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重组戊型肝炎病毒衣壳蛋白p239特异性吸附、侵入HepG2细胞并阻断野病毒对肝细胞的感染
戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)引起的戊型肝炎在临床症状上与甲肝相似,但病死率更高,妊娠晚期病死率可高达15%～25%[1].近年来,戊肝在世界各地暴发不断;而我国戊肝发病迅速增长,已经成为普遍流行、危害严重的疾病之一[2].
关键词： 戊型肝炎病毒(HEV) 病毒吸附 -
Grp78/Bip介导戊型肝炎病毒衣壳蛋白对宿主细胞的吸附
目的 探讨Grp78/Bip在戊型肝炎病毒(HEV)衣壳蛋白进入宿主细胞过程中的作用.方法 采用pull-down和免疫共沉淀技术进一步验证p239与Grp78/Bip的相互作用;采用激光共聚焦显微镜技术检测p239与细胞膜表面Grp78/Bip共定位情况;采用原核表达纯化的Grp78/Bip蛋白封闭p239的Grp78/Bip结合位点,检测其阻断p239吸附细胞的效果.结果 p239与Grp78/Bip可以直接结合,而且这种结合是可逆的生理性结合;p239与Grp78/Bip在细胞膜上存在部分共定位;Grp78/Bip能部分阻断p239对肝细胞的吸附.结论 Grp78/Bip参与并介导HEV衣壳蛋白对宿主细胞的吸附.
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黄芪甲苷体外抗腺病毒作用研究
目的 研究黄芪甲苷体外抗腺病毒作用.方法 采用细胞病变效应(CPE)抑制实验和噻唑蓝(MTT)比色法观察黄芪甲苷对人腺病毒3型(HAdV3)的抑制作用,激光共聚焦显微镜荧光分析检测黄芪甲苷在病毒生物合成阶段对HAdV3六邻体(hexon)蛋白表达的影响.结果 CPE及MTT结果表明黄芪甲苷对腺病毒有直接灭活作用,同时能够抑制腺病毒的复制和吸附,病毒抑制率与药物浓度呈正相关,但在细胞保护作用方式下黄芪甲苷不能阻断病毒进入细胞.在生物合成阶段黄芪甲苷组与病毒对照组比较hexon蛋白的表达明显降低.结论 黄芪甲苷在体外具有抗腺病毒作用,黄芪甲苷抗腺病毒作用可能与其在生物合成阶段抑制hexon蛋白的表达有关.
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鹅流感病毒唾液酸受体分布特点及病毒吸附模式
目的:探讨鹅流感病毒唾液酸(SA)受体分布特点、病毒吸附模式及其作用.方法:凝集素组织化学法检测鹅呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,荧光素Alexa488标记禽流感病毒H9N1和人流感病毒H1N1吸附鹅呼吸道和消化道组织.结果:鹅呼吸道和消化道以表达SAα-2,3半乳糖(Gaal)受体为主,SAα-2,3Gal受体在鹅呼吸道气管、支气管、次级支气管和副支气管、消化道结肠以及泄殖腔呈阳性表达,而SAa-2,6Gal受体缺乏或仅弱表达.禽流感病毒H9N1吸附鹅呼吸道气管、支气管、次级支气管和副支气管、消化道结肠以及泄殖腔,但人流感病毒H1N1仅少量病毒吸附副支气管、结肠以及泄殖腔.结论:鹅呼吸道和消化道同时表达SAα-2,3Gal受体,有助于禽流感病毒复制部位由消化道扩展到呼吸道以及各亚型禽流感病毒之间的基因重配,提示鹅在禽流感病毒的起源和进化中可能起重要作用.
