在过敏性紫癜患儿诊断中的临床意义。方法120例过敏性紫癜患儿，检测其血清中过敏原特异性免疫球蛋白 E(IgE)抗体等，并找出过敏原。结果120例患儿中，其中总吸入过敏原阳性率为54.17%(65例)，过敏原占比由高到低排列为：尘粉螨>霉菌>树花粉>屋尘>猫狗毛发皮屑>普通豚草蒿属及蟑螂、蚊子；总食物过敏原阳性率为35.00%(42例)，过敏原占比由高到低排列为：花生、大豆>虾、蟹>猪肉、牛肉、羊肉>蛋类>鱼>牛奶。结论多种过敏原在一定条件下均可诱发过敏性紫癜，因此，在临床治疗中既需要进行常规治疗，也应进行过敏原检测，以查找出过敏原，减少紫癜的发生。
-
Th1、Th2细胞及其分泌的相关因子失衡与哮喘患者预后的相关性
目的 探讨哮喘患者外周血Th1、Th2细胞及其分泌的白细胞介素2、白细胞介素4、白细胞介素10(IL-2、IL-4、IL-10)、γ干扰素(IFN-γ)等相关因子的失衡情况,分析其与哮喘患者预后的关系.方法 2012年5月～2014年1月于温州市鹿城区人民医院门诊就诊的62例首诊急性哮喘发作期患者[急性组,此组按病情再分为轻度组(22例)、中度组(18例)及重度组(22例)3个亚组]及58例哮喘缓解期患者(缓解组)采用流式细胞仪与ELISA免疫法测定两组患者外周血Th1细胞浓度及其分泌的细胞因子(IL-2、IFN-γ)和Th2细胞浓度及其分泌的细胞因子(IL-4、IL-10)以及血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白E(IgE)水平.并与60例同期正常健康体检者(对照组)进行比较.结果 急性组患者Th1[(5.25±3.18)％]、IL-2[(124.52±42.14)ng/L]、IFN-γ[(33.12± 10.25) ng/L]、Th 1/Th2(0.59 ±0.08)水平显著低于缓解组[Th1 (9.15±2.85)％、IL-2(195.32±45.13)ng/L、IFN-γ(58.96±12.14)ng/L、Th1/Th2 (0.82±0.06)]及对照组Th1(12.98 ±0.67)％、IL-2 (215.36 ±51.32) ng/L、IFN-γ(64.98±10.42) ng/L、Th1/Th2(1.15±0.18)],而Th2[(22.15±4.58)％]、IL-4[(127.52 ±57.14) ng/L]、IL-10[(90.25±21.04)ng/L]、IgE[(412.63±212.15)×103 U/L]、IgG[(228.21±112.46)×103 U/L]水平则高于缓解组[Th2(15.68±3.12)％、IL-4 (51.25±14.35)ng/L、IL-10(46.78±11.98) ng/L、IgE (212.48±115.62) ×103 U/L、IgG (125.14±45.85) ×103 U/L]及对照组[Th2(1.48 ±0.65)％、IL-4 (46.79±13.57)ng/L、IL-10 (34.52±8.15)ng/L、IgE (48.75±22.95)×103 U/L、IgG(42.36±18.96) ×103 U/L],差异均有统计学意义(P＜0.05).急性组中,重度组患者Th1、IL-2、IFN-γ水平显著低于轻度组、中度组,而Th2、IL-4、IL-10、IgG、IgE水平则高于轻度组和中度组,差异均有统计学意义(P＜0.05).哮喘急性发作期患者血清IL-4、IL-10与IgG、IgE均呈正相关,而IL-2、IFN-γ均与IgG、IgE均呈负相关.结论 Th1/Th2细胞的失衡是哮喘的主要原因与关键环节;Th1/Th2细胞因子分泌失衡与哮喘病程进展关系密切,在哮喘防治过程中应重视对Th1/Th2失衡细胞因子的调节.
-
多西环素对哮喘大鼠血清 IgE、肺组织磷酸化 p38及基质金属蛋白酶9的影响
目的：建立大鼠哮喘模型，探讨多西环素对哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的影响。方法取健康雄性大鼠33只，随机分为3组：正常对照组、哮喘模型组、多西环素干预组。应用给予哮喘大鼠雾化吸入多西环素，观察干预后大鼠肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)及磷酸化的 p38、血清中 IgE 水平的变化。结果与正常对照组相比，哮喘模型组、多西环素干预组 MMP-9的水平显著升高(P <0.05)。哮喘模型组血清 IgE、肺组织磷酸化的 p38磷酸化的 p38/β-actin 水平明显高于多西环素干预组(P <0.01)。结论多西环素可减少肺泡灌洗液中炎性细胞的数量，从而减轻气道炎症；多西环素可下调 MMP-9的水平，从而减缓气道重塑。通过对血清 IgE 和肺组织磷酸化的 p38的影响，多西环素减缓哮喘的气道炎症、气道重塑和气道高反应。
-
变应性鼻炎患者血清抗交叉反应性糖类决定簇 IgE 水平与血清 IgE 水平和皮肤点刺试验的关联性分析
目的：分析变应性鼻炎患者抗交叉反应性糖类决定簇 IgE（anti-CCDIgE）水平与血清 IgE 水平和皮肤点刺试验（SPT）的关联性。方法选取2012年1月—2013年7月北京大学第一医院确诊且符合纳入标准的变应性鼻炎患者和非变应性鼻炎患者161例为研究对象。按照患者是否为变应性鼻炎分为变应性鼻炎组（121例）和对照组（40例）。收集患者一般资料（包括性别、年龄、蜜蜂叮咬情况等），采用斑点免疫印迹法（dot-IBT）检测血清特异性IgE（sIgE）及anti-CCDIgE表达情况，荧光酶联免疫法（FEIA）检测 phadiatop、总 IgE（tIgE）表达情况，并进行 SPT。分析anti-CCDIgE表达情况与性别、年龄、蜜蜂叮咬情况、sIgE 特应性变应原表达情况、phadiatop 表达情况、tIgE 表达情况、SPT 吸入性变应原表达情况的关联性，SPT 结果与年龄、性别、phadiatop 表达情况、tIgE 表达情况的关联性。结果变应性鼻炎组患者 sIgE、anti-CCDIgE、phadiatop、tIgE 阳性表达率、SPT 阳性率均高于对照组，差异有统计学意义（P ﹤0.05）。anti-CCDIgE表达情况与性别，年龄，sIgE 特应性变应原中的混合树木、葎草、艾蒿、户尘、混合尘螨、混合霉菌、蟑螂、狗毛、猫毛表达情况，phadiatop 表达情况，SPT 吸入性变应原中的树1、杂草、云杉属、葎草、树2、禾本科/谷、艾蒿、刺槐、松、粉尘螨、户尘螨、烟曲霉菌、白假丝酵母菌、蟑螂、禾本科、霉菌1、霉菌2、动物毛表达情况无关联性（P ﹥0.05）；anti-CCDIgE表达情况与蜜蜂叮咬情况，sIgE 特应性变应原中的豚草表达情况，tIgE表达情况，SPT 吸入性变应原中的藜、大豚草表达情况存在关联性（ P ﹤0.05）。SPT 结果与性别、tIgE 表达情况无关联性（P ﹥0.05）；SPT 结果与年龄、phadiatop 表达情况存在关联性（ P ﹤0.05）。SPT 阳性率随年龄的增加而增大（χ2趋势＝4.264，P ＝0.039）。结论变应性鼻炎患者anti-CCDIgE水平与血清 IgE（sIgE、tIgE）水平、SPT 结果有一定的关联性，anti-CCDIgE表达情况对确诊变应原的 SPT 和 sIgE 试验有一定干扰，在分析试验结果时应予以注意。
关键词： 鼻炎 变应性 抗交叉反应性糖类决定簇 IgE 免疫球蛋白 E 皮肤点刺试验 -
哮喘患儿血清白细胞介素-5和 IgE与肺功能的相关性研究
目的：检测支气管哮喘患儿外周血白细胞介素（IL）-5、总 IgE（TIgE）和肺功能水平，探讨 IL-5、TIgE 与肺功能水平及支气管哮喘之间的相关性。方法选取35例门诊随诊的哮喘缓解期患儿作为哮喘组，30名同期健康体检儿童作为健康对照组，2组儿童均于清晨空腹取外周静脉血1.0 mL 制备血清，应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定2组儿童血清 IL-5、TIgE，并行肺功能检测。结果哮喘组患儿血清 IL-5、TIgE 水平均较健康对照组升高，差异有统计学意义（t ＝6.84、21.63，P ＜0.01），肺功能用力呼出25％肺活量时呼气流量（FEF25％）、用力呼出50％肺活量时呼气流量（FEF50％）哮喘组较健康对照组水平明显下降（t ＝-2.258、-2.428，P ＜0.05），而第1秒用力呼气容积占用力肺活量的比值（FEV1／FVC％）差异无统计学意义；IL-5与 FEV1／FVC％、FEF25％、FEF50％无相关性，TIgE 与 FEV1／FVC％、FEF25％、FEF50％呈负相关（r＝-0.534、-0.392、-0.394，P ＜0.05）。结论哮喘患儿体内存在 Th1／Th2免疫失衡，IL-5和 TIgE 参与气道高反应与呼吸道重塑的病理生理过程，TIgE 即使在哮喘缓解期也仍然和肺功能密切相关，可以成为辅助判定哮喘严重程度的参考指标。
-
小儿喘息性疾病327例血清过敏原及IgE分析
目的 探讨不同小儿喘息性疾病的过敏原,利于早期采取干预.方法 应用免疫印迹方法定量检测327例小儿喘息性疾病患者血清中过敏原特异性IgE抗体及总IgE水平.结果 哮喘组患儿过敏原筛查阳性率为89.4%,明显高于肺炎组的47.8%及毛细支气管炎组的62.9%(P<0.01);哮喘性支气管炎组过敏原筛查阳性率为77.9%,低于哮喘组(P<0.05).过敏原筛查阳性患儿中哮喘组68.3%、哮喘性支气管炎组70.0%、毛细支气管炎组60.8%对3种以上物质过敏;而肺炎组43.2%对3种以上物质过敏(X2=10.9,P<0.05).哮喘组患儿血清总IgE水平明显高于肺炎组及毛细支气管炎组(P<0.01);但与哮喘性支气管炎组无明显差异(P>0.05).哮喘患者常见的6种过敏原依次为屋尘、猫毛皮屑、户尘螨、羊肉、狗毛皮屑及牛奶,其每种过敏原的检出率均明显高于肺炎组(P<0.05).结论 哮喘及哮喘性支气管炎与过敏反应的关系密切.
-
新疆维吾尔、汉族变应性鼻炎患者 IgE 和 IFN-γ水平及其与鼻黏膜嗜酸性粒细胞浸润的相关性研究
目的：探讨新疆维吾尔、汉族变应性鼻炎（Allergic rhinitis，AR）患者免疫球蛋白 E （Immunoglobulin E，IgE）和干扰素-γ（Interferon gamma，IFN-γ）水平的差异及其与鼻黏膜嗜酸性粒细胞（Eosionphils，EOS）浸润的相关性。方法采用酶联免疫吸附法（Enzyme-linked Immunosorbnent Assay，ELISA）测定62例维吾尔族 AR 患者和59例汉族 AR 患者血清 IgE 和 IFN-γ水平，高倍显微镜下观察鼻黏膜嗜酸细胞病理切片并计数。结果维吾尔、汉族 AR 患者血清 IgE 和 IFN-γ水平差异无统计学意义（t 值分别为－1．208和－1．205，P 均＞0．05）；维吾尔、汉族 AR 患者 IgE 水平与鼻黏膜 EOS 计数均呈正相关（r 值分别为0．583和0．622，P 均＜0．05），IFN-γ水平与鼻黏膜 EOS 计数均呈负相关（r 值分别为－0．453和－0．526，P 均＜0．05）。结论维吾尔、汉族 AR 患者 IgE 和IFN-γ水平无明显差异，IgE 和 IFN-γ在维吾尔、汉族变应性鼻炎发病过程中均发挥重要作用，AR 患者 IgE 和IFN-γ水平表达与鼻黏膜 EOS 浸润相关。
