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套层细胞淋巴瘤细胞系中染色体13q31-q32上miR-17-92基因簇的DNA序列研究
为了研究B细胞淋巴瘤的染色体13q31-q32上miR-17-92基因簇的特点,观察B细胞淋巴瘤中miR-17-92基因簇在基因组DNA水平上是否存在改变,及其对miR-17-92基因簇的表达和与淋巴瘤发生关系的影响.应用PCR和DNA序列测定技术检测Recl、G519和Z138三个套细胞淋巴瘤(mantel cell lymphoma,MCL)细胞系中染色体13q31-q32上miR-17-92基因簇.结果表明,3个MCL细胞系的miR-17-92基因簇DNA序列与正常人的序列比对完全一致.由此可以认为,MCL细胞系中miR-17-92基因簇在DNA序列上没有异常改变,不是miR-17-92基因簇的过度表达原因.
关键词： miRNA miR-17-92基因簇 淋巴瘤 -
过表达miR-17-92基因簇对前列腺癌细胞生物学特性的影响及机制
目的 探讨过表达miR-17-92基因簇对前列腺癌细胞生物学特性的影响及潜在机制.方法 采用过表达miR-17-92基因的质粒转染包装细胞,并构建过表达miR-17-92基因簇的前列腺癌DU145-17-92细胞.采用xCelligence系统实时动态监测DU145-control和 DU145-17-92细胞的生长能力,采用Ki-67抗原检测技术和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)分别检测DU145-control和DU145-17-92细胞中细胞增殖和凋亡情况,采用流式细胞术分析DU145-control和DU145-17-92细胞的细胞周期,采用Western blot检测DU145-control和DU145-17-92细胞中凋亡相关蛋白和增殖相关蛋白的表达.结果 xCelligence系统监测显示,从接种24 h后,DU145-17-92细胞的生长速度显著高于DU145-control细胞(P<0.01).细胞培养24、48、72 h后,DU145-control组的Ki-67阳性细胞率分别为(56.57±1.68)%、(85.48±0.26)%和(90.85±2.08)%,DU145-17-92组的Ki-67阳性细胞率分别为(73.64±0.68)%、(93.43±1.23)%和(97.36±0.86)%,两组仅在培养24 h时差异有统计学意义(P<0.01).细胞培养24、48、72 h后,DU145-control组的细胞凋亡率分别为(6.76±0.09)%、(14.51±0.86)%和(20.73±1.64)%,DU145-17-92组的细胞凋亡率分别为(1.86±0.15)%、(7.90±0.40)%和(4.92±0.48)%,差异均有统计学意义(均P<0.01).Western blot检测显示,DU145-control和DU145-17-92细胞中,Bcl-2家族促凋亡蛋白(BIM)的表达水平分别为0.83±0.00和0.16±0.00, 人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)蛋白的表达水平分别为0.91±0.00和0.13±0.00,差异均有统计学意义(均P<0.01).过表达miR-17-92基因簇促进了蛋白激酶B(Akt)中丝氨酸473位点(p-Akt-473)的磷酸化,但对308位点(p-Akt-308)的磷酸化无明显影响.DU145-control和DU145-17-92细胞中磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)蛋白的表达水平分别为0.21±0.01和0.72±0.01,差异有统计学意义(P<0.01).结论 过表达miR-17-92基因簇能显著影响DU145细胞的生长、增殖、凋亡和细胞周期等生物学特性,这与凋亡调控相关蛋白BIM和抑癌蛋白PTEN表达的下调有关,Akt和ERK信号通路的活化及凋亡相关蛋白表达水平的失调也起着重要的作用.
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二苯甲酮-3对绒毛外滋养层细胞的增殖及miR-17-92基因簇表达的影响
目的 研究二苯甲酮-3(benzophenone-3,BP-3)对绒毛外滋养层(HTR-8/Svneo)细胞的增殖及miR-17-92基因簇表达的影响.方法 将HTR-8/Svneo细胞分别暴露于含终浓度0(溶剂对照)、0.01、0.1、1 mg/L BP-3的培养基中培养24 h.采用CCK-8法检测细胞活性,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,采用Real-time PCR方法检测细胞miR-17-92基因簇的表达水平.结果 与溶剂对照组相比,l mg/L BP-3染毒组HTR-8/Svneo细胞的存活率和miR-17 、miR-19amRNA的表达水平均降低,差异有统计学意义(P＜0.05);而各剂量BP-3染毒组HTR-8/Svneo细胞的凋亡率及mi R-18a、miR-19b、miR-20a、miR-92a mRNA的表达水平均无明显变化.且随着BP-3染毒剂量的升高,HTR-8/Svneo细胞的存活率呈下降趋势,凋亡率呈上升趋势.与抑制剂对照组相比,抑制miR-17和miR-19a表达后HTR-8/Svneo细胞存活率均降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 BP-3可通过抑制miR-17-92簇中miR-17、miR-19a的表达,抑制HTR-8/Svneo细胞增殖.
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广西人群miR-17-92基因簇启动子区rs1491033A/C和rs1813389A/G多态性研究
目的 探讨广西正常人群中miR-17-92基因簇启动子区的rs1491033A/C位点和rs1813389A/G位点多态性分布特点,比较其在不同人群间的分布差异.方法 采取多重单碱基延伸法(SNaPshot)和DNA测序结合的方法对275例广西人群rs1491033A/C和rs1813389A/G位点进行基因分型检测,并分析其基因型和等位基因频率在不同性别及组间分布差异.结果 rs1491033A/C存在 AA、AC、CC 3种基因型,分布频率分别为21. 1％、53. 1％、25. 8％,其基因型和等位基因与人类基因组计划项目公布的欧洲和非洲人群的差异有统计学意义(P < 0. 05);rs1813389A/G存在AA、AG、GG 3种基因型,分布频率分别为40. 0％、50. 2％、9. 8％,其基因型和等位基因频率与欧洲、北京、日本和非洲人群的差异均有统计学意义(P < 0. 05);而两位点基因型及等位基因频率在广西人群的不同性别间均无统计学差异(P > 0. 05).结论 miR-17-92基因簇rs14911033A/C和rs1813389A/G位点多态性在不同种族和地区间存在着不同程度差异.
关键词： miR-17-92基因簇 多态性 种族 -
miR-17-92基因簇反义寡核苷酸对胃癌细胞增殖与侵袭的抑制作用
目的:探讨miR-17-92基因簇反义寡核苷酸对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖及侵袭的影响.方法:合成miR-17-92基因簇中miR-17、miR-18a、miR-20a的反义寡核苷酸,通过实时荧光定量PCR验证miR-17、miR-18a、miR-20a反义寡核苷酸对SGC-7901细胞的miR-17、miR-18a、miR-20a的抑制效果,然后利用MTT、Transwell检测抑制表达后对细胞增殖及侵袭的影响.结果:miR-17、miR-18a、miR-20a的反义寡核苷酸能够抑制对应miRNA的表达,同时抑制了胃癌细胞的增殖与侵袭.结论:miR-17-92基因簇可能在胃癌发生发展中起到了癌基因的作用.
关键词： miR-17-92基因簇 胃癌 SGC-7901 增殖 转移 -
血清miR-17-92基因簇对人乳头瘤病毒阳性宫颈癌的早期诊断效果研究
目的:探讨血清miR-17-92基因簇对人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)阳性宫颈癌的早期诊断价值.方法:选取我院2016-02～2017-02收治的HPV阳性宫颈癌患者60例为宫颈癌组,另选同期住院或门诊就诊的HPV阳性宫颈上皮内瘤变患者54例为宫颈上皮内瘤变组,选取HPV阳性子宫良性病变患者54例为对照组.所有研究对象均接受HPV检测、宫颈液基薄层细胞检测和血清miR-17-92基因簇水平检测.结果:所有研究对象均为HPV阳性,共检出21个亚型,HPV感染率高的高危型为HPV 16,感染率高的低危型为HPV 6.3组血清miR-17、miR-18a、miR-20和miR-92a水平比较,差异均有统计学差异(P＜0.05),且血清miR-17、miR-18a、miR-20和miR-92a对HPV阳性宫颈癌的诊断效果均较好.结论:HPV阳性宫颈癌患者血清miR-17、miR-18a、miR-20和miR-92a表达上调,检测血清miR-17-92基因簇水平有助于宫颈癌的预防和早期诊断.
关键词： 宫颈癌 人乳头瘤病毒 miR-17-92基因簇 诊断
