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兔出血症病毒复制子的构建及其在RK-13细胞中的复制
为研究兔出血症病毒(RHDV)的复制机制、病毒与宿主之间的相互作用以及致病机制等,创建一个安全、有效的技术平台,在前期构建的RHDV侵染性克隆基础上,将病毒的衣壳蛋白编码区删除,保留了RHDV复制必需的所有蛋白酶基因和两端的非编码区,构建了RHDV复制子.试验结果证明,将该复制子RNA导入RK13细胞中后,能够进行高水平的复制和表达.
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兔出血症病毒在体外诱导细胞凋亡
兔出血症病毒(RHDV)是杯状病毒科兔病毒属成员,是一种单股正链RNA病毒.VP60是RHDV重要的一种结构蛋白,它不仅能够自我装配成衣壳以保护病毒核酸,并且是RHDV的主要免疫原,可诱导机体产生保护性中和抗体.VP10是RDHV的一种次级结构蛋白,其功能仍未知.
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兔出血症病毒血凝试验及血凝抑制试验影响因素的探讨
目的探讨影响血凝、血凝抑制实验结果的各种可能因素.方法比较7种微量反应板在不同稀释系统和不同血清处理方法情况下进行血凝和血凝抑制试验的结果.结果找出了图谱清晰,反应结果规律、稳定的实验条件.结论为我国国标的进一步完善提供了实验依据.
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兔出血症病毒分子生物学研究进展
兔出血症(Rabbij hemorrhagic disease,RHD)是由兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)引起的一种急性、致死性传染病,对易感兔致病率可达90%,病死率可高达100%,是对兔的一种毁灭性传染病.该病于1984年在我国江苏省首次爆发,随后蔓延至亚、欧、非以及中美洲等地区的一些国家,给养兔业造成巨大的经济损失.
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实验动物泰泽氏菌、肺支原体、兔出血症病毒检测方法的评价
泰泽氏菌、肺支原体、兔出血症病毒是实验动物重要的致病病原体,可引起呼吸系统、消化系统疾病,对动物的生产和动物实验可产生不良影响.本文对上述国家检测标准规定必须检测且有检测难度的三种病原体进行方法学总结,以获得更好特异性和敏感性的诊断方法;提出传统方法初检、PCR方法复检的方法以提高检测结果的准确性和可靠性.
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兔出血症病毒VP60基因在昆虫细胞中形成病毒样颗粒及其特性
目的 将兔出血症病毒(RHDV)VP60全长基因在昆虫细胞-杆状病毒系统中表达,验证重组蛋白形成病毒样颗粒(VLPs)的能力及其生物学特性,探讨VLPs作为检测抗原及亚单位疫苗的潜力.方法 用Bac-to-Bac系统体外表达RHDV VP60全长基因.以免疫荧光及Western blotting检测蛋白表达情况及确定蛋白佳表达条件;免疫电镜观察VLPs形态,并对VLPs的血凝性、免疫原性进行检测.结果 SDS-PAGE电泳分析表明,表达的重组蛋白分子量大小约为68 KDa,在免疫荧光、琼脂扩散、ELISA试验中均与RHD多克隆抗血清特异性反应;接种重组病毒的Sf9细胞裂解液在电镜下可观察到与RHDV形态相似的VLPs;该VLPs可凝集人"O"、"B"型红细胞,凝集可被RHD多克隆抗血清所抑制;含VLPs的Sf9细胞裂解液可不经纯化用作间接ELISA抗原,所建立的ELISA方法与进口商品化试剂盒相比,特异性良好,敏感性、检出率稍低;将含VLPs的细胞裂解液加氟氏佐剂免疫兔,HI效价可达1∶40,可经受致死量病毒攻击.结论 RHDV-VLPs的获得及其良好的免疫原性,为RHD血清学检测试剂的标准化、亚单位疫苗研制应用奠定基础,同时在转移载体及RHDV受体方面研究亦有潜在应用价值.
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兔出血症的诊断方法
兔出血症是由兔出血症病毒(RHDV)引起的一种急性、高度接触性传染病,对动物生产和动物实验造成严重危害.自1984年我国首次报道本病以来,为对本病做出早期和准确的诊断,防止疾病传播和流行,许多学者开展了这方面的研究,并建立了多种检测方法.本文就近十年来用于RHDV的检测方法作一概述.
