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羟基红花黄色素A减轻大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤
目的 观察羟基红花黄色素A(HSYA)对乳鼠原代心肌细胞缺氧复氧(A/R)损伤的保护作用及其与磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β(PI3K/Akt/GSK3β)信号通路的关系.方法 分离大鼠的乳鼠心肌细胞,孵育48 h,待细胞贴壁后,分为:对照组(Con组)、缺氧复氧组(A/R组)、HSYA处理组(A/R+H组)、PI3K抑制剂(LY294002)处理组(A/R+L组)和HSYA+ LY294002处理组(A/R+H+L).测培养基上清液LDH;流式细胞仪检测凋亡率;Western blot检测Bcl-2、Bax、Akt、p-Akt(Ser473)、GSK3β和p-GSK3β(Ser9)的蛋白表达水平.结果 与对照组比较,A/R后LDH释放量和凋亡率增加(P<0.001),促凋亡蛋白 Bax表达增加(P<0.001),而抗凋亡蛋白Bcl-2、p-Akt(Ser473)、p-GSK3β(Ser9)蛋白表达减少(P<0.001);HSYA 处理后 LDH 释放量和凋亡率降低(P<0.001),Bax表达减少(P<0.001),而Bcl-2、p-Akt(Ser473)和p-GSK3β(Ser9)蛋白表达增加(P<0.001);与A/R+H组比较,A/R+H+L 组 Bax 表达增加(P<0.001),而 Bcl-2、p-Akt(Ser473)和 p-GSK3β(Ser9)蛋白表达减少(P<0.001).结论 HSYA可以通过调控PI3K/Akt/GSK3β信号通路保护大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤.
关键词： 缺氧/复氧 HSYA 心肌细胞 凋亡 PI3K/Akt/GSK3β信号通路 -
羟基红花黄色素A对急性脊髓损伤模型大鼠神经细胞凋亡的影响
目的：观察羟基红花黄色素A（HSYA）对急性脊髓损伤（ASCI）模型大鼠神经细胞凋亡的影响。方法30只SD大鼠随机分为空白对照组、损伤对照组和HSYA治疗组，每组10只。采用Allens’s打击法建立急性脊髓损伤大鼠模型，分别于术后1、7、14天观察各组大鼠行为学评分，术后14天通过免疫组化方法观察脊髓损伤部位神经细胞caspase-3 p20、Bcl-2和Bax表达。结果HSYA治疗组与损伤对照组大鼠下肢功能均有恢复（P<0.05），且HSYA治疗组恢复更明显（P<0.05）；与损伤对照组比较，HSYA治疗组caspsase-3p20阳性细胞数表达明显减少（P<0.05），Bcl-2阳性细胞显著增加（P<0.05），Bax阳性细胞明显减少（P<0.05）。结论 HSYA对急性脊髓损伤模型大鼠神经细胞凋亡有明显抑制作用，从而减少脊髓损伤部位继发性损伤，促进功能恢复。
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Labrasol对羟基红花黄色素A口服吸收的影响
[目的]研究表面活性剂辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯(Labrasol)对羟基红花黄色素A（ hydroxysafflor yellow A, HSYA）口服生物利用度的影响及其跨膜转运机理。[方法]24只SPF级SD大鼠随机分成正常对照组、Labrasol低剂量组、Labrasol中剂量组、Labrasol高剂量组（ n=6），各组灌胃 HSYA 50mg以及不同浓度的Labrasol。各组大鼠灌胃给药后，用HPLC测定HSYA的血药浓度，并用人结肠癌细胞（ Caco-2）药物转运模型探究 Labrasol对HSYA跨膜转运影响的机理。[结果] Labrasol能显著提高HSYA血药浓度，当配方中Labrasol为20%时，HSYA达到大的口服生物利用度，8h内药时曲线面积（ area under the curve，AUC）为101.425μg·h·mL-1，是口服HSYA水溶液的3.26倍；在Labrasol的作用下，Caco-2药物转运模型从基底侧（ basolateral side，BL）到顶侧（ apical side，AP）明显小于AP到BL的转运速率，Labrasol对 HSYA跨膜转运的影响与 P-糖蛋白（ P-glycopro－tein，P-gp）抑制剂维拉帕米相比，作用效果相当。[结论] Labrasol能显著提高HSYA口服生物利用度；Labrasol可能通过抑制存在于肠黏膜的 P-gp活性而增加HSYA的跨膜转运能力。
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羟基红花黄素A拮抗IL-1β诱导软骨终板细胞凋亡的作用机制
目的 探讨羟基红花黄素A(hydroxy safflower yellow A,HSYA)对 IL-1β诱导小鼠软骨终板细胞凋亡的拮抗作用.方法 用10 μg·L-1的IL-1β诱导正常软骨终板细胞退变,分别制备不同浓度的HSYA培养基作为干预措施,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-PCR检测凋亡相关基因的表达水平.采用Western blot检测细胞内Bax、Bcl-2蛋白表达量,细胞免疫荧光分析各组Bax、Bcl-2细胞内定位.结果 不同浓度的HSYA培养基均能拮抗IL-1β诱导的软骨细胞凋亡.流式细胞分析结果显示各浓度HSYA可以降低IL-1β诱导的小鼠椎间盘软骨终板细胞的凋亡比例;RT-PCR 结果显示各浓度HSYA可拮抗IL-1β诱导细胞上调Bax基因表达,下调Bcl-2基因表达作用;细胞免疫荧光结果显示HSYA 10-5 mol·L-1给药组可下调Bax表达,上调Bcl-2表达;Western blot结果显示HSYA 10-5 mol·L-1 和HSYA 10-6 mol·L-1均可以拮抗IL-1β诱导细胞上调Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达作用.结论 羟基红花黄素A具有拮抗IL-1β诱导小鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡的作用.
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红花提取工艺探讨
目的 优选红花提取工艺.方法 用HPLC法测定,以羟基红花黄色素A的提取转移率为指标,采用正交试验设计考察加水量、提取时间、和提取次数对提取效果的影响.结果加14倍量水提取30min,可使红花中羟基红花黄色素A提取完全,其提取转移率达95.62%.结论 本方法简单可行,可用于工业大生产.
