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华支睾吸虫成虫14～33 ku抗原诊断价值的研究
目的 探讨纯化华支睾吸虫成虫14～33 ku抗原在华支睾吸虫病免疫诊断中的应用价值.方法 使用SDS-PAGE和电洗提法,从可溶性华支睾吸虫成虫抗原中分离纯化14～33 ku抗原,用此抗原经ELISA方法检测华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病、日本血吸虫病、姜片虫病患者血清及健康人血清特异性IgG抗体,并与粗制可溶性成虫抗原和可溶性成虫脱脂抗原ELISA结果相比较.结果 检测63例华支睾吸虫病患者血清,纯化华支睾吸虫成虫14～33 ku抗原ELISA阳性率为76.2%,可溶性成虫抗原和可溶性成虫脱脂抗原ELISA阳性率均为100%;检测25例卫氏并殖吸虫病、85例日本血吸虫病、27例姜片虫病患者血清,14～33 ku抗原的ELISA交叉反应阳性率分别为8.0%、3.5%、0,而可溶性成虫抗原分别为80.0%、62.4%、14.8%,可溶性成虫脱脂抗原分别为64.0%、55.3%、7.4%;检测127例健康人血清,14～33 ku抗原的ELISA假阳性率为0,可溶性成虫抗原和可溶性成虫脱脂抗原的假阳性率分别为5.5%、3.1%.结论 纯化华支睾吸虫成虫14～33 ku抗原用于华支睾吸虫病免疫诊断的特异性优于粗抗原,但敏感性较低.
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显微镜检查和血清学诊断相结合筛查活动性结核
地点:美国加洲大学圣迭戈医学中心.目标:建立一种包括抗体检测的结核病(TB)简单筛查策略,以提高痰抗酸杆菌镜检(AFB涂片)的准确性.方法:血清标本来自190名可疑活动性结核患者.结核病的诊断通过结核杆菌培养确定.HIV感染状况由商业化的血清学试验确定.IgG抗体水平使用纯化的结核杆菌抗原用ELISA法测定.从130名随机选择的病人资料用于制定筛查策略,另60名病人资料用于验证.结果:抗酸菌涂片敏感性为70%,特异性为88%.单个或多个抗原的ELISA同AFB涂片及HIV状况相结合诊断模式的敏感性比每个单项试验都高.包括4种抗原ELISA(38KD抗原,脂阿拉伯甘露聚糖,MPT-64和谷氨酰胺合成酶)诊断敏感性为93%,特异性为76%.和AFB涂片相比其敏感性较高,而特异性无统计学差异.结论:本研究建议建立将多种抗原ELISA同AFB涂片和HIV检查整合在一起的筛查策略.
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电吹风消毒理发工具效果观察
为探讨电吹风消毒理发工具的可行性,使用上海微型电机总厂生产的RCY-75A型喷香电吹风对理发工具消毒效果进行了观察.试验用菌种为枯草杆菌黑色变色种芽胞ATCC 9372株、金黄色葡萄球菌ATCC 6538株、杂色曲霉白色念球菌ATCC10321株、大肠杆菌ATCC 2592株、HBsAg:纯化抗原(1 mg/ml)及阳性血清.按国家消毒效果鉴定方法测定.将新购置的理发工具(推子、剪子、刮胡刀、梳子等)经压力蒸汽灭菌30 min后,分别在不同工具上均匀涂抹上述试验用菌种,然后将电吹风置800 W加热档,并正对理发工具往返移动加热作用12 min(梳子加热程度以不发生变形为准),观察其消毒效果(重复3遍).对照组除不经电吹风加热作用外,余者均与实验组相同.采样方法:用浸有生理盐水的棉拭子在理发工具与皮肤接触部位的两面,往返3次均匀涂抹,剪去手接触部位后,将棉拭子放人5 ml生理盐水试管内封好送检.
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ICI结核病测试卡的敏感性及特异性观察
ICI结核病快速测试卡(下简称ICI卡)是利用结核分枝杆菌在活动期内分泌的5种纯化抗原、应用免疫诊断技术从被测试者体外血清或血浆中检测结核分枝杆菌抗体,测试阳性表示被测试者体内存在活动性肺内结核病或肺外结核病.1999年1～12月我结核门诊为了确定结核病患者病变有无活动性或与其它疾病相鉴别,由受过培训的检验员严格按产品说明书操作并判定结果、应用澳大利亚澳卡国际有限公司提供的ICT卡对97例就诊病人进行了血清检测,随后对这些病人进行6个月的随访追踪,进一步明确诊断,以此对ICT卡的特异性及敏感性进行观察.
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斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原dipstick诊断方法的建立
Dipstick是一种简便、快速的免疫诊断方法.本研究以斯氏狸殖吸虫成虫可溶性蛋白Mr 22 000分子纯化抗原和自制的胶体金标记羊抗人IgG建立胶体金标记dipstick快速诊断法,探讨该抗原在dipstick快速诊断斯氏狸殖吸虫病中的应用价值.
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华支睾吸虫天然蛋白的纯化及其在免疫诊断中应用
已从华支睾吸虫抗原中纯化获得多种纯化抗原,其中部分纯化抗原已初步应用于华支睾吸虫病免疫诊断.本文就华支睾吸虫纯化抗原的纯化方法、免疫诊断效果及应用前景作一综述.
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纯化内耳组织抗原免疫致豚鼠自身免疫性梅尼埃病的实验研究
目的: 探讨4种纯化的内耳抗原免疫致梅尼埃病样内耳病变的情况,从而了解各抗原的致病性,并明确其在内耳的分布情况.方法: 70只豚鼠随机分成A、B、C、D、E 5组(A组10只,余4组各15只),以豚鼠内耳组织抗原的4种亚组分(相对分子质量依次为28 000、42 000、58 000和68 000)作为抗原,依次免疫B、C、D和E组豚鼠,观察听觉功能、前庭功能、血清特异性抗体水平和内耳形态学的改变,并应用免疫组化方法确定其在耳蜗的分布和表达.结果: 免疫前后A(对照)、B组平均听阈无显著性差异,亦未见明显的内耳病理形态学改变.免疫后B、C、D、E组血清特异性抗体水平显著升高.免疫后B组未发现听损动物,C组3只动物(4耳)、D组4只动物(6耳)、E组4只动物(6耳)出现听损,部分听损耳出现膜迷路积水和螺旋神经节细胞减少.免疫组化显示68 000蛋白抗体主要分布于血管纹,Corti器也有少量分布;28 000蛋白抗体主要分布于螺旋神经节;42 000和58 000蛋白则在螺旋神经节、血管纹和螺旋韧带部位均有分布.结论: 粗制内耳抗原中42 000、58 000和68 000亚组分均能独立诱发自身免疫性梅尼埃病样内耳病变,实验性自身免疫性梅尼埃病的致病内耳抗原组分可能并非一种.
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鸡卵核中42000蛋白的纯化及其对系统性红斑狼疮的诊断价值
目的纯化鸡卵核中42000蛋白,并探讨该抗原对系统性红斑狼疮(SLE)的诊断价值.方法将常规SDSPAGE和电洗脱技术相结合,分离纯化鸡卵核中42000蛋白,并用于Dot-ELISA诊断SLE.结果用该技术分离纯化了鸡卵核中42000蛋白,获得约3000g具有明显免疫反应性的高纯度抗原.用于检测SLE病人血清126份,阳性86份,阳性反应率为68.25%;正常人血清100份未发现假阳性;对皮肌炎和多发性肌炎(DM/PM)72份、硬皮病(PSS)48份和混合性结缔组织病(MCTD)78份血清亦无交叉反应出现.结论以纯化的鸡卵核中42000蛋白为抗原,建立的Dot-ELISA方法,用于诊断SLE,具有良好的特异性和敏感性.
