首页 > 文献资料
-
锌指转录因子Snai1通过E-钙黏蛋白调控胃癌侵袭及淋巴结转移
目的 探讨锌指转录因子Snai1在胃癌发生发展中的作用,以及胃癌组织中Snai1与E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的关系.方法 收集本院普外科2010年1月至2012年1月收治的65例胃癌患者手术切除的胃癌组织及邻近的正常胃黏膜组织,免疫组织化学检测Snai1和E-cadherin的表达.体外培养人胃腺癌细胞株SGC-7901,分为3组:空白对照组不进行转染,阴性对照组转染不含靶向作用于Snai1的siRNA的空质粒,转染组转染靶向作用于Snai1的siRNA.转染结束后实时定量PCR和免疫印迹法检测3组细胞Snai1和E-cadherin的表达.结果 胃癌组织中Snai1表达阳性率较正常胃黏膜组织明显增高(58.5％比0.0％,P＜0.001),而E-cadherin表达阳性率明显降低(43.1％比100.0％,P＜0.001).Snai1阳性和阴性的胃癌组织中E-cadherin表达的阳性率分别为28.9％ (11/38)、63.0％(17/27).Snai1阳性的胃癌患者较Snai1阴性的胃癌患者淋巴结转移率明显升高(78.9％比40.7％,P＜0.001).体外细胞实验显示,空白对照组与阴性对照组比较,Snai1和E-cadherin的表达差异无统计学意义(均P＞0.05)；与空白对照组比较,转染组Snai1 mRNA和蛋白表达下调,而E-cadherin mRNA和蛋白表达上调(均P＜0.05).结论 Snai1可通过抑制E-cadherin表达,促进胃癌发生局部浸润及淋巴结转移.
-
乙型肝炎病毒X蛋白对SNAI1基因启动子转录活性调控的作用
目的 观察乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对SNAI1基因启动子活性是否存在调控作用,并明确SNAI1启动子区重要的转录激活调控序列.方法 运用分子克隆技术,构建一系列5'端缺失,保留共同3'端的SNAI1启动子荧光素酶报告质粒.将报告质粒分别与内参pRL-TK质粒、HBx重组腺病毒载体共转染人肝癌SMMC7721细胞,检测各组相对荧光素酶活性.结果 酶切鉴定及DNA测序证实SNAI1基因系列启动子荧光素酶报告质粒构建成功.HBx共转染下的系列启动子缺失实验发现,HBx能显著上调SNAI1基因启动子(-869～+59)活性[SNAI1(-869)Luc:无处理组6.17±0.08,阴性对照组6.09±0.44,实验组12.52±0.72,P<0.01],其转录调控序列定位于SNAI1基因启动子区-869～-514之间.结论 HBx可有效激活SNAI1基因转录表达,SNAI1启动子区存在HBx作用的重要转录活性调控序列,提示了HBx促进肝癌侵袭转移的新路径.
-
生物信息学分析和预测Snai1的靶向作用miRNA分子
目的:通过生物信息学方法预测和寻找Snai1的靶向作用miR A分子.方法:通过生物信息学软件分析Snai1的靶向作用miR A分子,再通过热力学稳定性评分和序列保守性评分,对所获得miR As分子进行分析,获得与Snai1结合特异性好,稳定性高的靶miR A.结果:预测到有12个miR As可与Snai1结合;其中,miR-199a-5p、miR-410与Snai1结合的稳定性和特异性较好.结论:miR-199a-5p、miR-410可能是Snai1的靶miR A.
-
转录因子SNAI1与卵巢癌组织恶性表型之间的关系
目的：通过比较SNAI1在卵巢囊腺瘤和卵巢癌组织中的表达情况，探讨SNAI1表达对卵巢癌患者的意义。方法免疫组织化学检测卵巢囊腺瘤和卵巢癌组织中 SNAI1和 E-cadherin 的表达情况。利用重组腺病毒载体 pAdEasy-SNAI1感染 HO8910卵巢癌细胞株，诱导外源性SNAI1蛋白过表达，以空载腺病毒pAdEasy-GFP作为对照，用Western印迹法检测转染后HO8910细胞SNAI1、N-cadherin的蛋白表达水平。划痕实验检测HO8910细胞转染目的基因后运动能力的改变。结果 SNAI1在卵巢癌组织中的表达显著高于卵巢囊腺瘤（ P＝0.000），且与分化程度相关（ P＝0.014）；E-cadherin 在卵巢癌组织中的表达低于卵巢囊腺瘤组织（P＝0.000），且与分化程度有关（P＝0.029）；SNAI1与 E-cadherin 负相关（r＝-0.342，P＝0.000）；实验组HO8910细胞SNAI1蛋白的表达明显上调（P＜0.01），而N-cadherin的蛋白表达水平明显受抑制（P＜0.01）；实验组迁移能力高于对照组（ P＜0.01）。结论 SNAI1可作为卵巢癌恶性程度评价指标；SNAI1可能通过诱导EMT 的发生而协同促进卵巢癌的浸润转移。
关键词： 卵巢癌 Snai1 E-cadherin -
amiRNA-Snai1逆转人胃癌细胞株SGC7901/DDP对顺铂的耐药性及其机制研究
背景:多药耐药是恶性肿瘤化疗失败的主要原因.研究显示锌指转录因子Snail介导肿瘤细胞发生上皮间质转化(EMT)可促成肿瘤对化疗耐药.目的:探讨人工合成microRNA-Snai1(amiRNA-Snai1)逆转入胃癌细胞株SGC7901/DDP对顺铂(DDP)耐药性的作用及其可能机制.方法:构建稳定转染amiRNA-Snai1质粒或阴性对照质粒的SGC7901/DDP细胞株(SGC7901/DDP-amiRNA组和SGC7901/DDP-Mock组),以蛋白质印迹法、免疫荧光法检测各组细胞中的Snai1、耐药基因ERCC1、Snai1下游靶基因E-cadherin蛋白表达,以CCK-8法检测各组细胞经不同浓度DDP (0.01、0.1、1.0、10.0 mg/L)作用后的存活率,计算DDP对细胞的半数抑制浓度(IC50).结果:DDP耐药SGC7901/DDP细胞中的Snai1蛋白相对表达量显著高于DDP敏感亲本SGC7901细胞(P＜0.05).SGC7901/DDP-amiRNA组细胞Snai1、ERCC1蛋白相对表达量显著低于SGC7901/DDP-Mock组细胞(P＜0.05),荧光强度明显减弱;E-cadherin蛋白相对表达量显著高于SGC790 1/DDP-Mock组细胞(P＜0.05),荧光强度明显增强.DDP对SGC7901/DDP-amiRNA组细胞的IC50值显著低于SGC7901/DDP-Mock组细胞(P＜0.05).结论:以amiRNA-Snai1沉默Snai1基因表达可能通过下调ERCC1表达、上调E-cadherin表达而逆转人胃癌细胞株SGC7901/DDP对DDP的耐药性.
-
Tiam1和SNAI1在结直肠癌EMT中的意义
目的 探讨T淋巴瘤浸润转移因子1(T lymphoma invasion and metastasis factor 1,Tiam1)和锌指转录因子(zinc-finger transcription factor)SNAI1在结直肠癌中的表达及意义.方法 免疫组织化学二步法检测137例正常结直肠组织、结直肠癌组织、淋巴结转移癌组织中Tiam1、SNAI1及E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达情况.结果 Tiam1及SNAI1在结直肠癌组织中的表达高于正常结直肠组织(P=0.000;P=0.000),且与分化程度有关(P=0.014;P=0.014),淋巴结转移癌组织中的表达高于结直肠癌原发灶(P=0.002;P=0.001);E-cadherin在结直肠癌组织中的表达低于正常结直肠组织(P=0.000),且与分化程度有关(P=0.000),淋巴结转移癌组织中的表达低于结直肠癌原发灶(P=0.007);Tiam1与SNAI1正相关(r=0.584,P=0.000),Tiam1与E-cadherin、SNAI1与E-cadherin负相关(r=-0.324,P=0.000;r=-0.420,P=0.000).结论 Tiam1与SNAI1可能通过诱导EMT的发生而协同促进结直肠癌的浸润转移.
关键词： 结直肠癌 上皮间质转化 T淋巴瘤浸润转移因子1 Snai1
