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肝脏泡型包虫病患者外周血单个核细胞IL-9、PU.1及IRF-4 mRNA表达水平的研究
目的 探讨辅助性T细胞9(Th9)相关细胞因子IL-9及转录因子PU.1和IRF-4 mRNA在肝脏泡型包虫病患者外周血单个核细胞中的表达及其作用. 方法 2012年10月-2014年3月新疆医科大学第一附属医院收治的肝脏泡型包虫病患者(AE组)14例,健康志愿者(HC组)14例,应用实时荧光定量PCR法检测两组受试者外周血单个核细胞中IL-9、PU.1和IRF-4 mRNA的相对表达量,数据分析采用非参数秩和检验两独立样本比较法(MW法),用Spearman线性相关性检验分析细胞因子和转录因子之间的相关关系. 结果 肝泡型包虫病组和健康对照组受试者外周血单个核细胞IL-9 mRNA相对表达量分别为2.44911(IQR:0.69268-5.70628)和0.00316(IQR:0.0198-0.00815),差异有统计学意义(P=0.000);PU.1 mRNA相对表达量分别为313.105(IQR:94.80556-548.13140)和0.77147(IQR:0.28829-1.59077),差异有统计学意义(P=0.009);IRF-4 mRNA相对表达量分别为0.04126(IQR:0.01957-0.08204)和21.58347(IQR:8.95431-52.31027),差异有统计学意义(P=0.000),单个核细胞中IL-9 mRNA水平与PU.1 mRNA呈正相关(r=0.8228,P-0.000),与IRF-4 mRNA也呈正相关(r=0.9332,P=0.000). 结论 Th9细胞功能性细胞因子IL-9以及转录因子PU.1和IRF-4参与泡型包虫病发生发展过程,其表达水平上调有利于虫体继续寄生于宿主体内,同时可能与形成泡型包虫慢性肉芽肿有关.
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原发性肾病综合征患者外周血Th9及IL-9的变化及临床意义
目的：研究原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome，PNS)患者外周血中辅助性T细胞9(Th9)的含量及其效应分子白细胞介素(IL-9)的表达情况，探讨Th9及IL-9与PNS临床指标的相关性及可能的免疫学机制。方法收集35例PNS患者和30名健康对照者。用流式细胞仪检测PNS患者和健康对照者外周血中的Th9细胞在CD4+T细胞中的比例；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测PNS患者及健康对照者血浆中IL-9的水平。采用t检验和Spearman秩相关分析进行统计学分析。结果PNS患者外周血中Th9细胞的比例明显高于健康对照组差异有统计学意义[分别为(1.06±0.20)％，(0.26±0.07)％，P<0.05]。 PNS患者外周血IL-9水平高于健康对照组差异有统计学意义[分别为(70.02±13.66) pg／mL，(18.77±5.35) pg／ml，P<0.05]。 PNS患者外周血Th9细胞的表达与24 h尿蛋白、胆固醇、甘油三酯、尿素氮及IL-9的水平呈正相关，与血清白蛋白、IgG水平呈负相关；PNS患者IL-9的水平与24 h尿蛋白、胆固醇、甘油三酯、尿素氮的水平呈正相关，与血清白蛋白、IgG、C3水平呈负相关。结论 PNS患者外周血Th9细胞比例及血浆中lL-9水平显著升高，且与相关临床指标明显相关，提示Th9及IL-9可能在PNS的发病过程中发挥重要作用。
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支气管哮喘患者 Th17和 Th9细胞及其细胞因子的表达及临床意义
目的：测定支气管哮喘（Bronchial asthma）患者体内辅助性 T 细胞（Th ）17和 Th9细胞及其细胞因子白细胞介素（Interleukin，IL）17和 IL-9的水平，探讨两种细胞的表达与哮喘的发病机制之间的关系。方法采用流式细胞术（Flow CytoMetry，FCM）检测患病组和对照组外周血中 Th17和 Th9细胞的比例；应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中 IL-17和 IL-9的的含量。测得数据采用 SPSS19．0统计软件进行分析。结果与对照组相比，哮喘组患者外周血中 Th17和 Th9细胞表达比例及 IL-17和 IL-9的浓度显著升高（P ＜0．05）。结论Th17和 Th9细胞的变化可能在哮喘发病机制中发挥重要作用。
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肿瘤坏死因子样配体1A过表达对慢性实验性结肠炎辅助性T淋巴细胞9的影响
目的 探讨肿瘤坏死因子样配体相关分子1A(TL1A)对慢性实验性结肠炎小鼠结肠组织中Th9活化的影响.方法 间断饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)建立慢性实验性结肠炎模型.将32只淋系细胞高表达TL1A小鼠和野生型C57BL/6小鼠分为野生型对照组、转基因对照组、野生型模型组和转基因模型组.对照组小鼠饮用蒸馏水.模型组小鼠饮用含3% DSS的饮用水.于第29天处死小鼠,测定体质量,记录结肠长度,进行结肠大体评分及疾病活动指数(DAI)评分,H-E染色观察结肠病理学改变,分离肠黏膜固有层单个核细胞(LPMC),应用流式细胞术检测 Th9数量,ELISA法测定血清及LPMC分泌IL-9水平,蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法检测结肠组织中IL-9蛋白质和mRNA的表达水平.采用 t检验和单因素方差分析进行统计学分析.结果 野生型模型组小鼠体质量下降百分比低于转基因模型组[(16.2 ± 1.0)% 比(18.9 ± 1.2)%],差异有统计学意义(t=4.90,P<0.05).转基因模型组小鼠结肠大体形态学评分、DAI评分和病理学评分均高于野生型模型组[分别为(2.80 ± 0.64)分比(1.60 ± 0.31)分,(2.55 ± 0.20)分比(1.58 ± 0.17)分,(11.85 ± 0.86)分比(9.50 ± 0.79)分],差异均有统计学意义(t=4.77、10.45、5.69,P均<0.05).转基因模型组LPMC数高于野生型模型组(3.70× 106± 0.28×106比2.65×106± 0.32×106),差异有统计学意义(t=6.98,P<0.05),转基因模型组结肠组织LPMC中T h9占CD4+T淋巴细胞比例高于野生型模型组[(0.54 ± 0.04)% 比(0.23 ± 0.03)%],差异有统计学意义(t=17.54,P<0.05).转基因模型组血清中IL-9水平高于野生型模型组[(170.23 ± 5.69)pg/mL比(150.62 ± 6.45)pg/mL],差异有统计学意义(t=6.50,P<0.05),转基因模型组LMPC分泌IL-9水平高于野生型模型组[(265.21 ± 8.76)pg/mL比(237.58 ± 10.24)pg/mL],差异有统计学意义(t=5.80,P<0.05).转基因模型组IL-9蛋白质和mRNA表达水平均高于野生型模型组(分别为1.31 ± 0.09比1.18 ± 0.03,8.26 ± 1.13比2.25 ± 0.29),差异均有统计学意义(t=3.88、14.57,P均<0.05).结论 淋系细胞高表达TL1A可促进Th9的分化和IL-9的分泌,进而参与慢性实验性结肠炎的发生.
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急性心肌梗死患者外周血辅助性T淋巴细胞9的表达水平及意义
目的:探讨辅助性T淋巴细胞(helper T cell,Th)9及相关转录因子(PU.1)、细胞因子白细胞介素9(interleukin 9,IL-9)在急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)患者外周血中的表达水平及意义.方法:选取30例AMI患者作为研究对象,同期30名体检正常者作为健康对照组.应用流式细胞术检测外周血Th9细胞的表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中PU.1 mRNA的表达水平;双抗体夹心酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清IL-9的表达水平.结果:AMI患者外周血Th9细胞比例、PU.1 mRNA表达水平及血浆IL-9表达水平均显著高于健康对照组[(1.36±0.62)％vs(0.87±0.27)％,(3.85±1.82)vs(1.57±0.46),(26.29±7.58)pg/mL vs(17.93±7.14)pg/mL,均P<0.01].AMI患者外周血Th9细胞比例与血浆IL-9质量浓度和PBMC中PU.1 mRNA表达水平均呈正相关(r=0.543,0.573,均P<0.01).结论:AMI患者外周血Th9细胞、相关转录因子PU.1和细胞因子IL-9表达水平显著升高,提示Th9细胞可能参与了AMI的发病机制.
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肝脏泡型包虫病患者肝组织IL-9、PU.1和IRF-4mRNA表达水平的研究
目的:通过定量检测感染泡型包虫病患者肝脏组织中IL-9、PU.1和IRF-4 mRNA的表达水平,初步探讨Th9相关细胞因子和转录因子在该疾病感染中所起的可能的作用.方法:将14例经手术确诊的肝脏泡型包虫病患者肝脏组织标本根据病灶分布部位分为病灶组织(L)、病灶邻近组织(PL)和正常肝脏组织(N),应用实时荧光定量PCR技术检测各组标本中IL-9、PU.1和IRF-4 mRNA表达水平,并将数据采用非参数配伍设计Wilcoxon秩和检验和Spearman直线相关性分析的统计学方法进行分析.结果:L组IL-9 mRNA的表达水平明显高于PL组和N组(P=0.002和0.000 9),而PL组较N组轻微升高(P＞ 0.05/3);PU.1 mRNA的表达在L组较PL组和N组显著升高(P=0.013和0.000 8),而N组较PL组轻度降低(P＞ 0.05/3);L组IRF-4 mRNA的表达较N组显著升高(P=0.008 1),而PL组较N组、L组较PL组均轻微升高(P＞ 0.05/3).各组肝脏组织IL-9 mRNA表达水平分别与PU.1和IRF-4mRNA表达水平呈正相关(r=0.872 6和0.924 8,P均＜0.000 1).与N组和PL组相比,IL-9、PU.1和IRF-4 mRNA在L组有显著的高水平的表达.结论:Th9相关细胞因子IL-9及特异性转录因子PU.1和IRF-4可能参与泡型包虫病感染后的免疫应答过程,并有利于多房棘球绦虫在宿主体内继续寄生存活.
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辅助性T细胞9相关细胞因子在类风湿性关节炎患者血清中的表达
目的 探讨辅助性T细胞(Th)9相关细胞因子在类风湿性关节炎(RA)中表达的改变及可能机制.方法 采集15例健康人(健康对照组)和15例RA患者外周血,以酶联免疫吸附法测定血清白细胞介素(IL)-9、IL-4、转化生长因子-β(TGF-β)和干扰素-γ(IFN-γ)水平,分析这些因子在Th9分化中的作用.结果 RA患者血清IL-9水平与健康对照组比较差异无统计学意义(P ＞0.05)；RA患者血清TGF-β水平较健康对照组显著减低,差异有统计学意义(P＜0.01)；RA患者血清IL-4水平较健康对照组有所降低,但差异无统计学意义(P ＞0.05)；IFN-γ水平在5例RA患者外周血中可以检出,其余低于可检出浓度,健康对照组均低于可检出浓度.结论 RA患者外周血Th9细胞的促分化因子降低,抑分化因子升高,导致Th9细胞缺乏分化的微环境,由此推测循环血Th9细胞不参与RA的发病环节.
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慢性阻塞性肺疾病患者外周血辅助性T细胞9及白细胞介素-9的变化及意义
目的 观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血辅助性T细胞9(Th9)及白细胞介素-9(IL-9)在稳定期及急性加重期的变化,探讨其在COPD发病过程中的作用及临床意义.方法 收集COPD急性加重期组(AECOPD)患者22例、COPD稳定期组患者20例、健康对照组15例空腹静脉血,采用流式细胞术(FCM)检测外周血Th9细胞含量,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清IL-9水平.结果 AECOPD组外周血Th9及IL-9含量较COPD稳定期组和健康对照组有明显升高[(0.91±0.17)％、(0.27±0.13)％和(0.28 ±0.13)％,P＜ 0.05;(3.36 ±2.59) pg/ml、(1.47±0.83) pg/ml和(1.82±0.62) pg/ml,P＜0.05],AECOPD组IL-9水平与Th9比例呈正相关(r =0.436,P＜0.05).COPD稳定期组IL-9水平与Th9比例较健康对照组之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Th9细胞可能通过分泌IL-9参与了AECOPD发病过程.
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川崎病患儿急性期外周血Th9细胞与细胞因子IL-9的变化及临床意义
目的：探讨辅助性T细胞9（Th9）及其细胞因子白细胞介素-9（IL-9）在川崎病（KD）患儿急性期外周血的表达及临床意义。方法选取2014年4月至2015年7月45例急性期川崎病患儿进行研究，并且对其进行恢复期随访；另取健康体检儿童45例作为对照组。采用流式细胞术检测外周血Th9水平及酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清IL-9水平。结果 KD患儿急性期Th9及IL-9水平明显高于恢复期和对照组（P<0.05）；而恢复期患儿与对照组的Th9、IL-9水平差异均无统计学意义（P>0.05）。急性期的Th9与CRP、PCT、ESR、PLT及球蛋白水平呈正相关（r=0.324、0.402、0.382、0.467、0.386，均P<0.05），与血清白蛋白呈负相关（r=-0.306；P<0.05）；IL-9水平与CRP、PCT、ESR、PLT、球蛋白水平呈正相关（r=0.365、0.456、0.403、0.423、0.453，均P<0.05），与血清白蛋白呈负相关（r=-0.343；P<0.05）。结论 KD患儿急性期外周血Th9细胞及其细胞因子IL-9水平明显升高，恢复期降至正常；且Th9表达及IL-9水平与急性期指标密切相关。推测Th9细胞与IL-9在KD的发病及转归过程起重要作用。
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联合检测外周血辅助性T细胞9与白细胞介素-9对急性期川崎病患儿的临床诊治价值
目的 研究辅助性T细胞9(T helper 9,Th9)与白细胞介素-9(interleukin-9,IL-9)在急性期川崎病(Ka-wasaki disease,KD)患儿外周血的表达情况,并与KD患者的临床指标进行相关性分析,评价其对KD诊断的临床意义.方法 选取2015年1月至2016年12月在徐州市儿童医院被确诊为急性期KD患儿42例作为KD组,同期选择健康体检儿童42名作为健康对照组,并对KD组患者进行恢复期随访.采用流式细胞术检测两组儿童外周血中的Th9细胞的变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组儿童血清中IL-9的表达浓度;比较Th9和IL-9与KD患者各临床指标的相关性.结果 KD组患儿外周血中Th9细胞比例明显高于健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);KD患儿急性期外周血中Th9细胞比例明显高于恢复期,差异具有统计学意义(P<0.05).KD组患儿外周血中IL-9表达浓度明显高于健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);KD组患儿急性期外周血中IL-9表达浓度明显高于恢复期,差异具有统计学意义(P<0.05).KD患儿急性期外周血中Th9细胞比例与降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、白细胞计数(WBC)及球蛋白(GLB)浓度呈正相关(r=0.406、0.315、0.379、0.305、0.382、0.375,均P<0.05);与血清白蛋白(ALB)浓度呈负相关(r=-0.318,P<0.05);血清中IL-9表达浓度与降钙素原、C反应蛋白、红细胞沉降率、丙氨酸氨基转移酶、白细胞计数及球蛋白浓度呈正相关(r=0.447、0.368、0.402、0.376、0.329、0.462,均P<0.05);与血清白蛋白浓度呈负相关(r=-0.343,P<0.05).结论 KD患儿急性期外周血中Th9细胞比例及IL-9表达浓度明显升高,且与疾病活动度及相关临床指标关系密切,提示Th9及IL-9参与KD患儿的发病及病情发展.
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支气管哮喘患儿外周血Th17和Th9细胞及其细胞因子的表达及临床意义研究
目的 检测儿童支气管哮喘患者T细胞17(T h17)、外周血辅助性T细胞9(T h9)的比例及血清中白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-9(IL-9)和总Ig E的表达,探讨其在儿童支气管哮喘发病中的作用及临床意义.方法 选取46例哮喘患儿,分为哮喘发作组(26例)、哮喘缓解组(20例),并设健康对照组(20例).采用流式细胞术分别检测3组外周血中T h17细胞和Th9细胞的比例;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组儿童血清中IL-17和IL-9的水平;应用特定蛋白分析仪检测3组儿童血清中总Ig E的水平.结果 与哮喘缓解组、健康对照组相比,哮喘发作组外周血T h17和T h9细胞比例较高,差异有统计学意义(P<0.05).与健康对照组相比,哮喘缓解组外周血Th17和Th9细胞比例较高,比较差异有统计学意义(P<0.05).与哮喘缓解组、健康对照组相比,哮喘发作组血清中IL-17、IL-9和总Ig E水平较高,差异有统计学意义(P<0.05).与健康对照组相比,哮喘缓解组血清中IL-17、IL-9和总Ig E水平较高,差异有统计学意义(P<0.05).相关性分析结果表明,支气管哮喘患儿血清中IL-17、IL-9与总Ig E水平均呈正相关(r值分别为0.717、0.491、0.786,P<0.05).结论 支气管哮喘患儿外周血T h17和T h9细胞及其细胞因子在儿童支气管哮喘发病中发挥重要作用,并与哮喘的严重程度呈正相关.
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Th9细胞在小鼠变应性鼻炎中的表达
目的 探讨辅助性T细胞9(Th9)在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中的表达及意义.方法 构建以卵清蛋白致敏的Balb/c小鼠变应性鼻炎模型作为实验组,同期使用生理盐水作为对照组.取2组小鼠鼻黏膜组织,使用流式细胞仪检测2组小鼠鼻黏膜中Th9细胞比例.结果 2组小鼠鼻黏膜中均有Th9细胞的存在,并且实验组中Th9的比例高于对照组[(1.265％±0.381％)掷(0.616％±0.041％)],差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 首次明确变应性鼻炎鼻黏膜中Th9细胞的比例,为阐明AR的发病机制提供了新的理论依据.
