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ICU重症IgA肾病患者IL-4、C1GALT1及COSMC表达对疾病预后的调控作用分析
目的 探讨在重症IgA肾病患者中IL-4、C1GALT1及COSMC的mRNA表达及潜在预后因素对疾病及其预后的调控作用.方法 选取本院ICU的重症确诊IgA患者61名,同时选取年龄性别可比的体检健康者65名作为对照,并使用荧光定量PCR测定外周血的单核细胞IL-4、C1GALT1以及COSMC的mRNA表达,同时问卷收集可能影响预后的相关因素,IgA患者随访5年,以随访结束时出现终末期肾病为预后不佳进行研究分析.对相关因素对本病预后的调控作用进行分析讨论.患者均知情同意并签署知情同意书.统计分析采用卡方检验以及t检验对一般资料及两组基因表达进行比较,使用多因素Logistics回归模型进行预后因素讨论,使用SPSS17.0统计软件包进行数据分析.结果 IgA患者组IL-4mRNA的表达水平为3.67±0.34,显著高于对照组的1.62±0.16;IgA组的C1GALT1 mRNA以及COSMC mRNA表达水平分别为1.42±0.22和1.34 ±0.13,出现相应的表达降低;对照组分别为1.61 ±0.22和1.63±0.18.对ICU重症IgA肾病患者进行预后分析,单因素分析结果提示IL-4表达增加在预后不良者中的构成显著高于预后良好者,P＜0.05,肾病家族史构成比例在预后不良者中也明显较高.多因素Logistic回归结果提示年龄大于60岁、肌酐超标、高血压、肾病家族史以及IL-4 mRNA表达增加和C1GALT1 mRNA表达减低均为IgA肾病不良预后的危险因素.结论 ICU重症IgA肾病患者IL-4 mRNA表达增加,同时可见相应的C1GALT1 mRNA以及COSMC mRNA表达减低,且这三个因素与高龄、肌酐异常、高血压等因素同为重症IgA的预后不良因素.
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非编码区基因突变对Tn+肿瘤细胞Cosmc mRNA的影响
目的 探讨Tn+肿瘤细胞分子伴侣(Cosmc)非编码区基因突变的方式及其对Cosmc转录水平的影响.方法 免疫磁珠分选肿瘤组织中Tn+、Tn-细胞,提取基凶组DNA(gDNA)和总RNA;RT-PCR检测T-synthase及Cosmc mRNA转录水平的表达状况;PCR扩增Cosmc非编码区基因,基因测序寻找突变位点.结果 Tn-细胞中未发现基因突变,但部分病人肿瘤组织Tn-细胞存在等位基因嵌合体.Tn+肿瘤细胞均可见基因突变,但突变方式和位点并不完全一致.部分病人表现为杂合缺失,部分病人表现为点突变.Tn+、Tn-细胞T-synthase mRNA转录水平无明显差异,Tn+细胞Cosmc mRNA转录水平明显降低.结论 Tn+肿瘤细胞Cosmc非编码区存在基因突变,可能影响Cosmc基因转录导致肿瘤细胞表达Tn抗原.
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人结肠癌细胞 HT-29表达 Tn 抗原的机制研究
目的：探讨结肠癌细胞株HT-29中Tn（＋）细胞表达Tn抗原的机制。方法免疫磁珠分选结肠癌细胞株HT-29中HT-29-Tn（＋）细胞与HT-29-Tn（－）细胞；RT-PCR、PCR 扩增Cosmc基因，测序比对是否存在基因突变。野生型Cosmc转染正常及肿瘤细胞；Western blot检测转染后Cosmc蛋白表达状况；荧光分析法检测转染前后T-synthase活性。结果分选后的HT-29-Tn（＋）细胞缺乏T-synthase活性，Cosmc基因编码区缺失，转染WtCosmc可恢复Tn抗原阳性细胞的T-synthase活性，抑制Tn抗原表达。结论 Cosmc基因编码区缺失引起T-synthase活性丧失导致人结肠癌HT-29-Tn（＋）细胞表达Tn抗原。
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粘膜方对IgA肾病患者外周血B淋巴细胞Comsc表达的影响
目的:研究粘膜方是否通过上调外周B淋巴细胞Cosmc的表达,从而减少IgA肾病患者IgA1异常糖基化的量.方法:从IgA肾病患者及健康体检者采集静脉血,分离外周B淋巴细胞,采用体外细胞培养的方法,与正常人肾小球系膜细胞共培养后收集上清,与粘膜方含药血清共作用,采用实时RT-PCR和Western Blot测定Cosmc和TGF-β1mRNA和蛋白的表达水平.结果:IgA肾病患者外周血B淋巴细胞Cosmc的mRNA和蛋白表达比健康组减少,且P＜0.01,差异具有统计学意义;经粘膜方含药血清共作用后,IgA肾病患者外周B淋巴细胞Cosmc的mRNA和蛋白水平表达增加,且P＜0.001,差异具有统计学意义;IgA肾病患者外周血B淋巴细胞TGF-β1的mRNA和蛋白表达比健康组上升,且P＜0.05,差异具有统计学意义;经粘膜方含药血清共作用后,IgA肾病患者外周B淋巴细胞TGF-β1的mRNA和蛋白表达下降,且P＜0.01,差异具有统计学意义.结论:在体外人肾系膜细胞培养实验中,具有和解法立法组方的粘膜方能上调IgA肾病患者外周B淋巴细胞的Cosmc mRNA和蛋白的表达水平,并下调IgA肾病患者外周B淋巴细胞的TGF-β1和蛋白的表达水平.
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六味地黄汤对IgA肾病大鼠外周血C1 GALT1及Cosmc mRNA表达影响研究?
目的：观察六味地黄汤对IgA肾病大鼠外周血C1GALT1及Cosmc mRNA表达,探讨其对IgA糖基化的影响。方法：SD大鼠40只随机分为正常对照组,模型组,雷公藤多苷片组,六味地黄汤组。除正常对照组外均采用运用牛血清白蛋白+脂多糖+四氯化碳方法建立实验性IgA肾病模型。造模成功后连续灌胃4周。将各组大鼠外周血分离的PBMC悬液,采用实时荧光定量PCR检测C1GALT1及Cosmc mRNA的表达,ELISA法测定外周血中IgA含量,凝集素亲和 ELISA 法检测IgA1异常糖基化程度,并进行定量分析。结果：各组C1GALT1mRNA表达量并差异无统计学意义(P>0.05)；在各组Cosmc mRNA表达中,六味地黄汤组及雷公藤多苷片组表达均较模型组升高(P<0.05),但六味地黄汤组表达较雷公藤多苷片组低(P<0.05)；在各组大鼠IgA含量及异常糖基化程度比较中,六味地黄汤组较模型组下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：六味地黄汤可以上调Cosmc mRNA表达,增加C1GALT1活性,改善IgA1糖基化异常,从而下调体内IgA1含量,避免进一步沉积肾脏,延缓IgA肾病的进展。
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Cosmc、T抗原和VEGFR／KDR在婴儿血管瘤不同分期的表达及意义
目的：检测Cosmc、T抗原和VEGFR/KDR在婴儿血管瘤不同分期中表达的变化，探讨其在婴儿血管瘤病程发展演化中的意义。方法：采用免疫组织化学法检测Cosmc和T抗原和VEGFR/KDR在45例手术切除的婴儿血管瘤与10例正常皮肤组织的表达情况。所有标本经术后病理报告证实为婴儿血管瘤，根据Mulliken标准分为增生组、消退组和消退完成组。结果：①Cosmc、T抗原和VEGFR/KDR在增生组中高表达，阳性表达率明显高于消退组，统计结果具有显著性差异（P＜0．05），且增生组与消退组的表达分别与对照组比较具有显著性差异（P＜0．05）。②Cosmc在婴儿血管瘤中的表达与T抗原的表达呈显著正相关（r＝0．50，P＜0．01）。③VEGFR/KDR在婴儿血管瘤中的表达与T抗原的表达呈显著正相关（r＝0．53，P＜0．01）。结论：Cosmc、T抗原和VEGFR/KDR可能在婴儿血管瘤增生、消退过程中起关键作用。
