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P19胚胎性癌细胞文献资料
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低氧促进P19细胞向多巴胺能神经元分化
目的 观察低氧对P19细胞神经分化的影响,针对其向多巴胺能神经元分化的现象及机制进行探讨.方法 实验分为常氧组(20%O2)和低氧组(3%O2,每天低氧10 min).对诱导分化的神经元采用免疫细胞化学染色方法鉴定.用流式细胞术及Western blot检测多巴胺能神经元,高效液相色谱法测定分泌的多巴胺.用RT-PCR技术检测低氧诱导因子HIF-1 α mRNA水平.结果 ①在分化的P19细胞中,低氧组神经元含量高于常氧组(P＜0.05),低氧组多巴胺能神经元含量及所分泌的多巴胺显著高于常氧组(P＜0.001);②低氧组诱导期HIF-1 α mRNA表达水平明显高于常氧组.结论 低氧可以促进P19细胞的神经分化,尤其促进P19细胞向多巴胺能神经元分化,HIF-1α可能在其中起了一定作用.
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Wnt信号通路关键基因β-catenin在RA诱导的P19胚胎性癌细胞神经分化过程中的亚细胞分布
Wnt信号参与了小鼠早期神经发育.我们以往的实验结果表明,Wnt信号可引起P19胚胎性癌细胞的神经分化.为了进一步了解Wnt信号在P19神经分化过程中行使功能的时间,我们以Wnt信号通路关键成员β-catenin是否定位在细胞核中作为考察Wnt信号是否能传递到细胞核内调控下游基因活性的指标,分析了Wnt信号在P19细胞神经分化过程中的活性.我们观察到,β-catenin在RA诱导的P19细胞分化的第2到第4天存在核定位.在此期间,Wnt下游基因En-2的表达量也有明显增加.因此,在P19神经分化过程中,Wnt活性可能发生在这一阶段.同时,在神经突的形成、伸长及神经纤维集束过程中,β-catenin在神经突起及神经纤维上也存在特异性分布,提示在此过程中β-catenin可能也行使了功能.
