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流感病毒唾液酸受体在哮喘小鼠气道组织的分布和表达
目的 观察对比流感病毒唾液酸a2,3-半乳糖(SAa2,3-gal)和唾液酸a2,6-半乳糖(SAa2,6-gal)受体在哮喘小鼠气道组织中的分布和表达以及地塞米松干预对其表达的影响.方法 30只BALB/c小鼠被随机分成正常组(N组)、哮喘组(A组)和地塞米松干预组(D组).A组小鼠以卵蛋白(OVA)致敏后激发建立哮喘模型,D组激发前腹腔注射地塞米松,余同A组.行BALF细胞计数,ELISA测定BALF中IL-5浓度,HE染色观察肺组织病理学改变及气道炎症评分,AB-PAS染色观察黏液分泌,免疫组化法(IHC)观察肺组织Muc5ac蛋白表达,免疫荧光法观察各组小鼠气道组织中唾液酸受体分布和表达的差异.结果 A组小鼠BALF嗜酸性粒细胞数、IL-5浓度、气道炎症评分、气道黏液分泌较N组小鼠均升高,而D组小鼠上述指标较A组降低.SAa2,3-gal和SAa2,6-gal受体在各组气道组织中均有表达.SAa2,3-gal受体在哮喘组气道上皮细胞表达的平均阳性率较N组升高,SAa2,3-gal和SAa2,6-gal受体在D组气道上皮细胞分布和表达的平均阳性率均较N组和A组升高(P＜0.05).结论哮喘组小鼠气道上皮SAa2,3-gal受体的表达增强;地塞米松上调SAa2,3-gal和SAa2,6-gal受体的表达.两者可能是哮喘患者对流感病毒易感性增强的原因之一.
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唾液酸受体并非流感病毒各亚型在雪貂组织中播散分布的决定因子
目的 探讨流感病毒在雪貂组织中的分布与唾液酸受体的关系.方法 用病毒分离的方法分析流感病毒H5N1( SZA06H,A/VN/1203/04),SH1N1,H3N2(Brisbane/09,HK/09)在雪貂各组织中分布,用直接免疫荧光法分析雪貂各组织的唾液酸受体的分布,并通过体外实验证实活病毒与组织上受体的结合.结果 H5N1(SZ)和H5N1(A/VN/1203/04)在雪貂的肝、脾、肺、肠中有分布,H5N1(A/VN/1203/04)在脑组织中也有分布,而SH1N1、H3N2( Brisbane/09,HK/09)只分布于肠组织.而唾液酸受体SAα2,6Gal和SAα2,3Gal的Ⅰ型受体分布于脾、心、肺、肠、脑组织中,和SAα2,3GalⅡ型受体分布于肝、脾、心、肺、肠、脑组织.SH1N1病毒与SAα2,6Gal能结合,而H5N1与SAα2,3Gal结合.结论 H5N1能在雪貂的多器官组织组织中分布和繁殖,而H3N2和SH1N1仅能在肠组织中分布繁殖.SAα2,6Gal和SAα2,3Gal受体在雪貂多器官组织中均有表达,说明唾液酸受体是病毒进入的门户,但不是病毒分布的决定因子.
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鹧鸪禽流感病毒和人流感病毒唾液酸受体分布特征
目的 探讨鹧鸪禽流感病毒和人流感病毒唾液酸受体分布特点及其作用.方法 用亲和组化法检测鹧鸪呼吸道与消化道流感病毒唾液酸受体的分布,荧光素Alexa488标记禽流感病毒H9N1和人流感病毒H1N1,分别与鹧鸪呼吸道、消化道各解剖部位组织细胞结合.结果 鹧鸪呼吸道同时表达SAα 2,3Gal和SAα-2,6Gal两种受体,但其消化道仅表达SAα-2,3Gal受体.SAα-2,3Gal受体在鹧鸪呼吸道各部位和消化道结肠上皮细胞呈强阳性弥漫分布;SAα-2,6Gal受体在呼吸道气管、支气管和次级支气管呈强阳性弥漫分布,而副支气管、消化道结肠均为缺乏或仅表达极少量.H9N1禽流感病毒与鹧鸪呼吸道各部位和消化道结肠均结合;人流感病毒H1N1与鹧鸪的气管、支气管、次级支气管结合,但未见与副支气管和结肠结合,此结果与鹧鸪呼吸道和消化道SAα-2,3Gal和SAα-2,6Gal受体分布总体一致.结论 鹧鸪同时表达SAα-2,3Gal和SAα-2,6Gal受体,能与禽流感病毒和人流感病毒结合,有助于禽流感病毒与人流感病毒基因重配,提示其可充当流感病毒潜在的中间宿主.
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唾液酸在肠道病毒71型感染人结直肠腺癌细胞中的抑制作用
目的：评价唾液酸（SA）在肠道病毒71（EV71）感染人结直肠腺癌上皮细胞（ DLD-1）中的抑制作用。方法：以能表达唾液酸葡聚糖的 DLD-1细胞为研究对象，用不同药物分别阻断 DLD-1细胞膜上不同识别位点，证实唾液酸为EV71感染细胞受体。采用噻唑蓝（ MTT ）比色法检测唾液酸苷酶对 DLD-1细胞的毒性以及抗EV71作用；实时荧光定量RT-PCR检测EV71病毒相对含量。结果：EV71能特异性的感染 DLD-1细胞；10 mu／mL 唾液酸苷酶处理组（71．2±1．9，P ＜0．01）和50 mu／mL 组（84．7±1．8，P ＜0．01）与血清对照组相比，EV71复制的比率显著下降；破坏DLD-1细胞膜上唾液酸O糖苷键，EV71病毒相对含量显著下降（70．3±2．5，P ＜0．01）；0．25 mg／mL 唾液酸-α2，3半乳糖（SA-α2，3Gal）处理组与对照组相比，EV71病毒相对含量明显下降（48．3±2．6，P ＜0．01）。结论：唾液酸是 EV71感染 DLD-1细胞的识别受体；唾液酸提取物能抑制EV71在DLD-1细胞中的复制。
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鹅流感病毒唾液酸受体分布特点及病毒吸附模式
目的:探讨鹅流感病毒唾液酸(SA)受体分布特点、病毒吸附模式及其作用.方法:凝集素组织化学法检测鹅呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,荧光素Alexa488标记禽流感病毒H9N1和人流感病毒H1N1吸附鹅呼吸道和消化道组织.结果:鹅呼吸道和消化道以表达SAα-2,3半乳糖(Gaal)受体为主,SAα-2,3Gal受体在鹅呼吸道气管、支气管、次级支气管和副支气管、消化道结肠以及泄殖腔呈阳性表达,而SAa-2,6Gal受体缺乏或仅弱表达.禽流感病毒H9N1吸附鹅呼吸道气管、支气管、次级支气管和副支气管、消化道结肠以及泄殖腔,但人流感病毒H1N1仅少量病毒吸附副支气管、结肠以及泄殖腔.结论:鹅呼吸道和消化道同时表达SAα-2,3Gal受体,有助于禽流感病毒复制部位由消化道扩展到呼吸道以及各亚型禽流感病毒之间的基因重配,提示鹅在禽流感病毒的起源和进化中可能起重要作用.
